中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
前言 | 第13-16页 |
第一部分 组织因子过表达对人胃癌细胞体外侵袭转移特性的影响 | 第16-33页 |
1 实验材料 | 第16-18页 |
1.1 主要仪器设备 | 第16页 |
1.2 实验药品与试剂 | 第16-17页 |
1.3 主要工作液配制 | 第17-18页 |
2 试验方法 | 第18-26页 |
2.1 细胞培养及实验分组 | 第18页 |
2.2 引物设计与合成 | 第18-19页 |
2.3 重组质粒的构建 | 第19-22页 |
2.4 质粒转染及筛选 | 第22页 |
2.5 TF mRNA表达水平检测 | 第22-24页 |
2.6 TF蛋白表达测定 | 第24-25页 |
2.7 Transwell实验 | 第25-26页 |
2.8 细胞划痕实验 | 第26页 |
2.9 统计学方法 | 第26页 |
3 结果 | 第26-30页 |
3.1 重组质粒的鉴定 | 第26页 |
3.2 TF mRNA表达水平的变化 | 第26页 |
3.3 TF蛋白表达变化 | 第26-29页 |
3.4 Transwell实验结果 | 第29-30页 |
3.5 细胞划痕实验结果 | 第30页 |
4 讨论 | 第30-33页 |
第二部分 siRNA沉默组织因子影响胃癌细胞的生物学行为 | 第33-57页 |
1 实验材料 | 第33-35页 |
1.1 实验仪器与设备 | 第33-34页 |
1.2 实验药品与试剂 | 第34页 |
1.3 主要工作液配制 | 第34-35页 |
2 实验方法 | 第35-44页 |
2.1 特异性siRNA干扰片段及相应DNA链的设计与合成 | 第35-36页 |
2.2 质粒构建及连接 | 第36-37页 |
2.3 质粒转化 | 第37-38页 |
2.4 质粒鉴定 | 第38-39页 |
2.5 质粒转染与筛选 | 第39-41页 |
2.6 RT-PCR | 第41-42页 |
2.7 流式细胞术检测 | 第42页 |
2.8 细胞增殖能力测定 | 第42页 |
2.9 化疗药物耐药性检测 | 第42-43页 |
2.10 细胞侵袭力检测 | 第43页 |
2.11 细胞划痕实验 | 第43页 |
2.12 细胞凋亡水平检测 | 第43-44页 |
2.13 裸鼠成瘤实验 | 第44页 |
2.14 统计学方法 | 第44页 |
3 结果 | 第44-53页 |
3.1 重组质粒的鉴定 | 第44-46页 |
3.2 质粒转染与筛选 | 第46页 |
3.3 转染效率 | 第46-47页 |
3.4 TFsiRNA下调细胞TFmRNA的表达 | 第47页 |
3.5 TFsiRNA下调细胞表面TF抗原表达 | 第47-48页 |
3.6 TFsiRNA抑制细胞的增殖能力 | 第48-49页 |
3.7 TFsiRNA降低化疗药物的耐药性 | 第49页 |
3.8 TFsiRNA抑制细胞的侵袭能力 | 第49-51页 |
3.9 TFsiRNA增加胃癌细胞的凋亡 | 第51页 |
3.10 TFsiRNA对胃癌细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用 | 第51-53页 |
4 讨论 | 第53-57页 |
结论 | 第57页 |
展望 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-64页 |
附图 | 第64-65页 |
文献综述 | 第65-77页 |
参考文献 | 第72-77页 |
在学期间的研究成果 | 第77-79页 |
致谢 | 第79页 |