| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 主要符号对照表 | 第10-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-19页 |
| 1.1 FSH 的结构与功能 | 第11-12页 |
| 1.2 FSH 制剂研究概述 | 第12-15页 |
| 1.2.1 尿源性 FSH 制剂 | 第12-13页 |
| 1.2.2 重组 FSH 制剂 | 第13-14页 |
| 1.2.3 长效 FSH 制剂及类似物 | 第14-15页 |
| 1.3 FSH 生物活性检测方法概述 | 第15-17页 |
| 1.3.1 FSH 体内生物活性的检测 | 第15-16页 |
| 1.3.2 FSH 体外生物活性的检测 | 第16-17页 |
| 1.4 本课题的来源与意义及主要研究内容与方法 | 第17-19页 |
| 1.4.1 本课题的来源与意义 | 第17页 |
| 1.4.2 研究主要内容与方法 | 第17-19页 |
| 第2章 表达载体的构建及 CHO-FSH 细胞系的建立 | 第19-37页 |
| 2.1 实验材料、试剂及仪器 | 第19-23页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第20页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第20-21页 |
| 2.1.4 试剂配制 | 第21-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-33页 |
| 2.2.1 表达载体的构建 | 第23-28页 |
| 2.2.2 CHO-K1 细胞的转染及稳定细胞系 CHO-FSH 的筛选 | 第28-30页 |
| 2.2.3 稳定细胞系 CHO-FSH 基因组鉴定 | 第30-31页 |
| 2.2.4 稳定细胞系 CHO-FSH 培养上清的鉴定与定量 | 第31-33页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第33-36页 |
| 2.3.1 表达载体 pcDNA3.1(+)-FSH 酶切鉴定 | 第33-34页 |
| 2.3.2 稳定细胞系 CHO-FSH 基因组鉴定 | 第34页 |
| 2.3.3 CHO-FSH 培养上清 Western Blotting 鉴定 | 第34-35页 |
| 2.3.4 CHO-FSH 培养上清 ELISA 定量分析 | 第35-36页 |
| 2.4 本章小结 | 第36-37页 |
| 第3章 rFSH 类似物的纯化与鉴定 | 第37-47页 |
| 3.1 实验材料、试剂及仪器 | 第37-39页 |
| 3.1.1 实验材料与试剂 | 第37页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第37页 |
| 3.1.3 主要试剂配制 | 第37-39页 |
| 3.2 实验方法 | 第39-41页 |
| 3.2.1 蛋白纯化 | 第39-40页 |
| 3.2.2 SDS-PAGE 电泳分析洗脱峰 | 第40-41页 |
| 3.2.3 Western Blotting 鉴定洗脱峰 | 第41页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第41-45页 |
| 3.3.1 rFSH 类似物凝胶层析色谱图 | 第41-43页 |
| 3.3.2 洗脱峰鉴定分析 | 第43-45页 |
| 3.5 本章小结 | 第45-47页 |
| 第4章 rFSH 类似物体内生物活性的检测 | 第47-59页 |
| 4.1 实验材料、试剂及仪器 | 第47-49页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第47页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第47-48页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第48页 |
| 4.1.4 实验试剂配制 | 第48-49页 |
| 4.2 实验方法 | 第49-52页 |
| 4.2.1 rFSH 类似物生物效价测定 | 第49-50页 |
| 4.2.2 rFSH 类似物体内活性检测 | 第50-51页 |
| 4.2.3 统计学处理 | 第51-52页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第52-58页 |
| 4.3.1 rFSH 类似物生物效价测定结果 | 第52-53页 |
| 4.3.2 rFSH 类似物对大鼠卵巢增重效果 | 第53-54页 |
| 4.3.3 rFSH 类似物对大鼠子宫增重效果 | 第54-55页 |
| 4.3.4 rFSH 类似物对大鼠卵巢组织的影响 | 第55-56页 |
| 4.3.5 rFSH 类似物对大鼠子宫组织的影响 | 第56-58页 |
| 4.4 本章小结 | 第58-59页 |
| 第5章 rFSH 类似物对小鼠的超排效果 | 第59-73页 |
| 5.1 实验材料、试剂及仪器 | 第59-60页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第59页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第59-60页 |
| 5.1.3 实验仪器 | 第60页 |
| 5.1.4 试剂配制 | 第60页 |
| 5.2 实验方法 | 第60-63页 |
| 5.2.1 微滴培养基的制备 | 第60-61页 |
| 5.2.2 动物分组及给药方案 | 第61页 |
| 5.2.3 给药后小鼠阴门状况观察 | 第61-62页 |
| 5.2.4 超排小鼠卵细胞收集 | 第62-63页 |
| 5.2.5 小鼠卵巢体积测定与组织固定 | 第63页 |
| 5.2.6 石蜡包埋、切片与 H&E 染色 | 第63页 |
| 5.2.7 统计学分析 | 第63页 |
| 5.3 实验结果与讨论 | 第63-70页 |
| 5.3.1 超排后小鼠发情状况 | 第63-64页 |
| 5.3.2 rFSH 类似物对小鼠的超排效果 | 第64-67页 |
| 5.3.3 超排处理对小鼠卵巢影响作用 | 第67-69页 |
| 5.3.4 超排小鼠卵巢组织学观察 | 第69-70页 |
| 5.5 本章小结 | 第70-73页 |
| 第6章 总结与展望 | 第73-74页 |
| 创新点 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 致谢 | 第81-83页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文及研究成果 | 第83页 |
