摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
英文缩略词表 | 第11-12页 |
引言 | 第12-14页 |
1、实验仪器,试剂与材料 | 第14-18页 |
1.1 实验仪器 | 第14页 |
1.2 主要试剂配制 | 第14-16页 |
1.2.1 抗体 | 第14-15页 |
1.2.2 其它试剂配制 | 第15-16页 |
1.3 所需材料 | 第16-18页 |
2、实验方法 | 第18-26页 |
2.1 制备感受态细胞 | 第18页 |
2.2 细胞培养及药物处理 | 第18页 |
2.3 细胞传代和铺板 | 第18-19页 |
2.4 细胞冻存 | 第19页 |
2.5 细胞转染及感染 | 第19-20页 |
2.5.1 细胞转染 | 第19页 |
2.5.2 细胞感染 | 第19-20页 |
2.6 RNA提取和cDNA的反转录 | 第20-21页 |
2.7 线粒体分离及蛋白抽提 | 第21-22页 |
2.8 活性氧检测 | 第22页 |
2.8.1 收集细胞后装载探针 | 第22页 |
2.8.2 原位装载探针 | 第22页 |
2.9 线粒体膜电位检测 | 第22-23页 |
2.10 Western Blot | 第23-24页 |
2.10.1 细胞蛋白提取 | 第23页 |
2.10.2 配制SDS-PAGE凝胶 | 第23页 |
2.10.3 跑SDS-PAGE凝胶 | 第23-24页 |
2.11 免疫沉淀实验 | 第24页 |
2.12 原核蛋白表达和PULL DOWN实验 | 第24-25页 |
2.13 免疫荧光及共聚焦荧光显微镜观察 | 第25-26页 |
3、实验结果 | 第26-38页 |
3.1 在晶状体上皮细胞中,Hsf4b能抵抗顺铂刺激导致的细胞凋亡 | 第26-27页 |
3.2 在晶状体上皮细胞中,Hsf4b抵抗双氧水处理导致的细胞凋亡,不抑制紫外照射诱导的细胞凋亡 | 第27-29页 |
3.3 ERK1/2 的磷酸化修饰没有参与到Hsf4b在晶状体上皮细胞中的抗凋亡功能 | 第29-30页 |
3.4 Hsf4b敲除后导致晶状体上皮细胞中的线粒体膜电位降低 | 第30页 |
3.5 Hsf4b抑制细胞色素C从线粒体向胞质中的释放 | 第30-32页 |
3.6 Hsf4b敲除后,晶状体上皮细胞中的促凋亡因子Bax定位到线粒体膜 | 第32-33页 |
3.7 在Hsf4b过表达的晶状体上皮细胞中,构建敲除 αB-crystallin的细胞系 | 第33页 |
3.8 Hsf4b的下游基因 αB-crystallin参与Hsf4b的抗凋亡功能 | 第33-35页 |
3.9 αB-crystallin是通过与Bax和细胞色素C相互作用参与抗凋亡 | 第35-36页 |
3.10 Hsf4b通过调控 αB-crystallin的表达参与ROS清除过程 | 第36-38页 |
4、讨 论 | 第38-42页 |
结论 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-48页 |
综述 | 第48-58页 |
参考文献 | 第54-58页 |
致谢 | 第58-60页 |
在校期间获得的奖励和科研成果 | 第60-61页 |