摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
主要缩略词 | 第12-13页 |
1 引言 | 第13-16页 |
2 实验材料 | 第16-20页 |
2.1 研究对象 | 第16-17页 |
2.1.1 纳入标准 | 第16页 |
2.1.2 排除标准 | 第16页 |
2.1.3 眼科检查 | 第16-17页 |
2.1.4 样本采集及处理 | 第17页 |
2.2 主要仪器与试剂 | 第17-18页 |
2.2.1 眼科检查主要仪器及试剂 | 第17-18页 |
2.2.2 实验仪器 | 第18页 |
2.2.3 主要试剂 | 第18页 |
2.3 主要溶液的配制 | 第18-20页 |
2.3.1 10×PBS 缓冲液(1000ml) | 第18-19页 |
2.3.2 1×PBS 缓冲液(1000ml) | 第19页 |
2.3.3 PBST 漂洗液(500ml) | 第19页 |
2.3.4 封闭液(100ml) | 第19页 |
2.3.5 BSA 溶液(1mg/ml) | 第19页 |
2.3.6 AQP4 抗原(1mg/ml) | 第19-20页 |
3 实验方法 | 第20-27页 |
3.1 双抗体夹心法测抗原方法的建立 | 第20-23页 |
3.1.1 双抗体夹心ELISA的原理 | 第20页 |
3.1.2 检测AQP4抗原的双抗体夹心法步骤 | 第20-21页 |
3.1.3 双抗体夹心ELISA各组分最适浓度优化 | 第21-22页 |
3.1.4 双抗体夹心ELISA最佳反应时间和温度的优化 | 第22-23页 |
3.1.5 双抗体夹心ELISA法的质量评价 | 第23页 |
3.2 反向竞争法测玻璃体内AQP4抗体的方法建立 | 第23-26页 |
3.2.1 竞争法测抗体的原理 | 第23页 |
3.2.2 竞争法测玻璃体内AQP4抗体的步骤 | 第23-24页 |
3.2.3 竞争法ELISA实验条件的优化 | 第24-25页 |
3.2.4 竞争法ELISA方法性能的评价 | 第25-26页 |
3.3 两种ELISA检测方法在临床样本中的应用 | 第26页 |
3.4 统计学分析 | 第26-27页 |
4. 结果 | 第27-40页 |
4.1 双抗体夹心法检测AQP4抗原最佳实验条件的确定 | 第27-33页 |
4.1.1 最适包被抗体浓度的确定 | 第27页 |
4.1.2 夹心一抗的最佳工作浓度筛选结果 | 第27-28页 |
4.1.3 酶标抗体最佳工作浓度选择 | 第28-29页 |
4.1.4 最佳封闭温度和时间的确定 | 第29-30页 |
4.1.5 夹心一抗最佳反应温度和时间的确定 | 第30-31页 |
4.1.6 酶标抗体最适作用温度和时间的确定 | 第31页 |
4.1.7 最佳显色温度和时间的确定 | 第31-32页 |
4.1.8 标准曲线 | 第32页 |
4.1.9 重复性结果 | 第32-33页 |
4.2 竞争法测AQP4抗体实验条件优化结果 | 第33-38页 |
4.2.1 包被抗体和酶标抗体最佳使用浓度的确定 | 第33-34页 |
4.2.2 最佳封闭时间和封闭温度的确定 | 第34-35页 |
4.2.3 夹心一抗最佳浓度的确定 | 第35页 |
4.2.4 最佳孵育时间和温度的选择 | 第35-36页 |
4.2.5 最佳显色时间和显色温度的选择 | 第36页 |
4.2.6 标准曲线 | 第36-37页 |
4.2.7 重复性 | 第37-38页 |
4.3 两种方法的临床应用结果 | 第38-40页 |
5 讨论 | 第40-44页 |
5.1 AQP4的功能及调节机制 | 第40页 |
5.2 酶联免疫吸附试验 | 第40-41页 |
5.3 糖尿病性视网膜病变 | 第41-42页 |
5.4 ELISA检测方法的建立及应用 | 第42-44页 |
6 结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-48页 |
综述 | 第48-67页 |
参考文献 | 第62-67页 |
个人简历 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |