| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 0 前言 | 第11-22页 |
| 0.1 发光细菌简介 | 第11-13页 |
| 0.1.1 发光细菌分类 | 第11-12页 |
| 0.1.2 细菌发光机理 | 第12-13页 |
| 0.2 发光细菌的应用 | 第13-14页 |
| 0.2.1 发光细菌法应用于环境检测 | 第13页 |
| 0.2.2 发光细菌法应用于食品安全检测 | 第13-14页 |
| 0.3 FMN:NADH 氧化还原酶简介 | 第14-15页 |
| 0.4 细菌细胞破碎技术 | 第15-17页 |
| 0.4.1 超声波破碎技术 | 第16页 |
| 0.4.2 渗透压冲击法 | 第16-17页 |
| 0.5 色谱技术简介 | 第17-19页 |
| 0.5.1 离子交换色谱 | 第17页 |
| 0.5.2 排阻色谱 | 第17-18页 |
| 0.5.3 亲和色谱 | 第18页 |
| 0.5.4 反相色谱 | 第18-19页 |
| 0.5.6 疏水作用色谱 | 第19页 |
| 0.5.7 其他新型色谱技术 | 第19页 |
| 0.6 SDS-PAGE 技术 | 第19-20页 |
| 0.7 研究背景 | 第20-22页 |
| 0.7.1 立题背景 | 第20-21页 |
| 0.7.2 研究目的与意义 | 第21页 |
| 0.7.3 技术路线 | 第21-22页 |
| 1 筛选 FMN:NADH 氧化还原酶活力高的菌株 | 第22-32页 |
| 1.1 引言 | 第22页 |
| 1.2 实验材料与仪器 | 第22-24页 |
| 1.2.1 菌种 | 第22-23页 |
| 1.2.2 培养基 | 第23页 |
| 1.2.3 主要试剂 | 第23页 |
| 1.2.4 溶液的配制 | 第23-24页 |
| 1.2.5 主要仪器 | 第24页 |
| 1.3 实验方法 | 第24-26页 |
| 1.3.1 冻藏发光细菌菌株的活化 | 第24-25页 |
| 1.3.2 发光细菌中粗酶液的提取 | 第25-26页 |
| 1.3.3 细菌发光强度的测定 | 第26页 |
| 1.3.4 FMN:NADH 氧化还原酶活力的测定 | 第26页 |
| 1.3.5 筛选菌株发光特性和生长特性 | 第26页 |
| 1.4 实验结果与讨论 | 第26-31页 |
| 1.4.1 筛选 FMN:NADH 氧化还原酶活力高的菌株 | 第26-27页 |
| 1.4.2 发光细菌 DB 的性质研究[16] | 第27-29页 |
| 1.4.3 发光细菌 DB 的发光曲线和生长曲线 | 第29-31页 |
| 1.5 小结 | 第31-32页 |
| 2. FMN:NADH 氧化还原酶的提取纯化 | 第32-55页 |
| 2.1 引言 | 第32-33页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第33-35页 |
| 2.2.1 菌种 | 第33页 |
| 2.2.2 培养基 | 第33页 |
| 2.2.3 主要试剂 | 第33-34页 |
| 2.2.4 溶液的配制 | 第34-35页 |
| 2.2.5 主要仪器 | 第35页 |
| 2.3 实验方法 | 第35-41页 |
| 2.3.1 超声波破碎法应用于细胞内 FMN:NADH 氧化还原酶的纯化 | 第35-37页 |
| 2.3.2 渗透压冲击法应用于细胞内 FMN:NADH 氧化还原酶 | 第37-38页 |
| 2.3.3 细菌发光强度的测定 | 第38页 |
| 2.3.4 FMN:NADH 氧化还原酶活力的测定 | 第38页 |
| 2.3.5 蛋白质的测定-紫外法 | 第38-39页 |
| 2.3.6 SDS-PAGE 凝胶电泳 | 第39-40页 |
| 2.3.7 层析柱的清洗 | 第40-41页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第41-54页 |
| 2.4.1 超声波破碎法应用于细胞内 FMN:NADH 氧化还原酶的纯化 | 第41-48页 |
| 2.4.2 渗透压冲击法应用于细胞内 FMN:NADH 氧化还原酶的纯化 | 第48-53页 |
| 2.4.3 两种纯化方法的比较 | 第53-54页 |
| 2.5 小结 | 第54-55页 |
| 3 双酶（荧光素酶和 FMN:NADH 氧化还原酶）体外发光体系的建立 | 第55-65页 |
| 3.1 引言 | 第55页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第55-57页 |
| 3.2.1 菌种 | 第55页 |
| 3.2.2 培养基 | 第55-56页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第56页 |
| 3.2.4 溶液的配制 | 第56-57页 |
| 3.2.5 主要仪器 | 第57页 |
| 3.3 实验方法 | 第57-58页 |
| 3.3.1 发光强度和双酶活力的测定 | 第57页 |
| 3.3.2 双酶的提取 | 第57-58页 |
| 3.3.3 双酶体外发光体系的建立和条件优化 | 第58页 |
| 3.3.4 混合双酶体外发光初探 | 第58页 |
| 3.4 结果和分析 | 第58-63页 |
| 3.4.1 DB 双酶体外发光体系的建立及优化 | 第58-62页 |
| 3.4.2 混合双酶发光体系的配合发光 | 第62-63页 |
| 3.5 小结 | 第63-65页 |
| 4 论文总结 | 第65-67页 |
| 5 论文的创新性 | 第67页 |
| 6 后期工作展望 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 个人简历 | 第75页 |
| 发表的学术论文 | 第75-76页 |
