| 致谢 | 第8-9页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 缩写词 | 第13-15页 |
| 摘要 | 第15-17页 |
| Abstract | 第17-18页 |
| 前言 | 第19-21页 |
| 1 文献综述 | 第21-45页 |
| 1.1 番茄果实类胡萝卜素代谢途径及其影响因素 | 第21-26页 |
| 1.1.1 番茄红素的代谢途径及相关基因 | 第21-24页 |
| 1.1.1.1 番茄红素的代谢途径 | 第21-23页 |
| 1.1.1.2 番茄红素代谢相关基因 | 第23-24页 |
| 1.1.2 影响番茄红素代谢的环境因子 | 第24-26页 |
| 1.1.2.1 温度因素 | 第24-26页 |
| 1.1.2.2 光照因素 | 第26页 |
| 1.1.2.3 化学物质 | 第26页 |
| 1.1.3 番茄果实内ROS变化影响番茄红素代谢 | 第26页 |
| 1.2 多胺代谢途径及其在高等植物体内的生理功能 | 第26-34页 |
| 1.2.1 多胺在高等植物体内的生物代谢途径 | 第26-28页 |
| 1.2.1.1 多胺在高等植物体内合成途径 | 第26-27页 |
| 1.2.1.2 多胺在高等植物体内的降解途径 | 第27-28页 |
| 1.2.1.3 多胺的动态平衡 | 第28页 |
| 1.2.2 高等植物体内多胺的生理功能 | 第28-34页 |
| 1.2.2.1 多胺与植物花发育的关系 | 第28-29页 |
| 1.2.2.2 多胺与果实发育的关系 | 第29-31页 |
| 1.2.2.3 多胺与逆境的关系 | 第31页 |
| 1.2.2.4 多胺与离子通道的关系 | 第31-32页 |
| 1.2.2.5 多胺与信号转导的关系 | 第32-33页 |
| 1.2.2.6 多胺与细胞程序性死亡的关系 | 第33页 |
| 1.2.2.7 内源多胺与细胞凋亡的关系 | 第33-34页 |
| 1.2.2.8 多胺与SAMDC | 第34页 |
| 1.3 促分裂原活化蛋白激酶及其在高等植物体内的作用 | 第34-42页 |
| 1.3.1 植物MAPK蛋白激酶的结构特点和分类 | 第35-36页 |
| 1.3.1.1 植物中MAPKs的结构特点 | 第35页 |
| 1.3.1.2 植物中MAPKs的分类 | 第35-36页 |
| 1.3.2 MAPKs级联途径的调控及其活化特性 | 第36-37页 |
| 1.3.2.1 MAPKs级联途径的调控 | 第36-37页 |
| 1.3.2.2 植物中MAPKs的活化特性 | 第37页 |
| 1.3.3 植物中MAPKs的作用 | 第37-42页 |
| 1.3.3.1 MAPKs在非生物逆境信号转导中的作用 | 第37-38页 |
| 1.3.3.2 MAPKs在在植物激素信号转导中的作用 | 第38-39页 |
| 1.3.3.3 MAPKs与氧爆发之间的关系 | 第39-40页 |
| 1.3.3.4 MAPK信号转导途径与植物发育调控 | 第40-42页 |
| 1.4 本项目研究的工作基础与目的意义 | 第42-45页 |
| 2 不同果色番茄类胡萝卜素代谢特性与基因表达分析 | 第45-55页 |
| 2.1 材料与方法 | 第45-48页 |
| 2.1.1 植物材料与试剂 | 第45-46页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第46-48页 |
| 2.1.2.1 TRIzoL法提取番茄总RNA | 第46页 |
| 2.1.2.2 番茄RNA的反转录 | 第46-47页 |
| 2.1.2.3 PCR扩增体系和引物 | 第47页 |
| 2.1.2.4 类胡萝卜素含量测定 | 第47-48页 |
| 2.2 结果与分析 | 第48-52页 |
| 2.2.1 番茄不同果色突变体表型 | 第48-49页 |
| 2.2.2 番茄不同果色突变体类胡萝卜素含量测定 | 第49-50页 |
| 2.2.3 番茄不同果色突变体中类胡萝卜素代谢基因的表达分析 | 第50-52页 |
| 2.3 讨论 | 第52-55页 |
| 3 外源亚精胺影响不同温度下番茄果实成熟和类胡萝卜素代谢生理基础研究 | 第55-73页 |
| 3.1 材料与方法 | 第55-59页 |
| 3.1.1 植物材料与实验处理 | 第55-56页 |
| 3.1.2 番茄果实乙烯和CO2释放速率的测定 | 第56页 |
| 3.1.3 番茄果实品质测定 | 第56-57页 |
| 3.1.3.1 色差测定 | 第56页 |
| 3.1.3.2 硬度测定 | 第56页 |
| 3.1.3.3 还原糖、可溶性固形物、有机酸和总抗坏血酸含量测定 | 第56-57页 |
| 3.1.4 总抗氧化活性测定 | 第57页 |
| 3.1.5 过氧化氢含量测定 | 第57页 |
| 3.1.6 类胡萝卜素含量测定 | 第57-58页 |
| 3.1.6.1 色谱条件 | 第57-58页 |
| 3.1.6.2 样品前处理 | 第58页 |
| 3.1.6.3 标样的制备 | 第58页 |
| 3.1.6.4 类胡萝卜素的含量计算 | 第58页 |
| 3.1.7 质体发育情况的观察 | 第58-59页 |
| 3.1.8 多胺含量测定 | 第59页 |
| 3.1.8.1 色谱条件 | 第59页 |
| 3.1.8.2 样品前处理 | 第59页 |
| 3.1.8.3 标样的制备 | 第59页 |
| 3.1.8.4 多胺的含量计算 | 第59页 |
| 3.1.8.5 数据统计分析 | 第59页 |
| 3.2 结果与分析 | 第59-69页 |
| 3.2.1 番茄果实乙烯和CO2释放速率 | 第59-60页 |
| 3.2.2 番茄果实成熟与品质 | 第60-63页 |
| 3.2.2.1 果实色差 | 第60-62页 |
| 3.2.2.2 果实硬度 | 第62页 |
| 3.2.2.3 还原糖、可溶性固形物含量、有机酸含量和抗坏血酸含量 | 第62-63页 |
| 3.2.3 总抗氧化活性 | 第63-64页 |
| 3.2.4 H_2O_2含量 | 第64-65页 |
| 3.2.5 类胡萝卜素含量测定 | 第65-67页 |
| 3.2.6 果实质体发育观察 | 第67-69页 |
| 3.2.7 果实多胺含量测定 | 第69页 |
| 3.3 讨论 | 第69-73页 |
| 3.3.1 不同温度和亚精胺处理对番茄果实成熟过程的影响 | 第69-70页 |
| 3.3.2 不同温度和亚精胺处理对番茄果实内含物的影响 | 第70页 |
| 3.3.3 不同温度和亚精胺处理对番茄果实类胡萝卜素代谢的影响 | 第70-73页 |
| 4 亚高温和Spd处理下番茄转录组差异的基因芯片分析 | 第73-91页 |
| 4.1 材料与方法 | 第73-75页 |
| 4.1.1 植物材料与试剂 | 第73页 |
| 4.1.2 总RNA的分离与检测 | 第73页 |
| 4.1.3 芯片结果数据处理 | 第73-74页 |
| 4.1.4 qRT-PCR验证基因芯片结果 | 第74-75页 |
| 4.1.4.1 实时荧光定量PCR的体系和程序 | 第74页 |
| 4.1.4.2 实时荧光定量PCR的引物设计 | 第74页 |
| 4.1.4.3 实时荧光定量PCR的计算方法 | 第74-75页 |
| 4.2 结果与分析 | 第75-89页 |
| 4.2.1 高温胁迫对番茄果实转录组的影响 | 第75-77页 |
| 4.2.2 外源亚精胺处理对番茄果实转录组的影响 | 第77页 |
| 4.2.3 亚高温和亚精胺共同作用对番茄果实转录组的影响 | 第77-78页 |
| 4.2.4 qRT-PCR验证基因芯片分析结果 | 第78-89页 |
| 4.3 讨论 | 第89-91页 |
| 5 番茄SlMAPK3的功能分析 | 第91-115页 |
| 5.1 材料与方法 | 第91-101页 |
| 5.1.1 植物材料与实验处理 | 第91-92页 |
| 5.1.2 SlMAPK3基因干涉载体的构建 | 第92-94页 |
| 5.1.2.1 干涉片段的分离 | 第92-93页 |
| 5.1.2.2 干涉载体的制备 | 第93-94页 |
| 5.1.3 SlMAPK3过表达载体的构建 | 第94-95页 |
| 5.1.3.1 过表达片段的分离 | 第94页 |
| 5.1.3.2 过表达载体的制备 | 第94-95页 |
| 5.1.4 冻融法转化农杆菌 | 第95-96页 |
| 5.1.4.1 转化农杆菌的步骤 | 第95页 |
| 5.1.4.2 农杆菌中质粒的鉴定 | 第95-96页 |
| 5.1.5 番茄的遗传转化 | 第96-97页 |
| 5.1.5.1 实验材料及菌株 | 第96页 |
| 5.1.5.2 培养基配比 | 第96页 |
| 5.1.5.3 子叶不定芽分化的Hyg筛选浓度的确定 | 第96页 |
| 5.1.5.4 侵染转化载体菌液的制备 | 第96-97页 |
| 5.1.5.5 无菌苗的获得 | 第97页 |
| 5.1.5.6 外植体及离体再生 | 第97页 |
| 5.1.5.7 不定芽的继代培养 | 第97页 |
| 5.1.5.8 再生植株的生根培养与移栽 | 第97页 |
| 5.1.6 番茄35S：MAPK3和35S：mapk3转化植株的检测 | 第97-99页 |
| 5.1.6.1 转基因番茄DNA的提取及质量检测 | 第97-98页 |
| 5.1.6.2 转化番茄植株的PCR检测 | 第98-99页 |
| 5.1.6.3 转化植株的X-Gluc组织化学染色检测 | 第99页 |
| 5.1.6.4 阳性转基因植株的Real-time PCR检测 | 第99页 |
| 5.1.7 番茄35S:MAPK3转基因植株 | 第99-101页 |
| 5.2 结果与分析 | 第101-112页 |
| 5.2.1 SlMAPK3干涉载体和过表达载体的构建 | 第101-103页 |
| 5.2.1.1 SlMAPK3干涉片段和过表达片段的获得 | 第101-103页 |
| 5.2.1.2 表达载体的获得 | 第103页 |
| 5.2.2 番茄转基因植株的获得 | 第103-105页 |
| 5.2.3 番茄转基因植株的分子检测 | 第105-108页 |
| 5.2.3.1 PCR检测 | 第105-106页 |
| 5.2.3.2 X-Gluc组织化学染色检测 | 第106页 |
| 5.2.3.3 番茄SlMAPK3转基因植株不同株系SlMAPK1、SlMAPK2、SlMAPK3表达分析 | 第106-107页 |
| 5.2.3.4 番茄不同器官SlMAPK1、SlMAPK2、SlMAPK3表达分析 | 第107-108页 |
| 5.2.4 番茄35S:MAPK3转基因植株的表型观察 | 第108页 |
| 5.2.5 不同逆境处理下番茄35S：MAPK3转基因植株中SlMAPK1、SlMAPK和SlMAPK3的表达特征分析 | 第108-112页 |
| 5.2.5.1 耐盐性检测 | 第108-109页 |
| 5.2.5.2 高温胁迫 | 第109-110页 |
| 5.2.5.3 低温胁迫 | 第110-111页 |
| 5.2.5.4 耐创伤和触摸逆境检测 | 第111-112页 |
| 5.3 讨论 | 第112-115页 |
| 5.3.1 植物表达载体构建及番茄遗传转化 | 第112-113页 |
| 5.3.2 不同逆境处理下番茄MAPK3超量表达转基因植株中SlMAPK1、SlMAPK2和SlMAPK3的表达特征分析 | 第113-115页 |
| 结论 | 第115-117页 |
| 参考文献 | 第117-143页 |
| 博士期间发表的论文 | 第143页 |
