| 摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 1 引言 | 第10-17页 |
| 1.1 研究背景 | 第10-11页 |
| 1.2 干旱胁迫对水稻的影响 | 第11-12页 |
| 1.2.1 形态学上的变化 | 第11页 |
| 1.2.2 生理生化变化 | 第11-12页 |
| 1.3 水稻基因表达应答干旱胁迫的研究进展 | 第12-15页 |
| 1.3.1 功能蛋白相关基因研究进展 | 第13-14页 |
| 1.3.2 调节蛋白相关基因研究进展 | 第14-15页 |
| 1.4 实验目的及意义 | 第15-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-29页 |
| 2.1 材料 | 第17-20页 |
| 2.1.1 供试水稻品种 | 第17页 |
| 2.1.2 菌株及质粒 | 第17-18页 |
| 2.1.3 特异性引物 | 第18-19页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第19页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第19-20页 |
| 2.2 方法 | 第20-29页 |
| 2.2.1 水稻的培养与处理 | 第20页 |
| 2.2.2 干旱胁迫下水稻叶片相对含水量的测定 | 第20页 |
| 2.2.3 基因芯片检测与干旱相关基因的表达 | 第20页 |
| 2.2.4 耐旱相关基因表达水平的实时荧光定量PCR检测 | 第20-22页 |
| 2.2.4.1 水稻叶片总RNA提取 | 第20-21页 |
| 2.2.4.2 cDNA第一链合成 | 第21-22页 |
| 2.2.4.3 实时荧光定量PCR检测 | 第22页 |
| 2.2.5 植物表达载体的构建 | 第22-25页 |
| 2.2.5.1 目的基因编码序列的获得 | 第22-23页 |
| 2.2.5.2 目的基因的克隆与鉴定 | 第23-24页 |
| 2.2.5.3 质粒的提取 | 第24-25页 |
| 2.2.5.4 过表达及RNA干扰载体的构建 | 第25页 |
| 2.2.6 农杆菌介导的水稻遗传转化及转基因阳性苗检测 | 第25-26页 |
| 2.2.6.1 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第25-26页 |
| 2.2.6.2 转基因苗的GUS组织化学活性鉴定 | 第26页 |
| 2.2.7 SalT基因的原核表达及重组蛋白活性鉴定 | 第26-29页 |
| 2.2.7.1 原核表达载体的构建 | 第26-27页 |
| 2.2.7.2 重组Sa1T蛋白的小量表达 | 第27页 |
| 2.2.7.3 重组Sa1T蛋白的大量诱导及分离纯化 | 第27-28页 |
| 2.2.7.4 重组Sa1T蛋白的凝血活性及与甘露糖专一性结合检测 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-39页 |
| 3.1 干旱胁迫对水稻叶片叶片相对含水量的影响 | 第29-30页 |
| 3.2 干旱胁迫下水稻叶片基因表达变化的芯片分析 | 第30-31页 |
| 3.3 干旱胁迫下耐旱关键基因差异性表达的荧光定量PCR检测 | 第31-33页 |
| 3.3.1 RNA的纯度及完整性分析 | 第31页 |
| 3.3.2 荧光定量PCR检测 | 第31-33页 |
| 3.4 SalT基因过表达及RNA干扰表达转基因水稻的获取 | 第33-37页 |
| 3.4.1 植物表达载体的构建 | 第33-36页 |
| 3.4.2 转基因植株的鉴定 | 第36-37页 |
| 3.5 SalT基因的原核表达 | 第37-39页 |
| 3.5.1 重组SalT蛋白的表达及鉴定 | 第37页 |
| 3.5.2 重组SalT蛋白凝血活性及与甘露糖的专一性结合检测 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-45页 |
| 4.1 功能蛋白相关基因对干旱胁迫的响应 | 第39-41页 |
| 4.2 调节蛋白相关基因对干旱胁迫的响应 | 第41-43页 |
| 4.3 SalT基因的功能与结构研究 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第54-55页 |
