摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-12页 |
文献综述 | 第12-25页 |
第一章 MHC 研究进展 | 第12-25页 |
·MHC 概述 | 第12-18页 |
·MHC 的发现和命名 | 第12页 |
·MHC 的基本结构 | 第12-13页 |
·MHC 的功能 | 第13-15页 |
·MHC 的基因产物MHC 分子 | 第15-17页 |
·MHC 分子的遗传特性 | 第17-18页 |
·MHC 与疾病相关的机制 | 第18页 |
·BoLA 基因的研究进展 | 第18-23页 |
·BoLA 基因的结构及分布 | 第19-20页 |
·BoLA 基因的特点 | 第20-21页 |
·BoLA 基因与经济性状的关系 | 第21-22页 |
·BoLA 基因的分型方法 | 第22-23页 |
·本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
试验研究 | 第25-49页 |
第二章 南阳牛 BoLA-DRA 基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 | 第25-40页 |
·材料 | 第25-26页 |
·牛组织样品来源 | 第25页 |
·菌株和载体 | 第25页 |
·主要工具酶和试剂盒 | 第25页 |
·引物设计 | 第25-26页 |
·方法 | 第26-31页 |
·总RNA 的提取及检测 | 第26页 |
·BoLA-DRA 基因的RT-PCR | 第26-28页 |
·BoLA-DRA 基因开放阅读框的克隆及测序 | 第28页 |
·原核表达载体的构建及酶切鉴定 | 第28-30页 |
·重组质粒的诱导表达 | 第30页 |
·Western blot 分析 | 第30-31页 |
·结果 | 第31-38页 |
·总RNA 提取的完整性检测 | 第31-32页 |
·BoLA-DRA 基因的PT-PCR 鉴定 | 第32页 |
·T 载体重组子的PCR 鉴定 | 第32-33页 |
·T 载体重组子的酶切鉴定 | 第33-34页 |
·BoLA-DRA 基因基因序列测定结果 | 第34-35页 |
·表达质粒pGEX-4T-DRA 的鉴定 | 第35-36页 |
·BoLA-DRA 基因的诱导表达 | 第36-37页 |
·Western blot 分析结果 | 第37-38页 |
·讨论 | 第38页 |
·小结 | 第38-40页 |
第三章 BoLA-DRA 基因转染牛成纤维细胞及检测 | 第40-49页 |
·材料 | 第40页 |
·载体、菌株及组织样品 | 第40页 |
·工具酶和试剂盒 | 第40页 |
·引物 | 第40页 |
·方法 | 第40-44页 |
·真核表达载体pEGFP-C1-DRA 的构建 | 第40-41页 |
·真核表达载体pEGFP-C1-DRA 的鉴定 | 第41页 |
·靶细胞的制备 | 第41-42页 |
·细胞活率的检测 | 第42页 |
·细胞抗性筛选试验 | 第42-43页 |
·脂质体介导转染牛成纤维细胞 | 第43-44页 |
·结果 | 第44-47页 |
·表达载体的鉴定 | 第44-45页 |
·牛成纤维细胞的生长情况 | 第45-46页 |
·牛成纤维细胞的活率检测 | 第46页 |
·转染牛成纤维细胞的G 418 抗性筛选结果 | 第46页 |
·转染牛成纤维细胞的单克隆挑选 | 第46-47页 |
·成纤维细胞稳定克隆株的RT-PCR 鉴定 | 第47页 |
·讨论 | 第47-48页 |
·小结 | 第48-49页 |
结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-57页 |
附录 | 第57-60页 |
缩略词 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
作者简介 | 第62页 |