摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
目录 | 第7-10页 |
第1章 绪论 | 第10-24页 |
1.1 丙型肝炎的现状 | 第10-11页 |
1.2 丙型肝炎的常规检测方式 | 第11-14页 |
1.2.1 实时荧光定量 PCR | 第11-13页 |
1.2.2 酶联免疫法 | 第13-14页 |
1.3 分子信标的性质及其应用 | 第14-20页 |
1.3.1 分子信标的基本原理与特点 | 第14-15页 |
1.3.2 一些非常规的分子信标介绍 | 第15页 |
1.3.3 分子信标的应用 | 第15-16页 |
1.3.4 一些放大分子信标信号的方法 | 第16-19页 |
1.3.5 本文关于 MB 检测 HCV 的设想 | 第19-20页 |
1.4 金纳米颗粒的性质及其应用 | 第20-24页 |
1.4.1 金纳米颗粒的性质与特点 | 第20页 |
1.4.2 金纳米颗粒在生物及医学方面的应用 | 第20-22页 |
1.4.3 利用金纳米颗粒针对 HCV RNA 的简单检测方法 | 第22-23页 |
1.4.4 本文拟采用金颗粒检测 JFH1 RNA 的实验 | 第23-24页 |
第2章 分子信标与 DSN 对 HCV RNA 的超灵敏检测 | 第24-40页 |
2.1 前言 | 第24-25页 |
2.2 实验试剂与仪器 | 第25-26页 |
2.3 实验方法 | 第26-30页 |
2.3.1 JFH1 RNA 的体外转录 | 第26-27页 |
2.3.2 JFH1 标准 RNA 与分子信标的杂交 | 第27页 |
2.3.3 huh7.5 细胞系的培养、感染以及 RNA 提取 | 第27-28页 |
2.3.4 血清 RNA 的提取 | 第28页 |
2.3.5 RNA 的琼脂糖凝胶电泳 | 第28页 |
2.3.6 小片段靶点 RNA 与分子信标的杂交 | 第28-29页 |
2.3.7 血清样品的 ELISA 检测 | 第29页 |
2.3.8 在 DSN 的辅助下以分子信标检测 RNA | 第29-30页 |
2.3.9 细胞 RNA 的样品的 PCR 检测 | 第30页 |
2.4 实验结果与讨论 | 第30-39页 |
2.4.1 分子信标与 JFH1 RNA 的杂交反应 | 第30-32页 |
2.4.2 DSN 对分子信标信号放大的可行性探究 | 第32页 |
2.4.3 DSN 与分子信标检测 RNA 时的条件优化 | 第32-34页 |
2.4.4 DSN 对分子信标检测 RNA 放大效率的检测 | 第34-35页 |
2.4.5 DSN 与分子信标对 JFH1 RNA 在较低浓度的检测 | 第35-36页 |
2.4.6 DSN 与分子信标对 huh7.5 阳性细胞中 HCV RNA 的检测 | 第36-38页 |
2.4.7 DSN 与分子信标对血清样品中 HCV RNA 的检测 | 第38-39页 |
2.5 本章小结 | 第39-40页 |
第3章 利用分子信标针对 HCV 的基因分型 | 第40-47页 |
3.1 引言 | 第40页 |
3.2 实验试剂及仪器 | 第40-41页 |
3.3 实验方法 | 第41页 |
3.3.1 逆转录与普通 PCR | 第41页 |
3.3.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第41页 |
3.3.3 分子信标与 PCR 产物的杂交反应 | 第41页 |
3.4 实验结果 | 第41-46页 |
3.4.1 分子信标与 PCR 产物杂交的可行性探究 | 第41-42页 |
3.4.2 分子信标与 PCR 产物杂交的条件优化 | 第42-44页 |
3.4.3 分子信标分别检测 H77S 与 JFH1 PCR 产物 | 第44-46页 |
3.5 本章小结 | 第46-47页 |
第4章 利用金纳米颗粒对 JFH1 RNA 的直接检测 | 第47-53页 |
4.1 引言 | 第47页 |
4.2 实验试剂与仪器 | 第47-48页 |
4.3 实验方法 | 第48-49页 |
4.3.1 金纳米颗粒检测体系的建立 | 第48页 |
4.3.2 在此检测体系中 JFH1 RNA 与引物的杂交 | 第48页 |
4.3.3 反应结束后金颗粒体系的吸光度测定 | 第48-49页 |
4.4 实验结果 | 第49-52页 |
4.4.1 金纳米颗粒检测 JFH1 RNA 的可行性研究 | 第49页 |
4.4.2 金纳米颗粒检测 JFH1 RNA 实验的条件优化 | 第49-50页 |
4.4.3 金纳米颗粒对 JFH1 RNA 的检测 | 第50-51页 |
4.4.4 在复杂体系中金纳米颗粒对 JFH1 RNA 的检测 | 第51-52页 |
4.5 本章小结 | 第52-53页 |
结论与展望 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
附录 攻读学位期间参与项目及发表论文 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |