英文缩略表 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 引言 | 第13-28页 |
1.1 小麦纹枯病的发生概况 | 第13-18页 |
1.1.1 小麦纹枯病的病原 | 第13-14页 |
1.1.2 小麦纹枯病的侵染循环 | 第14-15页 |
1.1.3 小麦纹枯病的危害 | 第15页 |
1.1.4 小麦纹枯病的流行因素 | 第15-16页 |
1.1.5 小麦纹枯病菌的接种方法 | 第16-17页 |
1.1.6 小麦纹枯病的防治 | 第17-18页 |
1.2 丝核菌的分类概况 | 第18-20页 |
1.2.1 丝核菌的分类特征 | 第18页 |
1.2.2 菌丝融合群分类法在丝核菌上的应用 | 第18-20页 |
1.2.2.1 多核丝核菌及融合群划分 | 第18-20页 |
1.2.2.2 双核丝核菌及融合群划分 | 第20页 |
1.3 土壤群落定量方法研究进展 | 第20-23页 |
1.3.1 微生物平板培养法 | 第21页 |
1.3.2 分子生物学的检测方法 | 第21-23页 |
1.4 实时荧光定量 PCR 技术的应用 | 第23-27页 |
1.4.1 荧光定量PCR的原理 | 第23-24页 |
1.4.2 实时荧光定量PCR技术的几个重要参数 | 第24-25页 |
1.4.3 实时荧光定量PCR技术的优缺点 | 第25页 |
1.4.4 实时荧光定量PCR技术的应用 | 第25-27页 |
1.5 本研究的目的意义 | 第27-28页 |
2 材料方法 | 第28-36页 |
2.1 菌株的分离鉴定 | 第28-29页 |
2.1.1 PDA培养基的制备 | 第28页 |
2.1.2 菌株的分离鉴定 | 第28-29页 |
2.2 菌株DNA的提取 | 第29-30页 |
2.2.1 菌株DNA提取试剂 | 第29-30页 |
2.2.2 使用仪器 | 第30页 |
2.2.3 菌株DNA提取步骤 | 第30页 |
2.3 标准品的制备 | 第30-31页 |
2.4 引物设计和特异性检测 | 第31-33页 |
2.5 Real-time PCR反应体系的建立及条件优化 | 第33页 |
2.6 引物灵敏度检测和标准曲线的绘制 | 第33页 |
2.6.1 引物灵敏度检测 | 第33页 |
2.6.2 菌丝DNA标准曲线的绘制 | 第33页 |
2.7 土壤样品的采集处理 | 第33-35页 |
2.7.1 土壤样品的采集 | 第33页 |
2.7.2 土壤总DNA的提取 | 第33-35页 |
2.8 田间病情指数的调查 | 第35页 |
2.9 土壤样品的检测 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-49页 |
3.1 引物特异性检测 | 第36-39页 |
3.1.1 常规PCR技术检测引物特异性 | 第36-37页 |
3.1.2 实时荧光定量PCR技术检测引物特异性 | 第37-39页 |
3.2 优化的real-time PCR反应条件 | 第39页 |
3.3 引物灵敏度检测 | 第39-41页 |
3.3.1 常规PCR技术检测引物灵敏度 | 第39-40页 |
3.3.2 实时荧光定量PCR技术检测引物灵敏度 | 第40-41页 |
3.4 标准曲线的绘制 | 第41页 |
3.5 土壤中小麦纹枯病菌的动态分析 | 第41-49页 |
3.5.1 小麦纹枯病病情指数调查结果 | 第41-43页 |
3.5.2 10日有效积温的计算 | 第43-44页 |
3.5.3 土壤中菌丝量的检测结果 | 第44-45页 |
3.5.4 土壤中小麦纹枯病菌(R.cerealis)的消长动态分析 | 第45-49页 |
4 讨论 | 第49-52页 |
4.1 定量PCR方法的选择 | 第49页 |
4.2 DNA的提取 | 第49-50页 |
4.3 引物的设计和评估 | 第50页 |
4.4 标准曲线的绘制和方法评价 | 第50-51页 |
4.5 土壤中小麦纹枯病菌的检测和动态分析 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第59页 |