摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第1章 文献综述 | 第10-26页 |
1.1 萜类化合物生物合成途径的研究 | 第10-12页 |
1.1.1 萜类化合物的结构与分类 | 第10-11页 |
1.1.2 萜类化合物的生物学功能与经济价值 | 第11-12页 |
1.2 紫杉醇生物合成途径 | 第12-24页 |
1.2.1 紫杉醇前体合成途径 | 第13-24页 |
1.3 细胞培养合成紫杉醇的研究 | 第24-25页 |
1.4 红豆杉的遗传转化 | 第25-26页 |
第2章 绪论 | 第26-30页 |
2.1 研究的目的与意义 | 第26-27页 |
2.2 研究的内容与目标 | 第27-28页 |
2.2.1 研究内容 | 第27页 |
2.2.2 研究目标 | 第27-28页 |
2.3 技术路线 | 第28-30页 |
第3章 材料与方法 | 第30-62页 |
3.1 实验材料 | 第30-32页 |
3.1.1. 植物材料 | 第30页 |
3.1.2. 菌株及功能互补所需载体 | 第30页 |
3.1.3. 仪器和设备 | 第30-31页 |
3.1.4. 试剂盒及购买的试剂 | 第31页 |
3.1.5. 自配的主要标准试剂 | 第31-32页 |
3.2 方法与步骤 | 第32-62页 |
3.2.1 南方红豆杉材料的准备 | 第32-33页 |
3.2.2 南方红豆杉组织中RNA提取 | 第33页 |
3.2.3 南方红豆杉RNA的质量检测 | 第33-34页 |
3.2.4 从南方红豆杉总RNA合成第一链cDNA | 第34-36页 |
3.2.5 南方红豆杉DXS基因克隆 | 第36-40页 |
3.2.6 TcDXR基因编码区的克隆 | 第40-42页 |
3.2.7 目的条带回收、亚克隆及测序 | 第42-45页 |
3.2.8 生物信息学分析 | 第45页 |
3.2.9 TcDXR基因高效植物表达载体的构建 | 第45-50页 |
3.2.10 TcDXS基因的颜色功能互补验证 | 第50-55页 |
3.2.11 TcDXS与TcDXR基因组织表达的荧光定量PCR分析 | 第55-57页 |
3.2.12 TcDXS与TcDXR基因的蛋白质原核表达载体构建 | 第57-62页 |
第4章 结果与讨论 | 第62-78页 |
4.1 红豆杉各组织RNA的提取 | 第62-63页 |
4.2 TcDXS基因克隆与功能分析 | 第63-74页 |
4.2.1 TcDXS全长cDNA序列分析 | 第63-64页 |
4.2.2 TcDXS同源性分析 | 第64-67页 |
4.2.3 TcDXS蛋白二级结构预测 | 第67页 |
4.2.4 TcDXS系统进化树分析 | 第67-68页 |
4.2.5 TcDXS蛋白三级结构预测 | 第68-69页 |
4.2.6 TcDXS的组织表达谱分析 | 第69-71页 |
4.2.7 TcDXS基因的功能验证 | 第71-72页 |
4.2.8 TcDXS原核表达载体的构建及重组蛋白的SDS-PAGE电泳 | 第72-74页 |
4.3 TcDXR基因编码区克隆、植物表达载体构建及工程菌的获得 | 第74页 |
4.4 TcDXR基因原核表达载体的构建及重组蛋白表达 | 第74-75页 |
4.5 TcDXR的组织表达谱分析 | 第75-77页 |
4.6 TcDXS和TcDXR组织表达比较分析 | 第77-78页 |
第5章 结论与建议 | 第78-80页 |
附表 | 第80-83页 |
缩略词表 | 第83-86页 |
参考文献 | 第86-98页 |
致谢 | 第98-99页 |