| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1. 引言 | 第8-15页 |
| 1.1 HCV的基因组结构及编码产物 | 第8-10页 |
| 1.1.1 HCV的基因组结构 | 第8-9页 |
| 1.1.2 病毒蛋白的结构与功能 | 第9-10页 |
| 1.2 HCV的传播途径 | 第10-11页 |
| 1.2.1 血液传播 | 第10页 |
| 1.2.2 性传播 | 第10-11页 |
| 1.2.3 垂直传播 | 第11页 |
| 1.3 HCV基因分型 | 第11-15页 |
| 1.3.1 HCV的基因分型系统 | 第11页 |
| 1.3.2 全球HCV的流行与进化 | 第11-12页 |
| 1.3.3 我国静脉注射吸毒人群中HCV的流行与进化 | 第12-13页 |
| 1.3.4 HCV基因分型的意义 | 第13-14页 |
| 1.3.5 HCV基因分型的方法 | 第14-15页 |
| 2. 研究目的及意义 | 第15-16页 |
| 3. 材料和方法 | 第16-19页 |
| 3.1 血清样品 | 第16页 |
| 3.2 主要试剂及材料 | 第16-17页 |
| 3.3 主要仪器设备 | 第17页 |
| 3.4 软件 | 第17页 |
| 3.5 引物设计及主要参考序列 | 第17-19页 |
| 4. 实验方法 | 第19-25页 |
| 4.1 病毒基因组RNA的提取 | 第19页 |
| 4.2 逆转录反应获取HCV cDNA | 第19-20页 |
| 4.3 分型区段的选择及PCR反应条件摸索 | 第20-21页 |
| 4.4 PCR扩增HCV C/E1区的部分序列 | 第21页 |
| 4.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第21-22页 |
| 4.6 PCR产物的纯化 | 第22页 |
| 4.7 受体菌DH5a的感受态制备 | 第22-23页 |
| 4.8 纯化产物于PMD19-T载体的连接 | 第23页 |
| 4.9 转化感受态细胞DH5a | 第23-24页 |
| 4.10 阳性重组质粒的提取及鉴定 | 第24页 |
| 4.11 数据分析 | 第24-25页 |
| 5. 实验结果 | 第25-37页 |
| 5.1 HCV分型扩增区段地选择及PCR条件优化 | 第25-27页 |
| 5.2 阳性样本中HCV RNA的PCR检测 | 第27-28页 |
| 5.3 HCV C/E1区段的PCR扩增 | 第28页 |
| 5.4 PCR产物胶回收、测序用重组载体PMD19-T的构建与鉴定 | 第28-29页 |
| 5.5 HCV阳性样本中HCVC/E1区段测序结果 | 第29-30页 |
| 5.6 云南省静脉吸毒人群中HCV的基因型分布 | 第30-32页 |
| 5.7 云南省静脉吸毒人群HCV感染亚型的性别及年龄分布 | 第32页 |
| 5.8 云南省静脉吸毒人群中HCV的基因型分布状况与其他地区分布状况的对比 | 第32-33页 |
| 5.9 云南省静脉吸毒人群中现有HCV的基因型分布状况与早期研究的对比 | 第33-37页 |
| 6. 讨论 | 第37-43页 |
| 7. 小结 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 附录一 HCV阳性样品测序序列 | 第49-82页 |
| 附录二 主要缩略词表 | 第82-83页 |
| 附录三 主要溶液配制方法 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 研究生简历 | 第85页 |
| 攻读硕士期间发表论文的情况 | 第85-86页 |
