| 中文摘要 | 第11-14页 |
| Abstract | 第14-16页 |
| 前言 | 第17-18页 |
| 1.实验材料与仪器 | 第18-21页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第18-19页 |
| 1.1.1 实验动物和细胞 | 第18页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第18-19页 |
| 1.2 仪器 | 第19-20页 |
| 1.3 主要试剂和溶液的配制 | 第20-21页 |
| 2.实验方法 | 第21-33页 |
| 2.1 小鼠动物模型的建立 | 第21页 |
| 2.2 小鼠肝组织病理学检测 | 第21-22页 |
| 2.2.1 HE染色 | 第21-22页 |
| 2.2.2 肝指数的测定 | 第22页 |
| 2.2.3 血清ALT和AST测定 | 第22页 |
| 2.3 HepG2细胞培养和传代 | 第22-23页 |
| 2.4 细胞水平逆转实验 | 第23页 |
| 2.5 MTT实验 | 第23页 |
| 2.6 油酸诱导的脂肪变性 | 第23页 |
| 2.7 细胞的油红染色 | 第23-24页 |
| 2.8 甘油三脂的测量 | 第24页 |
| 2.9 CYP1A1-siRNA转染油酸诱导的HepG2细胞 | 第24-25页 |
| 2.10 BaP刺激作用 | 第25页 |
| 2.11 细胞超氧化物歧化酶(SOD)的测定 | 第25-26页 |
| 2.12 细胞活性氧(ROS)的测定 | 第26页 |
| 2.13 肝脏/细胞丙二醛(MDA)的测定 | 第26-27页 |
| 2.14 细胞4-羟基壬烯酸(HNE)的测定 | 第27-28页 |
| 2.15 Real-timePCR实验 | 第28-29页 |
| 2.15.1 细胞总RNA的提取 | 第28页 |
| 2.15.2 反转录 | 第28页 |
| 2.15.3 RealtimePCR测定CYP1A1和CYP1A2mRNA的表达变化 | 第28-29页 |
| 2.16 细胞/组织总蛋白的提取 | 第29-30页 |
| 2.17 BCA蛋白定量 | 第30页 |
| 2.18 蛋白免疫印迹实验 | 第30-32页 |
| 2.19 统计学数据分析处理 | 第32-33页 |
| 3.实验结果 | 第33-46页 |
| 3.1 CYP1A1在非酒精性脂肪肝肝组织中及逆转肝组织中的表达变化 | 第33-36页 |
| 3.1.1 小鼠肝脏外观 | 第33页 |
| 3.1.2 小鼠肝组织HE染色 | 第33-34页 |
| 3.1.3 小鼠肝脏指数 | 第34页 |
| 3.1.4 小鼠血清ALT及AST的含量变化 | 第34-35页 |
| 3.1.5 小鼠非酒精性脂肪肝和非酒精性脂肪肝逆转组肝组织中CYP1A1蛋白的表达变化 | 第35-36页 |
| 3.1.6 丙二醛(MDA)在小鼠脂质积累模型组和脂质积累逆转组中的含量变化 | 第36页 |
| 3.2 细胞水平体外造脂质积累模型以及CYP1A1在脂质积累模型中的表达情况 | 第36-39页 |
| 3.2.1 MTT法检测不同浓度的油酸造模液对HepG2细胞増殖的影响 | 第36-37页 |
| 3.2.2 油酸诱导的HepG2细胞造体外脂质积累模型的油红O染色结果和甘油三酯含量 | 第37-38页 |
| 3.2.3 不同时间点CYP1A1蛋白在油酸刺激的HepG2细胞的表达变化 | 第38页 |
| 3.2.4 不同时间点CYP1A1mRNA在油酸刺激的HepG2细胞中表达变化 | 第38-39页 |
| 3.3 体外细胞逆转实验 | 第39-40页 |
| 3.3.1 CYP1A1在逆转的HepG2细胞中的表达变化 | 第39-40页 |
| 3.3.2 脂质积累模型组和脂质积累逆转组中脂质过氧化水平的变化 | 第40页 |
| 3.4 CYP1A1-siRNA对油酸刺激的HepG2细胞中CYP1A1和CYP1A2表达的影响 | 第40-42页 |
| 3.4.1 CYP1A1-siRNA对油酸刺激HepG2细胞中CYP1A1和CYP1A2蛋白表达的影响 | 第40-41页 |
| 3.4.2 CYP1A1-siRNA对油酸刺激的HepG2细胞中CYP1A1和CYP1A2mRNA表达的影响 | 第41-42页 |
| 3.5 沉默CYP1A1的表达降低脂质积累模型中的氧化应激和脂质过氧化作用 | 第42-44页 |
| 3.5.1 CYP1A1-siRNA对油酸诱导的HepG2细胞中ROS和SOD水平的影响 | 第42-43页 |
| 3.5.2 CYP1A1-siRNA对HepG2细胞中MDA和HNE水平的影响 | 第43-44页 |
| 3.6 苯并芘(BaP)通过刺激CYP1A1的高表达加重油酸刺激的HepG2细胞中的脂质过氧化作用 | 第44-46页 |
| 3.6.1 在苯并芘(BaP)处理HepG2细胞中CYP1A1的mRNA和蛋白的表达变化 | 第44-45页 |
| 3.6.2 苯并芘(BaP)对HepG2细胞中MDA和SOD的影响 | 第45-46页 |
| 4.讨论 | 第46-48页 |
| 5.结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 个人简历 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 综述 | 第56-68页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
