| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 文献综述 | 第10-20页 |
| 1.1 LRH-1 研究背景 | 第10-13页 |
| 1.1.1 LRH-1 的结构和表达 | 第11-12页 |
| 1.1.2 LRH-1 的主要生物学功能 | 第12-13页 |
| 1.2 黑线仓鼠研究进展 | 第13-15页 |
| 1.3 SNP 研究进展 | 第15-16页 |
| 1.4 繁殖状态的鉴定 | 第16-17页 |
| 1.5 实时荧光定量 PCR 技术及其应用 | 第17-19页 |
| 1.6 研究目的及意义 | 第19-20页 |
| 2 实验试剂和设备 | 第20-21页 |
| 2.1 实验药品和试剂 | 第20页 |
| 2.2 实验仪器和设备 | 第20-21页 |
| 3 黑线仓鼠 LRH-1 基因引物设计 | 第21-22页 |
| 4 实验一 LRH-1 基因全序列的克隆及蛋白质的同源建模 | 第22-36页 |
| 4.1 实验材料 | 第22页 |
| 4.2 实验方法 | 第22-25页 |
| 4.2.1 基因组 DNA 提取 | 第22页 |
| 4.2.2 PCR 扩增 | 第22页 |
| 4.2.3 总 RNA 提取 | 第22-23页 |
| 4.2.4 检测 OD 值 | 第23页 |
| 4.2.5 1.5﹪琼脂糖变性胶检测总 RNA | 第23-24页 |
| 4.2.6 cDNA 合成 | 第24页 |
| 4.2.7 目的片段的回收 | 第24页 |
| 4.2.8 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第24-25页 |
| 4.2.9 连接 | 第25页 |
| 4.2.10 转化 | 第25页 |
| 4.2.11 阳性克隆鉴定 | 第25页 |
| 4.2.12 数据分析 | 第25页 |
| 4.3 结果与分析 | 第25-33页 |
| 4.3.1 基因组 DNA 和总 RNA 提取 | 第25-26页 |
| 4.3.2 引物扩增结果 | 第26-27页 |
| 4.3.3 测序结果 | 第27-28页 |
| 4.3.4 不同变体的比较分析 | 第28-31页 |
| 4.3.5 不同物种 LRH-1 基因的核苷酸序列与氨基酸序列分析 | 第31-32页 |
| 4.3.6 黑线仓鼠 LRH-1 基因系统进化分析 | 第32-33页 |
| 4.4 讨论 | 第33-36页 |
| 4.4.1 LRH-1 基因序列分析 | 第33-35页 |
| 4.4.2 黑线仓鼠 LRH-1 基因系统进化树分析 | 第35-36页 |
| 5 实验二黑线仓鼠 LRH-1 的 SNP 分析 | 第36-42页 |
| 5.1 实验材料 | 第36页 |
| 5.2 实验方法 | 第36页 |
| 5.2.1 基因组 DNA 的提取 | 第36页 |
| 5.2.2 SNP 引物的扩增 | 第36页 |
| 5.2.3 目的片段的回收、连接、转化及测序 | 第36页 |
| 5.2.4 数据分析 | 第36页 |
| 5.3 结果与分析 | 第36-40页 |
| 5.3.1 引物扩增结果 | 第36-37页 |
| 5.3.2 序列测定与分析 | 第37页 |
| 5.3.3 黑线仓鼠 LRH-15’调控区 SNPs 分析 | 第37-40页 |
| 5.4 讨论 | 第40-42页 |
| 5.4.1 不同地理种群的 SNP 分析 | 第40-41页 |
| 5.4.2 不同胎仔数的相关性分析 | 第41-42页 |
| 6 实验三不同胎仔数黑线仓鼠 LRH-1 的差异表达 | 第42-53页 |
| 6.1 实验材料 | 第42页 |
| 6.2 实验方法 | 第42-43页 |
| 6.2.1 繁殖状态的鉴定 | 第42页 |
| 6.2.2 组织总 RNA 提取 | 第42页 |
| 6.2.3 荧光定量引物的扩增 | 第42页 |
| 6.2.4 目的片段的回收、连接、转化及测序 | 第42-43页 |
| 6.2.5 cDNA 浓度的标定 | 第43页 |
| 6.2.6 标准曲线和融解曲线的绘制 | 第43页 |
| 6.2.7 实时荧光定量 PCR 反应 | 第43页 |
| 6.3 结果与分析 | 第43-50页 |
| 6.3.1 发情期阴道组织涂片 | 第43页 |
| 6.3.2 目的片段和管家基因扩增结果 | 第43-45页 |
| 6.3.3 扩增曲线、融解曲线和标准曲线 | 第45-47页 |
| 6.3.4 黑线仓鼠 LRH-1 的相对表达量 | 第47-50页 |
| 6.4 讨论 | 第50-53页 |
| 6.4.1 荧光定量 PCR 实验准备 | 第50-51页 |
| 6.4.2 相对表达与 SNP 分析 | 第51-53页 |
| 7 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-64页 |
| 硕士期间发表文章 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
