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人玻璃体中AQP4的ELISA方法建立及在糖尿病视网膜病变中的初步应用

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
主要缩略词第12-13页
1 引言第13-16页
2 实验材料第16-20页
    2.1 研究对象第16-17页
        2.1.1 纳入标准第16页
        2.1.2 排除标准第16页
        2.1.3 眼科检查第16-17页
        2.1.4 样本采集及处理第17页
    2.2 主要仪器与试剂第17-18页
        2.2.1 眼科检查主要仪器及试剂第17-18页
        2.2.2 实验仪器第18页
        2.2.3 主要试剂第18页
    2.3 主要溶液的配制第18-20页
        2.3.1 10×PBS 缓冲液(1000ml)第18-19页
        2.3.2 1×PBS 缓冲液(1000ml)第19页
        2.3.3 PBST 漂洗液(500ml)第19页
        2.3.4 封闭液(100ml)第19页
        2.3.5 BSA 溶液(1mg/ml)第19页
        2.3.6 AQP4 抗原(1mg/ml)第19-20页
3 实验方法第20-27页
    3.1 双抗体夹心法测抗原方法的建立第20-23页
        3.1.1 双抗体夹心ELISA的原理第20页
        3.1.2 检测AQP4抗原的双抗体夹心法步骤第20-21页
        3.1.3 双抗体夹心ELISA各组分最适浓度优化第21-22页
        3.1.4 双抗体夹心ELISA最佳反应时间和温度的优化第22-23页
        3.1.5 双抗体夹心ELISA法的质量评价第23页
    3.2 反向竞争法测玻璃体内AQP4抗体的方法建立第23-26页
        3.2.1 竞争法测抗体的原理第23页
        3.2.2 竞争法测玻璃体内AQP4抗体的步骤第23-24页
        3.2.3 竞争法ELISA实验条件的优化第24-25页
        3.2.4 竞争法ELISA方法性能的评价第25-26页
    3.3 两种ELISA检测方法在临床样本中的应用第26页
    3.4 统计学分析第26-27页
4. 结果第27-40页
    4.1 双抗体夹心法检测AQP4抗原最佳实验条件的确定第27-33页
        4.1.1 最适包被抗体浓度的确定第27页
        4.1.2 夹心一抗的最佳工作浓度筛选结果第27-28页
        4.1.3 酶标抗体最佳工作浓度选择第28-29页
        4.1.4 最佳封闭温度和时间的确定第29-30页
        4.1.5 夹心一抗最佳反应温度和时间的确定第30-31页
        4.1.6 酶标抗体最适作用温度和时间的确定第31页
        4.1.7 最佳显色温度和时间的确定第31-32页
        4.1.8 标准曲线第32页
        4.1.9 重复性结果第32-33页
    4.2 竞争法测AQP4抗体实验条件优化结果第33-38页
        4.2.1 包被抗体和酶标抗体最佳使用浓度的确定第33-34页
        4.2.2 最佳封闭时间和封闭温度的确定第34-35页
        4.2.3 夹心一抗最佳浓度的确定第35页
        4.2.4 最佳孵育时间和温度的选择第35-36页
        4.2.5 最佳显色时间和显色温度的选择第36页
        4.2.6 标准曲线第36-37页
        4.2.7 重复性第37-38页
    4.3 两种方法的临床应用结果第38-40页
5 讨论第40-44页
    5.1 AQP4的功能及调节机制第40页
    5.2 酶联免疫吸附试验第40-41页
    5.3 糖尿病性视网膜病变第41-42页
    5.4 ELISA检测方法的建立及应用第42-44页
6 结论第44-45页
参考文献第45-48页
综述第48-67页
    参考文献第62-67页
个人简历第67-68页
致谢第68页

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