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葡萄根瘤蚜嗅觉相关蛋白的鉴定与功能研究

摘要第5-7页
abstract第7-9页
第一章 文献综述第13-26页
    1.1 昆虫的嗅觉识别系统及感受识别机制第13-15页
        1.1.1 昆虫的嗅觉识别系统第13-14页
        1.1.2 感受气味分子的机制第14页
        1.1.3 气味分子第14-15页
    1.2 昆虫嗅觉相关蛋白第15-24页
        1.2.1 气味结合蛋白第15-18页
        1.2.2 化学感受蛋白第18-20页
        1.2.3 气味受体第20-21页
        1.2.4 感觉神经元膜蛋白第21-23页
        1.2.5 气味降解酶第23-24页
    1.3 葡萄根瘤蚜第24-26页
        1.3.1 葡萄根瘤蚜研究现状第24-25页
        1.3.2 本研究的目的和意义第25-26页
第二章 葡萄根瘤蚜触角和口器超微结构观察第26-37页
    2.1 材料与方法第26-27页
        2.1.1 供试昆虫第26页
        2.1.2 主要仪器第26页
        2.1.3 扫描电镜观察第26-27页
    2.2 结果与分析第27-35页
        2.2.1 葡萄根瘤蚜触角和口器的整体形态第27-30页
        2.2.2 葡萄根瘤蚜触角和口器感器第30-35页
    2.3 结论与讨论第35-37页
第三章 葡萄根瘤蚜嗅觉相关基因的鉴定第37-63页
    3.1 材料与方法第38-41页
        3.1.1 供试昆虫第38页
        3.1.2 主要试剂第38页
        3.1.3 主要仪器第38-39页
        3.1.4 总RNA提取及cDNA第一链的合成第39-40页
        3.1.5 葡萄根瘤蚜嗅觉相关基因的鉴定与序列分析第40页
        3.1.6 系统发育树的构建与分析第40页
        3.1.7 组织分布研究第40-41页
        3.1.8 开放阅读框全长基因的验证第41页
    3.2 结果与分析第41-59页
        3.2.1 DviOBPs的鉴定、系统发育分析及组织分布研究第41-45页
        3.2.2 DviCSPs的鉴定、系统发育分析及组织分布研究第45-49页
        3.2.3 DviORs的鉴定、系统发育分析及组织分布研究第49-52页
        3.2.4 DviSNMP1的鉴定、系统发育分析及组织分布研究第52-54页
        3.2.5 DviGSTs的鉴定、系统发育分析及组织分布研究第54-59页
    3.3 结论与讨论第59-63页
第四章 葡萄根瘤蚜寄主植物挥发物的测定第63-70页
    4.1 材料和方法第63-64页
        4.1.1 供试葡萄根段第63页
        4.1.2 主要仪器第63页
        4.1.3 实验方法第63-64页
    4.2 结果与分析第64-68页
    4.3 结论与讨论第68-70页
第五章 葡萄根瘤蚜嗅觉相关蛋白的原核表达与纯化第70-82页
    5.1 材料与方法第70-76页
        5.1.1 供试昆虫第70页
        5.1.2 主要试剂第70-71页
        5.1.3 缓冲液配制第71-72页
        5.1.4 主要仪器第72页
        5.1.5 目的蛋白ORF的扩增和纯化第72-73页
        5.1.6 克隆载体的连接与转化第73-74页
        5.1.7 质粒双酶切与表达载体的构建第74-75页
        5.1.8 重组蛋白的原核表达第75页
        5.1.9 重组蛋白的纯化第75-76页
        5.1.10 蛋白浓度测定第76页
    5.2 结果与分析第76-80页
        5.2.1 DviOBPs和DviCSPs的扩增、纯化及转化第76-77页
        5.2.2 重组质粒及pET28a(+)双酶切鉴定第77页
        5.2.3 蛋白表达菌的转化第77-78页
        5.2.4 蛋白诱导表达第78-80页
        5.2.5 蛋白浓度测定第80页
    5.3 结论与讨论第80-82页
第六章 DviCSP2和DviCSP5的结合特性第82-91页
    6.1 材料与方法第82-85页
        6.1.1 蛋白样品第82-83页
        6.1.2 主要试剂第83页
        6.1.3 缓冲液的配制第83页
        6.1.4 主要仪器第83页
        6.1.5 蛋白样品与1-NPN的结合常数测定第83页
        6.1.6 气味标样的荧光竞争结合实验第83-85页
    6.2 结果与分析第85-90页
        6.2.1 重组蛋白与1-NPN的结合常数测定第85-86页
        6.2.2 重组蛋白与气味标样的竞争结合实验第86-90页
    6.3 结论与讨论第90-91页
第七章 葡萄根瘤蚜DviCSP5的免疫荧光定位第91-97页
    7.1 材料与方法第91-94页
        7.1.1 供试动物第91页
        7.1.2 主要试剂第91页
        7.1.3 缓冲液配制第91-92页
        7.1.4 主要仪器第92页
        7.1.5 原核表达载体的构建、蛋白质的纯化、透析及蛋白浓度测定第92页
        7.1.6 多克隆抗体的制备第92页
        7.1.7 抗体效价检测第92-93页
        7.1.8 Westernblot检测多克隆抗体的特异性第93页
        7.1.9 葡萄根瘤蚜DviCSP5的免疫荧光定位第93-94页
    7.2 结果与分析第94-95页
        7.2.1 抗体效价检测第94页
        7.2.2 DviCSP5免疫荧光定位第94-95页
    7.3 结论与讨论第95-97页
第八章 结论与展望第97-99页
    8.1 结论第97-98页
    8.2 展望第98-99页
参考文献第99-114页
附录第114-117页
缩略词第117-119页
致谢第119-121页
作者简介第121页

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