| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 1 综述 | 第10-15页 |
| 1.1 简介 | 第11-14页 |
| 1.1.1 止血机制 | 第12页 |
| 1.1.2 蛇毒 MDC 酶 | 第12-13页 |
| 1.1.3 蛇毒去整合素 | 第13-14页 |
| 1.1.4 蛇毒 MDC 酶与去整合素的相互作用 | 第14页 |
| 1.2 结语 | 第14-15页 |
| 2 rLj-RGD3 和 rLj-116 的制备 | 第15-26页 |
| 2.1 试剂和材料 | 第15页 |
| 2.2 方法 | 第15-21页 |
| 2.2.1 突变体目的基因序列的合成及基因克隆 | 第15页 |
| 2.2.2 目的基因重组质粒 pET23b-116 的提取 | 第15-16页 |
| 2.2.3 琼脂糖凝胶电泳检测提取的重组质粒 | 第16-17页 |
| 2.2.4 感受态细胞的制备 | 第17页 |
| 2.2.5 重组质粒 pET23b-116 转化 | 第17-18页 |
| 2.2.6 提取阳性转化表达菌 BL21 的重组质粒并对其进行基因测序检验 | 第18页 |
| 2.2.7 重组质粒 pET23b-116 转化的 BL21 菌体的 IPTG 诱导时间和温度的摸索 | 第18页 |
| 2.2.8 突变体蛋白 rLj-116 的表达及提纯 | 第18-19页 |
| 2.2.9 Tricine-SDS PAGE电泳 | 第19-21页 |
| 2.2.10 用考马斯亮蓝 G-250 法对所纯化的蛋白进行浓度测定 | 第21页 |
| 2.3 结果 | 第21-26页 |
| 2.3.1 野生型 Lj-RGD3 序列比对 | 第21-22页 |
| 2.3.2 突变蛋白 rLj-116 的基因序列合成及其氨基酸序列推导 | 第22页 |
| 2.3.3 目的基因的转化和质粒提取 | 第22-23页 |
| 2.3.4 对 rLj-RGD3 和 rLj-116 两种蛋白的不同时间和温度的 IPTG 诱导表达 | 第23页 |
| 2.3.5 突变体蛋白 rLj-116 的纯化和鉴定 | 第23-24页 |
| 2.3.6 蛋白标准曲线的绘制和浓度的测定 | 第24-26页 |
| 3 抗血管新生活性比较 | 第26-38页 |
| 3.1 材料 | 第26页 |
| 3.2 方法 | 第26-29页 |
| 3.2.1 体外实验 | 第26-29页 |
| 3.2.2 体内实验 | 第29页 |
| 3.3 结果 | 第29-38页 |
| 3.3.1 细胞增殖实验结果 | 第29-30页 |
| 3.3.2 细胞迁移实验结果 | 第30-33页 |
| 3.3.3 细胞浸润实验结果 | 第33-34页 |
| 3.3.4 细胞凋亡实验结果 | 第34-35页 |
| 3.3.5 整合素结合实验结果 | 第35-37页 |
| 3.3.6 抗血管新生实验结果 | 第37-38页 |
| 4.抗血栓活性比较 | 第38-46页 |
| 4.1 材料 | 第38页 |
| 4.2 方法 | 第38-40页 |
| 4.2.1 两种蛋白对大鼠动脉血栓形成的影响 | 第38-39页 |
| 4.2.2 两种蛋白对大鼠静脉血栓形成的影响 | 第39页 |
| 4.2.3 两种蛋白对血小板聚集作用的影响 | 第39-40页 |
| 4.3 结果 | 第40-46页 |
| 4.3.1 两种蛋白对大鼠动脉血栓形成的影响结果 | 第40-42页 |
| 4.3.2 两种蛋白对大鼠静脉血栓形成的影响结果 | 第42-44页 |
| 4.3.3 两种蛋白对血小板聚集的影响结果 | 第44-46页 |
| 5 单克隆抗体制备实验报告 | 第46-52页 |
| 5.1 抗原表位分析结果（附录） | 第46页 |
| 5.2 实验材料 | 第46页 |
| 5.3 试验方法 | 第46-49页 |
| 5.3.1 RGD3 蛋白纯化 | 第46-47页 |
| 5.3.2 实验动物的免疫及小鼠的效价测定 | 第47页 |
| 5.3.3 杂交瘤细胞株的建立 | 第47-48页 |
| 5.3.4 对杂交瘤细胞的扩大培养和冷冻保存 | 第48页 |
| 5.3.5 单克隆抗体的鉴定 | 第48-49页 |
| 5.4 实验结果 | 第49-52页 |
| 5.4.1 检测全部免疫的 BALB/c 小鼠的抗体效价 | 第49页 |
| 5.4.2 单克隆细胞株的筛选和杂交瘤细胞株的建立 | 第49页 |
| 5.4.3 检测单克隆细胞的上清效价 | 第49-50页 |
| 5.4.4 单克隆细胞上清 Protein A 纯化抗体 elisa 效价检测 | 第50页 |
| 5.4.5 单克隆细胞上清 Protein A 纯化抗体 WB 检测 | 第50-52页 |
| 6 全文讨论 | 第52-54页 |
| 7 全文结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 附录A 质粒图谱 | 第60-61页 |
| 附录B 抗原表为分析结果 | 第61-65页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
