缩略语表 | 第5-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
前言 | 第14-16页 |
文献回顾 | 第16-38页 |
1. 胶质细胞瘤对烷化剂替莫唑胺耐受的机制 | 第16-27页 |
2. 癌基因 DEC1 参与替莫唑胺耐受的机制分析 | 第27-38页 |
1 材料 | 第38-41页 |
1.1 病人及标本 | 第38-39页 |
1.2 主要试剂 | 第39-40页 |
1.3 相关实验设备 | 第40-41页 |
2 方法 | 第41-45页 |
2.1 免疫组织化学染色及评分方法 | 第41-42页 |
2.2 TdT 介导 dUTP 缺口末端标记法(TUNEL) | 第42页 |
2.3 蛋白免疫印迹 | 第42页 |
2.4 统计学分析 | 第42页 |
2.5 实时定量 PCR | 第42-43页 |
2.5.1 胶质细胞瘤组织总 RNA 的提取 | 第42页 |
2.5.2 反转录 | 第42-43页 |
2.5.3 聚合酶链(PCR)反应 | 第43页 |
2.6 基于 GatewayTM系统 Dec1 慢病毒表达载体 pLenti6.3/V5-Dec1 的构建 | 第43-45页 |
2.6.1 Dec1 引物设计 | 第43页 |
2.6.2 目的基因的获取 | 第43-44页 |
2.6.3 入门克隆及目的克隆的构建 | 第44页 |
2.6.4 重组质粒 pLenti6.3/V5-Dec1 病毒包装、稳定转染及稳转细胞系的鉴定 | 第44-45页 |
2.7 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第45页 |
2.8 裸鼠成瘤实验 | 第45页 |
2.9 免疫组化及 TUNEL 检测移植瘤增殖和凋亡 | 第45页 |
3 结果 | 第45-67页 |
3.1 Dec1 的表达与胶质细胞瘤患者临床病理资料间的关系 | 第45-48页 |
3.2 Dec1 的表达与胶质细胞瘤患者预后的关系 | 第48-53页 |
3.3 Dec1 高表达在高级别胶质细胞瘤中提示替莫唑胺化疗耐受 | 第53-54页 |
3.4 Dec1 的表达与接受 TMZ 化疗的复发性 GBM 患者肿瘤细胞凋亡间的关系 | 第54-55页 |
3.5 Dec1 的表达情况与原发性胶质细胞瘤肿瘤细胞增殖之间的关系 | 第55-57页 |
3.6 目的基因 Dec1 全长的获得及入门克隆 pENTRTM3C-Dec1 的构建 | 第57页 |
3.7 基于 GatewayTM 系统重组目的载体 pLenti6.3/V5-Dec1 的构建与鉴定 | 第57-59页 |
3.8 重组慢病毒表达载体的包装及稳转细胞株的构建与鉴定 | 第59-61页 |
3.9 体外检测 Dec1 表达情况对替莫唑胺诱导的肿瘤细胞凋亡的影响 | 第61页 |
3.10 在体检测 Dec1 表达情况对替莫唑胺诱导的肿瘤细胞凋亡的影响 | 第61-67页 |
4 讨论 | 第67-71页 |
小结 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-85页 |
附录 | 第85-88页 |
个人简历和研究成果 | 第88-89页 |
致谢 | 第89-90页 |