摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
第一章 引言 | 第12-21页 |
1.1 水貂简介 | 第12-13页 |
1.1.1 生物学特性 | 第12页 |
1.1.2 经济价值 | 第12-13页 |
1.1.3 我国水貂饲养发展及现状 | 第13页 |
1.2 胰岛素样生长因子1受体的研究背景 | 第13-16页 |
1.2.1 胰岛素样生长因子1受体的结构 | 第13页 |
1.2.2 胰岛素样生长因子1受体的功能 | 第13-14页 |
1.2.3 胰岛素样生长因子1受体与机体生长发育相关性研究 | 第14-16页 |
1.2.4 胰岛素样生长因子1受体在肿瘤方面的研究进展 | 第16页 |
1.3 SNP概述及在动物遗传育种上的应用 | 第16-18页 |
1.3.1 动物遗传图谱的构建 | 第17页 |
1.3.2 SNP在动物基因组研究与基因定位上的应用 | 第17-18页 |
1.3.3 SNP在动物繁殖中的应用 | 第18页 |
1.4 真核表达系统 | 第18-20页 |
1.4.1 毕赤酵母表达体系 | 第18页 |
1.4.2 杆状病毒表达系统 | 第18-19页 |
1.4.3 慢病毒表达系统 | 第19页 |
1.4.4 哺乳动物细胞表达系统 | 第19-20页 |
1.5 研究目的和意义 | 第20-21页 |
第二章 水貂IGF-1R基因真核表达及鉴定 | 第21-30页 |
2.1 试验材料 | 第21-22页 |
2.1.1 试验动物 | 第21页 |
2.1.2 主要仪器 | 第21页 |
2.1.3 主要试剂 | 第21-22页 |
2.2 试验方法 | 第22-26页 |
2.2.1 水貂肝脏RNA的提取 | 第22页 |
2.2.2 RT-PCR反应 | 第22-23页 |
2.2.3 重组克隆载体的构建 | 第23-24页 |
2.2.4 重组表达载体的构建 | 第24-25页 |
2.2.5 重组载体细胞内表达产物鉴定 | 第25-26页 |
2.3 结果与分析 | 第26-28页 |
2.3.1 水貂肝脏总RNA提取 | 第26页 |
2.3.2 RT-PCR扩增结果 | 第26页 |
2.3.3 重组克隆载体菌落PCR鉴定 | 第26-27页 |
2.3.4 重组克隆载体PCR扩增得到目的片段 | 第27页 |
2.3.5 重组表达载体的菌落PCR鉴定 | 第27-28页 |
2.3.6 重组质粒细胞内表达 | 第28页 |
2.4 讨论 | 第28-29页 |
2.5 小结 | 第29-30页 |
第三章 水貂IGF-1R基因SNPS筛查及其与生长性状的关联分析 | 第30-39页 |
3.1 试验材料 | 第30-31页 |
3.1.1 试验动物 | 第30页 |
3.1.2 主要仪器 | 第30页 |
3.1.3 主要试剂 | 第30-31页 |
3.2 试验方法 | 第31-33页 |
3.2.1 样品的采集及水貂基因组的提取 | 第31页 |
3.2.2 水貂基因组DNA的检测 | 第31-32页 |
3.2.3 水貂IGF-1R基因的引物设计、合成及PCR扩增 | 第32页 |
3.2.4 PCR产物胶回收及测序 | 第32-33页 |
3.2.5 SNPs筛查及基因型的判定 | 第33页 |
3.2.6 统计分析 | 第33页 |
3.3 结果与分析 | 第33-37页 |
3.3.1 IGF-1R基因扩增结果 | 第33-34页 |
3.3.2 SNPs位点筛查 | 第34页 |
3.3.3 c.207G>A和c.1782G>A位点SNPs基因型判定 | 第34-35页 |
3.3.4 c.207G>A和c.1782G>A位点的群体遗传结构分析 | 第35-36页 |
3.3.5 c.207G>A和c.1782G>A位点在银蓝水貂和美国短毛黑水貂两群体中的单基因效应分析 | 第36-37页 |
3.3.6 c.207G>A和c.1782G>A位点在银蓝水貂和美国短毛黑水貂两群体中的多基因聚合效应分析 | 第37页 |
3.4 讨论 | 第37-38页 |
3.4.1 IGF-1R基因在群体遗传特性分析 | 第37-38页 |
3.4.2 IGF-1R基因的生物信息学分析 | 第38页 |
3.4.3 IGF-1R基因多态性与水貂生长性状的关联分析 | 第38页 |
3.5 小结 | 第38-39页 |
第四章 全文结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-46页 |
附录 | 第46-51页 |
一、水貂IGF-1R基因CDS序列 | 第46-48页 |
二、载体图谱 | 第48页 |
1、pEASY-Blunt Zero克隆载体结构图 | 第48页 |
2、pEASY-Blunt M3表达载体结构图 | 第48页 |
三、溶液配制 | 第48-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
作者简历 | 第52页 |