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紫杉醇前体依赖于MEP途径合成的分子调控机理I:南方红豆杉DXS和DXR基因的克隆及功能分析

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
第1章 文献综述第10-26页
    1.1 萜类化合物生物合成途径的研究第10-12页
        1.1.1 萜类化合物的结构与分类第10-11页
        1.1.2 萜类化合物的生物学功能与经济价值第11-12页
    1.2 紫杉醇生物合成途径第12-24页
        1.2.1 紫杉醇前体合成途径第13-24页
    1.3 细胞培养合成紫杉醇的研究第24-25页
    1.4 红豆杉的遗传转化第25-26页
第2章 绪论第26-30页
    2.1 研究的目的与意义第26-27页
    2.2 研究的内容与目标第27-28页
        2.2.1 研究内容第27页
        2.2.2 研究目标第27-28页
    2.3 技术路线第28-30页
第3章 材料与方法第30-62页
    3.1 实验材料第30-32页
        3.1.1. 植物材料第30页
        3.1.2. 菌株及功能互补所需载体第30页
        3.1.3. 仪器和设备第30-31页
        3.1.4. 试剂盒及购买的试剂第31页
        3.1.5. 自配的主要标准试剂第31-32页
    3.2 方法与步骤第32-62页
        3.2.1 南方红豆杉材料的准备第32-33页
        3.2.2 南方红豆杉组织中RNA提取第33页
        3.2.3 南方红豆杉RNA的质量检测第33-34页
        3.2.4 从南方红豆杉总RNA合成第一链cDNA第34-36页
        3.2.5 南方红豆杉DXS基因克隆第36-40页
        3.2.6 TcDXR基因编码区的克隆第40-42页
        3.2.7 目的条带回收、亚克隆及测序第42-45页
        3.2.8 生物信息学分析第45页
        3.2.9 TcDXR基因高效植物表达载体的构建第45-50页
        3.2.10 TcDXS基因的颜色功能互补验证第50-55页
        3.2.11 TcDXS与TcDXR基因组织表达的荧光定量PCR分析第55-57页
        3.2.12 TcDXS与TcDXR基因的蛋白质原核表达载体构建第57-62页
第4章 结果与讨论第62-78页
    4.1 红豆杉各组织RNA的提取第62-63页
    4.2 TcDXS基因克隆与功能分析第63-74页
        4.2.1 TcDXS全长cDNA序列分析第63-64页
        4.2.2 TcDXS同源性分析第64-67页
        4.2.3 TcDXS蛋白二级结构预测第67页
        4.2.4 TcDXS系统进化树分析第67-68页
        4.2.5 TcDXS蛋白三级结构预测第68-69页
        4.2.6 TcDXS的组织表达谱分析第69-71页
        4.2.7 TcDXS基因的功能验证第71-72页
        4.2.8 TcDXS原核表达载体的构建及重组蛋白的SDS-PAGE电泳第72-74页
    4.3 TcDXR基因编码区克隆、植物表达载体构建及工程菌的获得第74页
    4.4 TcDXR基因原核表达载体的构建及重组蛋白表达第74-75页
    4.5 TcDXR的组织表达谱分析第75-77页
    4.6 TcDXS和TcDXR组织表达比较分析第77-78页
第5章 结论与建议第78-80页
附表第80-83页
缩略词表第83-86页
参考文献第86-98页
致谢第98-99页

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