| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-35页 |
| 1.1 蛋白质组学简介 | 第14-20页 |
| 1.1.1 色谱技术 | 第14-15页 |
| 1.1.2 电泳技术 | 第15-16页 |
| 1.1.3 质谱技术 | 第16-20页 |
| 1.1.4 蛋白质组学的近期发展 | 第20页 |
| 1.2 玫瑰孢链霉菌简介 | 第20-22页 |
| 1.2.1 菌种来源及性状 | 第20-21页 |
| 1.2.2 玫瑰孢链霉菌生产达托霉素的研究现状 | 第21-22页 |
| 1.3 达托霉素简介 | 第22-30页 |
| 1.3.1 达托霉素的结构及理化性质 | 第22-24页 |
| 1.3.2 达托霉素的作用机理 | 第24页 |
| 1.3.3 达托霉素的合成机制 | 第24-27页 |
| 1.3.4 达托霉素的临床研究进展 | 第27-29页 |
| 1.3.5 达托霉素的应用前景 | 第29-30页 |
| 1.4 豪氏变形杆菌简介 | 第30-31页 |
| 1.4.1 变形杆菌的性状 | 第30页 |
| 1.4.2 豪氏变形杆菌的分类及应用 | 第30-31页 |
| 1.5 微生物对金属铜的应激 | 第31-33页 |
| 1.5.1 微生物的铜抗性 | 第31-32页 |
| 1.5.2 微生物中常见的铜传输模型 | 第32-33页 |
| 1.6 课题研究内容及意义 | 第33-35页 |
| 1.6.1 主要内容 | 第33页 |
| 1.6.2 研究意义 | 第33-35页 |
| 1.6.2.1 达托霉素生产机理研究的意义 | 第33-34页 |
| 1.6.2.2 豪氏变形杆菌抗铜机制研究的意义 | 第34-35页 |
| 第二章 前体对达托霉素生产影响的研究 | 第35-50页 |
| 2.1 菌种来源 | 第35页 |
| 2.2 实验试剂及仪器 | 第35-38页 |
| 2.3 实验方法 | 第38-45页 |
| 2.3.1 培养基组成及微生物的培养 | 第38-39页 |
| 2.3.1.1 培养基组成 | 第38页 |
| 2.3.1.2 微生物的培养 | 第38-39页 |
| 2.3.2 发酵参数的检测 | 第39-40页 |
| 2.3.2.1 生物量 | 第39页 |
| 2.3.2.2 原糖 | 第39-40页 |
| 2.3.3 达托霉素的检测 | 第40-41页 |
| 2.3.4 蛋白的提取 | 第41-42页 |
| 2.3.4.1 细胞破碎 | 第41-42页 |
| 2.3.4.2 蛋白浓度的测定 | 第42页 |
| 2.3.5 一维蛋白电泳分析 | 第42-44页 |
| 2.3.5.1 电泳试剂配方 | 第42-43页 |
| 2.3.5.2 电泳分析流程 | 第43-44页 |
| 2.3.6 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS/MS)分析 | 第44-45页 |
| 2.3.6.1 胶上酶解 | 第44-45页 |
| 2.3.6.2 质谱分析 | 第45页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第45-49页 |
| 2.4.1 前体对达托霉素发酵的影响 | 第45-46页 |
| 2.4.2 前体影响的蛋白电泳分析 | 第46-47页 |
| 2.4.3 前体影响的质谱分析 | 第47-49页 |
| 2.5 本章小结 | 第49-50页 |
| 第三章 前体对达托霉素影响的全蛋白质组分析 | 第50-64页 |
| 3.1 菌种来源 | 第50页 |
| 3.2 实验试剂及仪器 | 第50-51页 |
| 3.3 实验方法 | 第51-54页 |
| 3.3.1 微生物的培养及培养基组成 | 第51页 |
| 3.3.2 发酵参数及达托霉素的检测 | 第51页 |
| 3.3.3 蛋白的提取 | 第51页 |
| 3.3.4 双向电泳分析 | 第51-53页 |
| 3.3.4.1 电泳试剂配方 | 第51-52页 |
| 3.3.4.2 双向电泳分析流程 | 第52-53页 |
| 3.3.5 液相色谱偶联质谱(LC-MS/MS)分析 | 第53-54页 |
| 3.3.6 蛋白质的数据库比对及功能分类 | 第54页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第54-62页 |
| 3.4.1 LC-MS/MS与双向电泳分析对比 | 第54-58页 |
| 3.4.2 蛋白质组的功能分类 | 第58-60页 |
| 3.4.3 达托霉素合成相关蛋白的分析 | 第60-62页 |
| 3.5 本章小结 | 第62-64页 |
| 第四章 豪氏变形杆菌抗铜机制的研究 | 第64-82页 |
| 4.1 菌种来源 | 第64页 |
| 4.2 实验试剂及仪器 | 第64-65页 |
| 4.3 实验方法 | 第65-68页 |
| 4.3.1 微生物的培养及培养基组成 | 第65页 |
| 4.3.1.1 培养基组成 | 第65页 |
| 4.3.1.2 微生物的培养 | 第65页 |
| 4.3.2 抑菌实验 | 第65-66页 |
| 4.3.3 生物量及多铜氧化酶酶活的测定 | 第66-67页 |
| 4.3.3.1 生物量的测定 | 第66页 |
| 4.3.3.2 多铜氧化酶酶活的测定 | 第66-67页 |
| 4.3.4 蛋白的提取 | 第67页 |
| 4.3.4.1 细胞破碎 | 第67页 |
| 4.3.4.2 蛋白浓度的测定 | 第67页 |
| 4.3.5 一维蛋白电泳分析 | 第67页 |
| 4.3.6 二维蛋白电泳分析 | 第67页 |
| 4.3.7 MALDI-TOF-MS/MS分析 | 第67-68页 |
| 4.3.8 LC-MS/MS分析 | 第68页 |
| 4.3.9 蛋白质的数据库比对及功能分类 | 第68页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第68-80页 |
| 4.4.1 铜离子对豪氏变形杆菌生长及多铜氧化酶生产的影响 | 第68-70页 |
| 4.4.2 一维蛋白电泳及二维蛋白电泳分析 | 第70-75页 |
| 4.4.3 LC-MS/MS分析 | 第75-79页 |
| 4.4.3.1 理化性质分析 | 第75-76页 |
| 4.4.3.2 蛋白功能分类 | 第76-79页 |
| 4.4.4 豪氏变形杆菌抗铜机制的探讨 | 第79-80页 |
| 4.5 本章小结 | 第80-82页 |
| 第五章 结论与展望 | 第82-84页 |
| 5.1 结论 | 第82-83页 |
| 5.2 课题展望 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-93页 |
| 在读期间发表论文及所获荣誉 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
