摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
List of Figures | 第13-15页 |
List of Tables | 第15-16页 |
Abbreviations | 第16-19页 |
Chapter Ⅰ General Introduction | 第19-35页 |
1.1 General overview | 第19页 |
1.2 Olfaction in insect | 第19-20页 |
1.3 The olfactory system | 第20-22页 |
1.4 Olfactory related proteins | 第22-27页 |
1.4.1 Sensillum lymph proteins | 第22-26页 |
1.4.2 Membrane proteins | 第26-27页 |
1.5 Activation of insect odorant receptor | 第27-30页 |
1.6 The Macrocentrus cingulum Brischke | 第30-31页 |
1.7 How do we know what the M. cingulum olfaction system | 第31-34页 |
1.7.1 Olfactory protein and ligand binding | 第31-32页 |
1.7.2 Electron microscopy | 第32-33页 |
1.7.3 Plant odorant and behavior | 第33-34页 |
1.8 Aims | 第34-35页 |
Chapter Ⅱ Identification of Chemosensory Receptor Genes from M. cingulum | 第35-49页 |
2.1 Introduction | 第35-36页 |
2.2 Materials and Methods | 第36-41页 |
2.2.1 Insects | 第36页 |
2.2.2 Extraction of total RNA | 第36-38页 |
2.2.3 cDNA library construction protocol | 第38页 |
2.2.4 Construction of cDNA library,gene identification and functional annotation | 第38-39页 |
2.2.5 RT-PCR for expression analysis | 第39-41页 |
2.3 Results | 第41-47页 |
2.3.1 Antennal cDNA library of M. cingulum | 第41页 |
2.3.2 Annotation of predicted proteins | 第41-42页 |
2.3.3 Functional annotation by GO,COG,and KEGG | 第42-43页 |
2.3.4 Annotation of a part of OR and IR genes | 第43-46页 |
2.3.5 Expression patter in different tissues | 第46-47页 |
2.4 Discussion | 第47-49页 |
Chapter Ⅲ McinOrco Identification and Expression Pattern Analysis | 第49-60页 |
3.1 Introduction | 第49-50页 |
3.2 Materials and Methods | 第50-53页 |
3.2.1 Insect rearing and tissue collection | 第50页 |
3.2.2 RNA extraction and cDNA synthesis | 第50页 |
3.2.3 Polymerase chain reaction(PCR) | 第50页 |
3.2.4 Cloning and sequence analysis | 第50-51页 |
3.2.5 Expression profile of McinOrco in different tissues | 第51-52页 |
3.2.6 Preparation of in situ hybridization probes | 第52页 |
3.2.7 Whole mount flurescence in situ hybridization(WM-FISH) | 第52-53页 |
3.2.8 Data analysis | 第53页 |
3.3 Results | 第53-58页 |
3.3.1 Cloning of Orco orthologue in M. cingulum | 第53-55页 |
3.3.2 Tissue specific expression pattern of McinOrco | 第55-56页 |
3.3.3 Topographic expression of mcinOrco in male and female antenna | 第56-58页 |
3.4 Discussion | 第58-60页 |
Chapter Ⅳ Functional Characterization of McinOBP1 | 第60-78页 |
4.1 Introduction | 第60-62页 |
4.2 Materials and Methods | 第62-66页 |
4.2.1 Insects | 第62页 |
4.2.2 RNA extraction and cDNA synthesis | 第62页 |
4.2.3 Polymerase chain reaction(PCR) | 第62页 |
4.2.4 Expression pattern of McinOBP1 | 第62-63页 |
4.2.5 Cloning and sequencing | 第63页 |
4.2.6 Cloning of McinOBP1-wild type in expression vector | 第63-64页 |
4.2.7 Purification of proteins | 第64页 |
4.2.8 Preparation of site-directed mutants | 第64-65页 |
4.2.9 Flourescence binding assays | 第65页 |
4.2.10 Molecular modeling and ligands docking | 第65-66页 |
4.3 Results | 第66-75页 |
4.3.1 Cloning and sequence amalysis of McinOBP1 | 第66页 |
4.3.2 Tissues specific expression pattern of McinOBP1 | 第66-68页 |
4.3.3 Recombinant protein McinOBPl-wt expression and purification | 第68页 |
4.3.4 Ligand protein binding specificity | 第68-71页 |
4.3.5 Molecular modeling of McinOBP1-wt protein and ligands docking | 第71-73页 |
4.3.6 Mutagenesis and binding assays | 第73-75页 |
4.4 Discussion | 第75-78页 |
Chapter Ⅴ SEM and TEM of Antennal Sensilla of M. cingulum | 第78-93页 |
5.1 Introduction | 第78-79页 |
5.2 Materials and Methods | 第79-80页 |
5.2.1 Insects | 第79页 |
5.2.2 Scanning electron microscope(SEM) | 第79页 |
5.2.3 Transmission electron microscope(TEM) | 第79页 |
5.2.4 Terminology of sensilla | 第79-80页 |
5.2.5 Data analysis | 第80页 |
5.3 Results | 第80-89页 |
5.3.1 General morphology of the antenna | 第80-81页 |
5.3.2 Sensilla on the antenna | 第81-89页 |
5.3.2.1 Sensilla chaetica(CHA) | 第81页 |
5.3.2.2 Sensilla basicconica(BAS) | 第81-83页 |
5.3.2.3 Sensilla trichodea(TRI) | 第83-84页 |
5.3.2.4 Coeloconica sensilla(COE) | 第84-86页 |
5.3.2.5 Sensilla placodea(PLA) | 第86-88页 |
5.3.2.6 Sensilla campaniform(CAM) | 第88-89页 |
5.3.2.7 The cuticular pore(CP) | 第89页 |
5.4 Discussion | 第89-93页 |
Chapter Ⅵ Sense Organs on the Ovipositor of M. cingulum | 第93-104页 |
6.1 Introduction | 第93-94页 |
6.2 Materilas and Methods | 第94-95页 |
6.2.1 Experimental insects | 第94页 |
6.2.2 Scanning electron microscopy(SEM) | 第94页 |
6.2.3 Transmission electron microscopy(TEM) | 第94-95页 |
6.3 Results | 第95-100页 |
6.3.1 Ovipositor morphology | 第95-97页 |
6.3.2 Sensory structures on the M. cingulum ovipositor | 第97-100页 |
6.3.2.1 Sensilla coeloconica | 第97-98页 |
6.3.2.2 Sensilla campaniform | 第98页 |
6.3.2.3 Sensilla trichodra | 第98-99页 |
6.3.2.4 Secretory pores on the M. cingulum ovipositor | 第99-100页 |
6.4 Discussion | 第100-104页 |
6.4.1 Host selection process | 第100-101页 |
6.4.2 Stinging mechanism | 第101-102页 |
6.4.3 Ovipositional mechanism | 第102-104页 |
Chapter Ⅶ Behavioral Response of M.cingulum to Corn Odorants | 第104-112页 |
7.1 Introduction | 第104-105页 |
7.2 Materials and Methods | 第105-106页 |
7.2.1 Insects | 第105页 |
7.2.2 Behavioral bioassays with Y-tube olfactometer | 第105-106页 |
7.2.3 Data analysis | 第106页 |
7.3 Results | 第106-111页 |
7.4 Discussion | 第111-112页 |
General Conclusion | 第112-116页 |
References | 第116-137页 |
Acknowledgement | 第137-139页 |
Resume | 第139-144页 |