| 摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第11-13页 |
| 第二章 文献综述 | 第13-38页 |
| 2.1 RNA 干扰的机制 | 第13-14页 |
| 2.2 载体递送 siRNA 的壁垒及目前解决方案 | 第14-22页 |
| 2.2.1 体内递送 siRNA 的壁垒及目前解决方案 | 第14-18页 |
| 2.2.2 细胞水平递送 siRNA 的壁垒及目前解决方案 | 第18-22页 |
| 2.3 siRNA 载体的材料种类 | 第22-36页 |
| 2.3.1 基于脂质的载体 | 第23-27页 |
| 2.3.2 基于聚合物的载体 | 第27-31页 |
| 2.3.3 基于无机物的载体 | 第31-36页 |
| 2.4 研究目的及内容 | 第36-38页 |
| 第三章 基于聚甲基丙烯酸二甲氨基乙酯、聚乙二醇和聚己内酯的聚阳离子的分子构造对siRNA 递送效率的影响 | 第38-63页 |
| 3.1 引言 | 第38-39页 |
| 3.2 实验部分 | 第39-46页 |
| 3.2.1 实验原料 | 第39-40页 |
| 3.2.2 基础反应物的制备及化学试剂的精制 | 第40-41页 |
| 3.2.3 PECbD 和 PECgD 的合成及表征 | 第41-42页 |
| 3.2.4 制备纳米粒(NPs)及纳米粒/siRNA 复合物 | 第42页 |
| 3.2.5 琼脂糖凝胶电泳阻滞分析 | 第42页 |
| 3.2.6 复合物的粒径及 zeta 电势表征 | 第42-43页 |
| 3.2.7 复合物的细胞毒性 | 第43页 |
| 3.2.8 细胞对含有 Cy5 标记 siRNA 复合物的内吞及其细胞内分布 | 第43-44页 |
| 3.2.9 体外基因沉默实验 | 第44页 |
| 3.2.10 载体介导的 siRNA 体内分布实验 | 第44-45页 |
| 3.2.11 冰冻切片的制备及共聚焦显微镜观察 | 第45-46页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第46-62页 |
| 3.3.1 PECbD 和 PECgD 的制备 | 第46-47页 |
| 3.3.2 PECbD NPs/siRNA 和 PECgD NPs/siRNA 复合物的表征 | 第47-51页 |
| 3.3.3 细胞对 PECbD NPs/siRNA 和 PECgD NPs/siRNA 复合物的内吞及其细胞内分布 | 第51-55页 |
| 3.3.4 PECbD NPs/siRNA 和 PECgD NPs/siRNA 复合物的体外基因沉默效率 | 第55-57页 |
| 3.3.5 PECbD NPs/siRNA 和 PECgD NPs/siRNA 复合物的体内分布 | 第57-62页 |
| 3.4 本章小结 | 第62-63页 |
| 第四章 基于胞内脱除聚阳离子的结构设计促进 siRNA 递送功效 | 第63-89页 |
| 4.1 引言 | 第63-64页 |
| 4.2 实验部分 | 第64-71页 |
| 4.2.1 实验原料 | 第64-65页 |
| 4.2.2 PECssD 的合成 | 第65-68页 |
| 4.2.3 琼脂糖凝胶电泳阻滞分析 | 第68页 |
| 4.2.4 复合胶束的粒径及 zeta 电势测定 | 第68页 |
| 4.2.5 还原反应引发的 PECssD 断裂以及 PECssD/siRNA 复合胶束的解体 | 第68页 |
| 4.2.6 细胞毒性 | 第68页 |
| 4.2.7 细胞对含有 FAM 标记的 siRNA 复合物的内吞及其细胞内分布 | 第68-69页 |
| 4.2.8 体外基因沉默实验 | 第69页 |
| 4.2.9 载体介导的 siRNA 体内分布实验及抑瘤实验 | 第69页 |
| 4.2.10 冰冻切片的制备及共聚焦显微镜观察 | 第69页 |
| 4.2.11 制备包载 PTX 的 DENP 纳米粒及 PTX 从 DENPs 中的释放 | 第69-71页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第71-88页 |
| 4.3.1 PECssD 和 PECssD/siRNA 复合胶束的制备和表征 | 第71-76页 |
| 4.3.2 还原反应引发的 PECssD 断裂以及 PECssD/siRNA 复合胶束的解体 | 第76-78页 |
| 4.3.3 脱除 PDMAEMA 后促进细胞内吞以及内涵体逃逸 | 第78-81页 |
| 4.3.4 PECssD/siRNA 复合胶束的体外细胞毒性以及基因沉默效率 | 第81-83页 |
| 4.3.5 PECssD/siRNA 复合胶束的体内分布 | 第83-85页 |
| 4.3.6 PECssD/siRNA 复合胶束的体内肿瘤靶向以及抑瘤实验 | 第85-88页 |
| 4.4 本章小结 | 第88-89页 |
| 第五章 细胞内可断裂的聚甲基丙烯酸二甲氨基乙酯/介孔硅杂化纳米粒及其对 siRNA 递送的性能 | 第89-111页 |
| 5.1 引言 | 第89-90页 |
| 5.2 实验部分 | 第90-94页 |
| 5.2.1 实验原料 | 第90-91页 |
| 5.2.2 MSN10的合成 | 第91页 |
| 5.2.3 通过浸渍法制备 ssCP-MSNs | 第91页 |
| 5.2.4 介孔硅的表征 | 第91-92页 |
| 5.2.5 介孔硅分散液的制备及 ssCP-MSNs/siRNA 复合物的制备 | 第92页 |
| 5.2.6 琼脂糖凝胶电泳阻滞分析 | 第92页 |
| 5.2.7 细胞毒性 | 第92页 |
| 5.2.8 还原反应引发的 PDMAEMA 从 ssCP-MSNs 上的断裂及 siRNA 的促进释放 | 第92-93页 |
| 5.2.9 细胞对含有 FAM 标记的 siRNA 复合物的内吞及其细胞内分布 | 第93页 |
| 5.2.10 体外荧光素酶表达抑制实验 | 第93页 |
| 5.2.11 通过 Western blot 法检测对 Lamin A/C 基因的沉默效率 | 第93页 |
| 5.2.12 体内试验 | 第93-94页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第94-110页 |
| 5.3.1 ssCP-MSNs 的制备与表征 | 第94-97页 |
| 5.3.2 ssCP-MSNs/siRNA 复合物的表征 | 第97-101页 |
| 5.3.3 还原反应引发的 PDMAEMA 从 ssCP-MSNs 上的断裂及 siRNA 的促进释放 | 第101-102页 |
| 5.3.4 ssCP-MSNs/siRNA 复合物的细胞内吞及细胞内分布 | 第102-104页 |
| 5.3.5 ssCP-MSNs/siRNA 复合物的基因沉默效率 | 第104-105页 |
| 5.3.6 ssCP-MSNs/siRNA 复合物的体内分布 | 第105-108页 |
| 5.3.7 ssCP-MSNs/siRNA 的体内肿瘤靶向以及肿瘤生长抑制 | 第108-110页 |
| 5.4 本章小结 | 第110-111页 |
| 第六章 温敏型负载 siRNA 纳米粒及其对 siRNA 的递送性能 | 第111-123页 |
| 6.1 引言 | 第111-112页 |
| 6.2 实验部分 | 第112-116页 |
| 6.2.1 实验原料 | 第112页 |
| 6.2.2 PNIPAM-mPEG 的制备 | 第112-113页 |
| 6.2.3 PNIPAM-mPEG 的表征 | 第113页 |
| 6.2.4 DC-Chol 的制备 | 第113页 |
| 6.2.5 用双乳化技术制备包载 siRNA 的纳米粒(DENPs) | 第113页 |
| 6.2.6 DENPs 的表征 | 第113-114页 |
| 6.2.7 siRNA 从 DENPs 中的体外释放 | 第114页 |
| 6.2.8 体外荧光素酶表达抑制实验 | 第114页 |
| 6.2.9 细胞毒性 | 第114页 |
| 6.2.10 体内试验 | 第114页 |
| 6.2.11 制备包载 PTX 的 DENP 纳米粒及 PTX 从 DENPs 中的释放 | 第114-116页 |
| 6.3 实验结果与讨论 | 第116-122页 |
| 6.3.1 mPEG-PNIPAM 和 DC-Chol 的制备与表征 | 第116-117页 |
| 6.3.2 DENPs 的温敏性及 siRNA 在冷击条件下的加速释放 | 第117-119页 |
| 6.3.3 DENPs/siRNA 纳米粒的温敏基因沉默行为 | 第119-120页 |
| 6.3.4 DENPs/siRNA 纳米粒的体内分布 | 第120-122页 |
| 6.3.5 DENPs 负载紫杉醇的性能，及体外释放 | 第122页 |
| 6.4 本章小结 | 第122-123页 |
| 第七章 全文结论 | 第123-125页 |
| 参考文献 | 第125-146页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第146-147页 |
| 致谢 | 第147页 |
