| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 英文缩写一览表 | 第10-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-15页 |
| 第2章 材料与方法 | 第15-26页 |
| 2.1 材料 | 第15-16页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第15页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第15-16页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第16页 |
| 2.2 方法 | 第16-26页 |
| 2.2.1 原始卵泡的获取与培养 | 第16-17页 |
| 2.2.2 原始卵泡的形态学观察及 ptenmRNA 和 PTEN 蛋白的表达 | 第17-18页 |
| 2.2.3 Pten mRNA 在大鼠原始卵泡中的表达 | 第18-19页 |
| 2.2.4 慢病毒转染 | 第19-23页 |
| 2.2.5 卵巢培养液加入 PI3K 抑制剂 | 第23-24页 |
| 2.2.6 慢病毒 pten-shRNA 感染后原始卵泡中 PI3K 蛋白、PTEN 蛋白的表达水平变化 | 第24-25页 |
| 2.2.7 统计分析 | 第25-26页 |
| 第3章 结果 | 第26-41页 |
| 3.1 二日龄大鼠卵巢在 WAYMOUTH 培养体系中的原始卵泡发育情况 | 第26-27页 |
| 3.2 PTEN MRNA 在原始卵泡中的表达 | 第27-29页 |
| 3.2.1 Pten 引物的设计与合成 | 第28-29页 |
| 3.3 PTEN 蛋白在原始卵泡中的表达定位及在原始卵泡中分布变化 | 第29-30页 |
| 3.4 慢病毒 PTEN-SHRNA 感染后 PTENMRNA、PTEN 蛋白的表达变化及原始卵泡的形态学分析 | 第30-34页 |
| 3.4.1 慢病毒感染后最佳干扰片断的筛选 | 第30-32页 |
| 3.4.2 慢病毒 PTEN-SHRNA 感染后 PTEN MRNA 的表达变化 | 第32-33页 |
| 3.4.3 慢病毒 pten-shRNA 感染后 PTEN 蛋白的变化 | 第33-34页 |
| 3.5. 慢病毒 PTEN-SHRNA 感染后原始卵泡的形态学 | 第34-35页 |
| 3.5.1 石蜡组织切片 HE 染色 | 第34-35页 |
| 3.5.2 冰冻组织切片荧光显微镜观察 | 第35页 |
| 3.6 收集 0，4，8 天培养液检测激素 | 第35-36页 |
| 3.7 应用 PI3K 抑制剂后原始卵泡的形态学、PTEN MRNA 的变化 | 第36-38页 |
| 3.7.1 石蜡组织切片 HE 染色 | 第36-37页 |
| 3.7.2 Pten mRNA 的表达变化 | 第37-38页 |
| 3.8 慢病毒 PTEN-SHRNA 感染后原始卵泡中 PI3K 和 PTEN 蛋白表达水平变化 | 第38-41页 |
| 3.8.1 PI3K 蛋白表达水平变化 | 第39-40页 |
| 3.8.2 PTEN 蛋白表达水平变化 | 第40-41页 |
| 第4章 讨论 | 第41-46页 |
| 4.1 PTEN MRNA、PTEN 蛋白在原始卵泡中的表达、定位及半定量分析 | 第41页 |
| 4.2 卵巢组织体外培养慢病毒感染体系 | 第41-43页 |
| 4.2.1 慢病毒系统简介 | 第41-42页 |
| 4.2.2 Pten-shRNA 慢病毒的包装、纯化以及 RNAi 效果检测 | 第42-43页 |
| 4.3 PTEN 在原始卵泡启动生长中的作用及机制分析 | 第43-46页 |
| 4.3.1 Pten 在原始卵泡启动生长中的作用 | 第43页 |
| 4.3.2 Pten 在原始卵泡启动生长中的机制分析 | 第43-46页 |
| 第5章 结论 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-51页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第51-52页 |
| 综述 | 第52-63页 |
| 参考文献 | 第61-63页 |
