| 摘要 | 第4-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 英文缩略语 | 第13-18页 |
| 第一部分 ：MyD88基因敲除可减轻百草枯中毒引起的急性肺损伤 | 第18-36页 |
| 1 前言 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-30页 |
| 2.1 材料 | 第19页 |
| 2.2 动物 | 第19页 |
| 2.3 模型构建及动物分组 | 第19页 |
| 2.4 标本的采集及保存 | 第19-20页 |
| 2.5 血清TNF-α,IL-1β含量测定 | 第20页 |
| 2.6 肺脏湿/干重比值测定 | 第20页 |
| 2.7 肺组织损伤评分方法 | 第20-21页 |
| 2.8 RealtimeRT-PCR检测肺组织MyD88,TNF-α及IL-1βmRNA的表达 | 第21-25页 |
| 2.9 免疫荧光法检测MyD88及p-p65表达 | 第25-26页 |
| 2.10 Westernblot法检测肺组织TLR4、TLR9、MyD88、p-p65的表达 | 第26-30页 |
| 2.11 统计学分析 | 第30页 |
| 3 结果 | 第30-33页 |
| 3.1 小鼠肺湿/干重比值及肺组织损伤评分 | 第30-31页 |
| 3.2 血清TNF-α和IL-1β水平 | 第31页 |
| 3.3 RealtimeRTPCR检测细肺组织 | 第31页 |
| 3.4 MyD88及p-p65在肺组织中的表达分布 | 第31-32页 |
| 3.5 Westernblot法检测小鼠肺组织 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| 5 结论 | 第35-36页 |
| 第二部分 ：TLR9介导了百草枯中毒导致的急性肺损伤 | 第36-54页 |
| 1 前言 | 第36-37页 |
| 2 材料与方法 | 第37-44页 |
| 2.1 材料及仪器 | 第37页 |
| 2.2 动物 | 第37-38页 |
| 2.3 模型构建及动物分组 | 第38页 |
| 2.4 标本的采集及保存 | 第38页 |
| 2.5 血清炎性因子TNF-α和IL-1β含量测定 | 第38页 |
| 2.6 肺组织损伤评分 | 第38-39页 |
| 2.7 免疫荧光法检测TLR9及p-p65表达 | 第39页 |
| 2.8 Westernblot法检测肺组织TLR9、MyD88、p-IRAK4、p-p65的表达 | 第39-40页 |
| 2.9 细胞培养 | 第40页 |
| 2.10 模型构建及细胞分组 | 第40-42页 |
| 2.11 AnnexinV-PI双染法检测细胞凋亡 | 第42-43页 |
| 2.12 RealtimeRT-PCR检测TLR9、TNF-α、IL-1βmRNA | 第43页 |
| 2.13 ELISA检测TNF-α、IL-1β水平 | 第43-44页 |
| 2.14 免疫荧光法检测TLR9,p-p65表达 | 第44页 |
| 3 结果 | 第44-51页 |
| 3.1 小鼠肺组织损伤评分 | 第44-45页 |
| 3.2 血清TNF-α和IL-1β含量 | 第45页 |
| 3.3 TLR9及p-p65在肺组织中的表达分布 | 第45-46页 |
| 3.4 Westernblot法检测不同时间点小鼠肺组织 | 第46-47页 |
| 3.5 细胞活性检测及实验处理浓度的选择 | 第47页 |
| 3.6 细胞凋亡的检测 | 第47-48页 |
| 3.7 RealtimeRT-PCR检测细胞裂解液 | 第48-49页 |
| 3.8 上清液TNF-α和IL-1β含量测定 | 第49页 |
| 3.9 TLR9及p-p65在A549细胞中的表达 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 第三部分 ：TLR9经JNK介导了百草枯中毒所引起的急性肺损伤 | 第54-72页 |
| 1 前言 | 第54-55页 |
| 2 材料及方法 | 第55-61页 |
| 2.1 实验材料 | 第55页 |
| 2.2 动物及模型构建 | 第55页 |
| 2.3 大鼠标本采集及肺湿重/干重比测定 | 第55-56页 |
| 2.4 大鼠肺组织HE染色及肺损伤评分 | 第56页 |
| 2.5 DHE荧光染色法检测大鼠肺组织ROS生成 | 第56页 |
| 2.6 细胞培养及模型构建 | 第56-57页 |
| 2.7 AnnexinV-PI双染法检测细胞凋亡 | 第57页 |
| 2.8 ELISA法检测TNF-α及IL-6水平 | 第57-58页 |
| 2.9 RT-qPCR法检测TNF-α及IL-6的mRNA水平 | 第58页 |
| 2.10 Westernblotting检测蛋白表达 | 第58-59页 |
| 2.11 EMSA法检测AP-1与NF-κBp-p65的转录因子DNA结合活性 | 第59-61页 |
| 2.12 TLR9特异性拮抗剂ODN2088干预小鼠后进行百草枯攻毒之后HE评估急性肺损伤程度；Westernblotting检测肺组织JNK磷酸化水平 | 第61页 |
| 2.13 统计学分析 | 第61页 |
| 3 结果 | 第61-69页 |
| 3.1 SP干预降低了百草枯中毒大鼠的肺湿重/干重比(W/D)及肺损伤 | 第61-62页 |
| 3.2 SP干预减弱了百草枯中毒大鼠肺组织中ROS及炎症因子mRNA水平 | 第62-63页 |
| 3.3 SP干预降低了百草枯中毒大鼠肺组织中JNK磷酸化水平及AP-1DNA结合活性,但未影响NF-κBp-p65DNA结合活性 | 第63-64页 |
| 3.4 PQ对A549细胞存活率的影响具有浓度依赖性 | 第64-65页 |
| 3.5 SP干预减少了百草枯染毒细胞的凋亡率 | 第65-66页 |
| 3.6 SP干预减弱了百草枯染毒的A549细胞中ROS及炎症因子mRNA水平 | 第66-67页 |
| 3.7 SP干预减少了百草枯染毒细胞的p-JNK蛋白、cleavedcaspase-3蛋白水平,并减弱了AP-1及NF-κBp-p65的DNA结合活性 | 第67-68页 |
| 3.8 SP干预减弱了百草枯染毒细胞上清液及染毒大鼠肺泡灌洗液的炎症因子水平 | 第68-69页 |
| 3.9 TLR9抑制剂ODN2088可减少百草枯中毒时JNK的磷酸化激活从而减轻急性肺损伤程度 | 第69页 |
| 4 讨论 | 第69-71页 |
| 5 结论 | 第71-72页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-80页 |
| 综述 | 第80-97页 |
| 参考文献 | 第90-97页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第97-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
| 个人简介 | 第99页 |
