摘要 | 第4-8页 |
abstract | 第8-12页 |
中英缩略词表 | 第16-17页 |
引言 | 第17-20页 |
第一部分 食管上皮组织p53敲除小鼠模型的建立 | 第20-44页 |
前言 | 第20-22页 |
1 实验材料 | 第22-27页 |
1.1 实验小鼠遗传背景和实验设计 | 第22页 |
1.2 主要实验试剂(试剂盒) | 第22-23页 |
1.3 主要实验耗材 | 第23-24页 |
1.4 主要试剂的配制 | 第24-26页 |
1.5 主要仪器设备 | 第26-27页 |
2 实验方法 | 第27-38页 |
2.1 小鼠的饲养繁殖 | 第27-28页 |
2.2 食管粘膜上皮组织p53基因特异性敲除小鼠的繁育 | 第28页 |
2.3 小鼠基因型鉴定 | 第28-31页 |
2.4 qPCR | 第31-34页 |
2.5 小鼠病理学检查 | 第34-35页 |
2.6 免疫组织化学(SP法)染色 | 第35-38页 |
3 实验结果 | 第38-42页 |
3.1 小鼠基因型的鉴定结果 | 第38-39页 |
3.2 小鼠食管、舌、胃组织中p53mRNA水平的检测 | 第39-40页 |
3.3 小鼠食管粘膜层组织中P53蛋白的表达情况 | 第40-41页 |
3.4 小鼠食管的病理学变化 | 第41-42页 |
4 讨论 | 第42-44页 |
第二部分 甲基苄基亚硝胺诱导KO小鼠食管癌前病变模型的建立及P53在食管癌前病变发生中的作用机制的初步探讨 | 第44-77页 |
前言 | 第44-46页 |
1 实验材料 | 第46-51页 |
1.1 主要的仪器设备 | 第46页 |
1.2 主要试剂 | 第46-47页 |
1.3 主要试剂的配制 | 第47-51页 |
2 实验方法 | 第51-63页 |
2.1 实验动物及分组 | 第51-52页 |
2.2 实验观察 | 第52-53页 |
2.3 HE染色 | 第53页 |
2.4 免疫组织化学染色(SP法) | 第53-54页 |
2.5 细胞培养 | 第54-55页 |
2.6 siRNA干扰实验 | 第55-60页 |
2.7 NMBzA作用转染细胞 | 第60-61页 |
2.8 软琼脂克隆形成实验 | 第61-62页 |
2.9 统计学分析方法 | 第62-63页 |
3 实验结果 | 第63-73页 |
3.1 小鼠一般情况和体重监测 | 第63-64页 |
3.2 小鼠食管大体观察 | 第64-65页 |
3.3 组织学观察统计病变 | 第65-68页 |
3.4 小鼠食管上皮组织Ki67、P21、Bax、Bcl-2蛋白的免疫组化分析 | 第68-71页 |
3.5 siRNA干扰SHEE细胞P53蛋白的表达情况 | 第71-72页 |
3.6 NMBzA对p53敲低的SHEE细胞的软琼脂克隆形成的影响 | 第72-73页 |
4 讨论 | 第73-77页 |
结论 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-84页 |
综述 | 第84-100页 |
参考文献 | 第93-100页 |
个人简历 | 第100-101页 |
致谢 | 第101页 |