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丙型肝炎病毒的检测及基因分型新方法

摘要第5-6页
Abstract第6页
目录第7-10页
第1章 绪论第10-24页
    1.1 丙型肝炎的现状第10-11页
    1.2 丙型肝炎的常规检测方式第11-14页
        1.2.1 实时荧光定量 PCR第11-13页
        1.2.2 酶联免疫法第13-14页
    1.3 分子信标的性质及其应用第14-20页
        1.3.1 分子信标的基本原理与特点第14-15页
        1.3.2 一些非常规的分子信标介绍第15页
        1.3.3 分子信标的应用第15-16页
        1.3.4 一些放大分子信标信号的方法第16-19页
        1.3.5 本文关于 MB 检测 HCV 的设想第19-20页
    1.4 金纳米颗粒的性质及其应用第20-24页
        1.4.1 金纳米颗粒的性质与特点第20页
        1.4.2 金纳米颗粒在生物及医学方面的应用第20-22页
        1.4.3 利用金纳米颗粒针对 HCV RNA 的简单检测方法第22-23页
        1.4.4 本文拟采用金颗粒检测 JFH1 RNA 的实验第23-24页
第2章 分子信标与 DSN 对 HCV RNA 的超灵敏检测第24-40页
    2.1 前言第24-25页
    2.2 实验试剂与仪器第25-26页
    2.3 实验方法第26-30页
        2.3.1 JFH1 RNA 的体外转录第26-27页
        2.3.2 JFH1 标准 RNA 与分子信标的杂交第27页
        2.3.3 huh7.5 细胞系的培养、感染以及 RNA 提取第27-28页
        2.3.4 血清 RNA 的提取第28页
        2.3.5 RNA 的琼脂糖凝胶电泳第28页
        2.3.6 小片段靶点 RNA 与分子信标的杂交第28-29页
        2.3.7 血清样品的 ELISA 检测第29页
        2.3.8 在 DSN 的辅助下以分子信标检测 RNA第29-30页
        2.3.9 细胞 RNA 的样品的 PCR 检测第30页
    2.4 实验结果与讨论第30-39页
        2.4.1 分子信标与 JFH1 RNA 的杂交反应第30-32页
        2.4.2 DSN 对分子信标信号放大的可行性探究第32页
        2.4.3 DSN 与分子信标检测 RNA 时的条件优化第32-34页
        2.4.4 DSN 对分子信标检测 RNA 放大效率的检测第34-35页
        2.4.5 DSN 与分子信标对 JFH1 RNA 在较低浓度的检测第35-36页
        2.4.6 DSN 与分子信标对 huh7.5 阳性细胞中 HCV RNA 的检测第36-38页
        2.4.7 DSN 与分子信标对血清样品中 HCV RNA 的检测第38-39页
    2.5 本章小结第39-40页
第3章 利用分子信标针对 HCV 的基因分型第40-47页
    3.1 引言第40页
    3.2 实验试剂及仪器第40-41页
    3.3 实验方法第41页
        3.3.1 逆转录与普通 PCR第41页
        3.3.2 琼脂糖凝胶电泳第41页
        3.3.3 分子信标与 PCR 产物的杂交反应第41页
    3.4 实验结果第41-46页
        3.4.1 分子信标与 PCR 产物杂交的可行性探究第41-42页
        3.4.2 分子信标与 PCR 产物杂交的条件优化第42-44页
        3.4.3 分子信标分别检测 H77S 与 JFH1 PCR 产物第44-46页
    3.5 本章小结第46-47页
第4章 利用金纳米颗粒对 JFH1 RNA 的直接检测第47-53页
    4.1 引言第47页
    4.2 实验试剂与仪器第47-48页
    4.3 实验方法第48-49页
        4.3.1 金纳米颗粒检测体系的建立第48页
        4.3.2 在此检测体系中 JFH1 RNA 与引物的杂交第48页
        4.3.3 反应结束后金颗粒体系的吸光度测定第48-49页
    4.4 实验结果第49-52页
        4.4.1 金纳米颗粒检测 JFH1 RNA 的可行性研究第49页
        4.4.2 金纳米颗粒检测 JFH1 RNA 实验的条件优化第49-50页
        4.4.3 金纳米颗粒对 JFH1 RNA 的检测第50-51页
        4.4.4 在复杂体系中金纳米颗粒对 JFH1 RNA 的检测第51-52页
    4.5 本章小结第52-53页
结论与展望第53-55页
参考文献第55-60页
附录 攻读学位期间参与项目及发表论文第60-61页
致谢第61页

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