中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
縮略语/符号说明 | 第10-12页 |
前言 | 第12-14页 |
研究现状、成果 | 第12页 |
研究目的、方法 | 第12-14页 |
一、真核表达质粒pSG5-Sox2及pSG5-Nanog构建和鉴定 | 第14-43页 |
1.1 材料和方法 | 第14-31页 |
1.1.1 材料 | 第14-16页 |
1.1.2 主要试剂配置 | 第16-18页 |
1.1.3 技术路线 | 第18页 |
1.1.4 方法 | 第18-31页 |
1.2 结果 | 第31-38页 |
1.2.1 总RNA提取 | 第31页 |
1.2.2 目的基因Sox2及Nanog的PCR扩增结果 | 第31-32页 |
1.2.3 重组质粒的构建和鉴定结果 | 第32-33页 |
1.2.4 重组质粒的序列测序结果 | 第33页 |
1.2.5 重组质粒应用BLAST软件序列比对结果 | 第33-38页 |
1.3 讨论 | 第38-42页 |
1.3.1 人类Sox2基因 | 第38-39页 |
1.3.2 人类Nanog基因 | 第39-40页 |
1.3.3 基因克隆 | 第40-42页 |
1.4 小结 | 第42-43页 |
二、重组质粒转染胎肺成纤维细胞及表达鉴定 | 第43-68页 |
2.1 材料与方法 | 第43-54页 |
2.1.1 材料 | 第43-45页 |
2.1.2 主要试剂配置 | 第45-46页 |
2.1.3 技术路线 | 第46页 |
2.1.4 方法 | 第46-54页 |
2.2 结果 | 第54-63页 |
2.2.1 胎肺成纤维细胞镜下观察形态学特点 | 第54-55页 |
2.2.2 重组质粒转染后胎肺成纤维细胞镜下形态学变化 | 第55-56页 |
2.2.3 RT-PCR检测重组质粒pSG5-Sox2及pSG5-Nanog | 第56-57页 |
2.2.4 免疫细胞化学染色检测重组质粒蛋白表达 | 第57-59页 |
2.2.5 胎肺成纤维细胞过表达重组质粒向上皮样分化 | 第59-61页 |
2.2.6 胎肺成纤维细胞过表达重组质粒向神经细胞样分化 | 第61-63页 |
2.3 讨论 | 第63-67页 |
2.3.1 原代培养 | 第63页 |
2.3.2 转染方法简介 | 第63-64页 |
2.3.3 重组质粒转染宿主细胞 | 第64-67页 |
2.4 小结 | 第67-68页 |
结论 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-74页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第74-75页 |
综述 | 第75-91页 |
综述参考文献 | 第84-91页 |
致谢 | 第91页 |