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南阳牛BoLA-DRA基因克隆、序列分析及表达

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-12页
文献综述第12-25页
 第一章 MHC 研究进展第12-25页
   ·MHC 概述第12-18页
     ·MHC 的发现和命名第12页
     ·MHC 的基本结构第12-13页
     ·MHC 的功能第13-15页
     ·MHC 的基因产物MHC 分子第15-17页
     ·MHC 分子的遗传特性第17-18页
     ·MHC 与疾病相关的机制第18页
   ·BoLA 基因的研究进展第18-23页
     ·BoLA 基因的结构及分布第19-20页
     ·BoLA 基因的特点第20-21页
     ·BoLA 基因与经济性状的关系第21-22页
     ·BoLA 基因的分型方法第22-23页
   ·本研究的目的和意义第23-25页
试验研究第25-49页
 第二章 南阳牛 BoLA-DRA 基因的克隆及在大肠杆菌中的表达第25-40页
   ·材料第25-26页
     ·牛组织样品来源第25页
     ·菌株和载体第25页
     ·主要工具酶和试剂盒第25页
     ·引物设计第25-26页
   ·方法第26-31页
     ·总RNA 的提取及检测第26页
     ·BoLA-DRA 基因的RT-PCR第26-28页
     ·BoLA-DRA 基因开放阅读框的克隆及测序第28页
     ·原核表达载体的构建及酶切鉴定第28-30页
     ·重组质粒的诱导表达第30页
     ·Western blot 分析第30-31页
   ·结果第31-38页
     ·总RNA 提取的完整性检测第31-32页
     ·BoLA-DRA 基因的PT-PCR 鉴定第32页
     ·T 载体重组子的PCR 鉴定第32-33页
     ·T 载体重组子的酶切鉴定第33-34页
     ·BoLA-DRA 基因基因序列测定结果第34-35页
     ·表达质粒pGEX-4T-DRA 的鉴定第35-36页
     ·BoLA-DRA 基因的诱导表达第36-37页
     ·Western blot 分析结果第37-38页
   ·讨论第38页
   ·小结第38-40页
 第三章 BoLA-DRA 基因转染牛成纤维细胞及检测第40-49页
   ·材料第40页
     ·载体、菌株及组织样品第40页
     ·工具酶和试剂盒第40页
     ·引物第40页
   ·方法第40-44页
     ·真核表达载体pEGFP-C1-DRA 的构建第40-41页
     ·真核表达载体pEGFP-C1-DRA 的鉴定第41页
     ·靶细胞的制备第41-42页
     ·细胞活率的检测第42页
     ·细胞抗性筛选试验第42-43页
     ·脂质体介导转染牛成纤维细胞第43-44页
   ·结果第44-47页
     ·表达载体的鉴定第44-45页
     ·牛成纤维细胞的生长情况第45-46页
     ·牛成纤维细胞的活率检测第46页
     ·转染牛成纤维细胞的G 418 抗性筛选结果第46页
     ·转染牛成纤维细胞的单克隆挑选第46-47页
     ·成纤维细胞稳定克隆株的RT-PCR 鉴定第47页
   ·讨论第47-48页
   ·小结第48-49页
结论第49-50页
参考文献第50-57页
附录第57-60页
缩略词第60-61页
致谢第61-62页
作者简介第62页

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