摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第13-26页 |
1.1 昆虫的嗅觉识别系统及感受识别机制 | 第13-15页 |
1.1.1 昆虫的嗅觉识别系统 | 第13-14页 |
1.1.2 感受气味分子的机制 | 第14页 |
1.1.3 气味分子 | 第14-15页 |
1.2 昆虫嗅觉相关蛋白 | 第15-24页 |
1.2.1 气味结合蛋白 | 第15-18页 |
1.2.2 化学感受蛋白 | 第18-20页 |
1.2.3 气味受体 | 第20-21页 |
1.2.4 感觉神经元膜蛋白 | 第21-23页 |
1.2.5 气味降解酶 | 第23-24页 |
1.3 葡萄根瘤蚜 | 第24-26页 |
1.3.1 葡萄根瘤蚜研究现状 | 第24-25页 |
1.3.2 本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
第二章 葡萄根瘤蚜触角和口器超微结构观察 | 第26-37页 |
2.1 材料与方法 | 第26-27页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第26页 |
2.1.2 主要仪器 | 第26页 |
2.1.3 扫描电镜观察 | 第26-27页 |
2.2 结果与分析 | 第27-35页 |
2.2.1 葡萄根瘤蚜触角和口器的整体形态 | 第27-30页 |
2.2.2 葡萄根瘤蚜触角和口器感器 | 第30-35页 |
2.3 结论与讨论 | 第35-37页 |
第三章 葡萄根瘤蚜嗅觉相关基因的鉴定 | 第37-63页 |
3.1 材料与方法 | 第38-41页 |
3.1.1 供试昆虫 | 第38页 |
3.1.2 主要试剂 | 第38页 |
3.1.3 主要仪器 | 第38-39页 |
3.1.4 总RNA提取及cDNA第一链的合成 | 第39-40页 |
3.1.5 葡萄根瘤蚜嗅觉相关基因的鉴定与序列分析 | 第40页 |
3.1.6 系统发育树的构建与分析 | 第40页 |
3.1.7 组织分布研究 | 第40-41页 |
3.1.8 开放阅读框全长基因的验证 | 第41页 |
3.2 结果与分析 | 第41-59页 |
3.2.1 DviOBPs的鉴定、系统发育分析及组织分布研究 | 第41-45页 |
3.2.2 DviCSPs的鉴定、系统发育分析及组织分布研究 | 第45-49页 |
3.2.3 DviORs的鉴定、系统发育分析及组织分布研究 | 第49-52页 |
3.2.4 DviSNMP1的鉴定、系统发育分析及组织分布研究 | 第52-54页 |
3.2.5 DviGSTs的鉴定、系统发育分析及组织分布研究 | 第54-59页 |
3.3 结论与讨论 | 第59-63页 |
第四章 葡萄根瘤蚜寄主植物挥发物的测定 | 第63-70页 |
4.1 材料和方法 | 第63-64页 |
4.1.1 供试葡萄根段 | 第63页 |
4.1.2 主要仪器 | 第63页 |
4.1.3 实验方法 | 第63-64页 |
4.2 结果与分析 | 第64-68页 |
4.3 结论与讨论 | 第68-70页 |
第五章 葡萄根瘤蚜嗅觉相关蛋白的原核表达与纯化 | 第70-82页 |
5.1 材料与方法 | 第70-76页 |
5.1.1 供试昆虫 | 第70页 |
5.1.2 主要试剂 | 第70-71页 |
5.1.3 缓冲液配制 | 第71-72页 |
5.1.4 主要仪器 | 第72页 |
5.1.5 目的蛋白ORF的扩增和纯化 | 第72-73页 |
5.1.6 克隆载体的连接与转化 | 第73-74页 |
5.1.7 质粒双酶切与表达载体的构建 | 第74-75页 |
5.1.8 重组蛋白的原核表达 | 第75页 |
5.1.9 重组蛋白的纯化 | 第75-76页 |
5.1.10 蛋白浓度测定 | 第76页 |
5.2 结果与分析 | 第76-80页 |
5.2.1 DviOBPs和DviCSPs的扩增、纯化及转化 | 第76-77页 |
5.2.2 重组质粒及pET28a(+)双酶切鉴定 | 第77页 |
5.2.3 蛋白表达菌的转化 | 第77-78页 |
5.2.4 蛋白诱导表达 | 第78-80页 |
5.2.5 蛋白浓度测定 | 第80页 |
5.3 结论与讨论 | 第80-82页 |
第六章 DviCSP2和DviCSP5的结合特性 | 第82-91页 |
6.1 材料与方法 | 第82-85页 |
6.1.1 蛋白样品 | 第82-83页 |
6.1.2 主要试剂 | 第83页 |
6.1.3 缓冲液的配制 | 第83页 |
6.1.4 主要仪器 | 第83页 |
6.1.5 蛋白样品与1-NPN的结合常数测定 | 第83页 |
6.1.6 气味标样的荧光竞争结合实验 | 第83-85页 |
6.2 结果与分析 | 第85-90页 |
6.2.1 重组蛋白与1-NPN的结合常数测定 | 第85-86页 |
6.2.2 重组蛋白与气味标样的竞争结合实验 | 第86-90页 |
6.3 结论与讨论 | 第90-91页 |
第七章 葡萄根瘤蚜DviCSP5的免疫荧光定位 | 第91-97页 |
7.1 材料与方法 | 第91-94页 |
7.1.1 供试动物 | 第91页 |
7.1.2 主要试剂 | 第91页 |
7.1.3 缓冲液配制 | 第91-92页 |
7.1.4 主要仪器 | 第92页 |
7.1.5 原核表达载体的构建、蛋白质的纯化、透析及蛋白浓度测定 | 第92页 |
7.1.6 多克隆抗体的制备 | 第92页 |
7.1.7 抗体效价检测 | 第92-93页 |
7.1.8 Westernblot检测多克隆抗体的特异性 | 第93页 |
7.1.9 葡萄根瘤蚜DviCSP5的免疫荧光定位 | 第93-94页 |
7.2 结果与分析 | 第94-95页 |
7.2.1 抗体效价检测 | 第94页 |
7.2.2 DviCSP5免疫荧光定位 | 第94-95页 |
7.3 结论与讨论 | 第95-97页 |
第八章 结论与展望 | 第97-99页 |
8.1 结论 | 第97-98页 |
8.2 展望 | 第98-99页 |
参考文献 | 第99-114页 |
附录 | 第114-117页 |
缩略词 | 第117-119页 |
致谢 | 第119-121页 |
作者简介 | 第121页 |