| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词 | 第11-12页 |
| 第一章 综述 | 第12-24页 |
| 1 大豆斑疹病菌致病机理研究进展 | 第12-17页 |
| 1.1 植物病原菌黄单胞菌概述 | 第12页 |
| 1.2 植物病原菌黄单胞菌的主要致病因子 | 第12-16页 |
| 1.2.1 胞外酶 | 第13-14页 |
| 1.2.2 胞外多糖(EPS) | 第14-15页 |
| 1.2.3 hrp基因 | 第15-16页 |
| 1.3 大豆斑疹病菌概述 | 第16页 |
| 1.4 大豆斑疹病害概述 | 第16-17页 |
| 1.5 大豆斑疹病菌致病机理研究进展 | 第17页 |
| 2 植物病原菌碳水化合物代谢研究进展 | 第17-21页 |
| 2.1 植物病原菌黄单胞菌的碳源代谢途径与方式 | 第17-18页 |
| 2.2 碳源代谢在植物病原菌黄单胞菌致病性中的作用 | 第18-21页 |
| 2.2.1 碳水化合物的作用 | 第19页 |
| 2.2.2 碳代谢与毒性因子的关系 | 第19-20页 |
| 2.2.3 碳代谢与hrp系统的关系 | 第20页 |
| 2.2.4 碳代谢与群体感应的关系 | 第20-21页 |
| 3 植物病原菌黄单胞菌DSF介导的群体感应研究进展 | 第21-23页 |
| 3.1 植物病原菌黄单胞菌的群体感应 | 第21-22页 |
| 3.2 植物病原菌黄单胞菌DSF信号的产生与传导机制 | 第22页 |
| 3.3 植物病原菌黄单胞菌全局调控因子Clp的研究进展 | 第22-23页 |
| 4 目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 大豆斑疹病菌磷酸甘油酸激酶(Pgk)在毒性中的功能 | 第24-60页 |
| 1 材料与方法 | 第24-46页 |
| 1.1 试验所涉及的菌株、质粒和引物 | 第24-29页 |
| 1.2 培养基及抗生素 | 第29-32页 |
| 1.2.1 培养基 | 第29-32页 |
| 1.2.2 菌株培养条件及保存 | 第32页 |
| 1.2.3 抗生素及其使用浓度 | 第32页 |
| 1.3 质粒的提取 | 第32-33页 |
| 1.4 DNA凝胶电泳 | 第33页 |
| 1.5 质粒的转化 | 第33-35页 |
| 1.5.1 化学转化感受态细胞的制备 | 第33-34页 |
| 1.5.2 热击转化 | 第34页 |
| 1.5.3 电转化感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
| 1.5.4 电击转化 | 第35页 |
| 1.6 整合突变体的构建 | 第35-38页 |
| 1.6.1 重组载体的构建 | 第35-37页 |
| 1.6.2 突变体构建 | 第37-38页 |
| 1.7 互补菌株的构建 | 第38-39页 |
| 1.8 胞外纤维素酶的检测 | 第39页 |
| 1.9 淀粉酶的检测 | 第39-40页 |
| 1.10 蛋白水解酶的检测 | 第40页 |
| 1.11 内切甘露聚糖酶的检测 | 第40页 |
| 1.12 病原菌接种 | 第40-42页 |
| 1.12.1 大豆喷雾接种法 | 第40-41页 |
| 1.12.2 大豆注射接种法测定生长曲线 | 第41-42页 |
| 1.12.3 烟草注射接菌法 | 第42页 |
| 1.13 培养基中细菌生长能力的测定 | 第42-43页 |
| 1.13.1 固体培养基中细菌生长能力的定性测定 | 第42-43页 |
| 1.13.2 液体培养基中细菌生长能力的定量测定 | 第43页 |
| 1.14 总RNA的提取及qRT-PCR扩增 | 第43-45页 |
| 1.14.1 总RNA的提取 | 第43页 |
| 1.14.2 RNA的纯化 | 第43-44页 |
| 1.14.3 RNA的定性与定量检测 | 第44页 |
| 1.14.4 逆转录反应合成cDNA | 第44-45页 |
| 1.14.5 qRT-PCR | 第45页 |
| 1.15 Xag EPS含量检测 | 第45-46页 |
| 1.15.1 EPS定性测定 | 第45页 |
| 1.15.2 EPS定量测定 | 第45-46页 |
| 1.16 生物膜的检测 | 第46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-58页 |
| 2.1 pgk基因是Xag对大豆具全毒性和生长繁殖所必需的 | 第46-49页 |
| 2.2 pgk是Xag获取碳水化合物所必需的 | 第49-51页 |
| 2.3 碳水化合物能显著诱导pgk基因的转录表达 | 第51-52页 |
| 2.4 pgk影响Xag胞外多糖(EPS)的产生 | 第52-54页 |
| 2.5 pgk对Xag生物膜的形成具有正调控作用 | 第54-55页 |
| 2.6 pgk影响Xag的游动性 | 第55-56页 |
| 2.7 pgk不影响Xag胞外酶活性 | 第56-57页 |
| 2.8 pgk与DSF信号系统和HrpX/HrpG级联调控 | 第57-58页 |
| 2.8.1 pgk受DSF信号系统调控 | 第57-58页 |
| 2.8.2 pgk受HrpX/HrpG级联正调控 | 第58页 |
| 3 讨论与分析 | 第58-60页 |
| 第三章 全局性调控蛋白Clp在大豆斑疹病菌毒性中的功能 | 第60-81页 |
| 1 材料与方法 | 第60-66页 |
| 1.1 试验所涉及的菌株、质粒和引物 | 第60-61页 |
| 1.2 培养基及抗生素 | 第61页 |
| 1.3 质粒的提取 | 第61页 |
| 1.4 DNA凝胶电泳 | 第61页 |
| 1.5 质粒的转化 | 第61-62页 |
| 1.6 整合突变体的构建 | 第62-63页 |
| 1.6.1 重组载体的构建 | 第62-63页 |
| 1.6.2 突变体的构建 | 第63页 |
| 1.7 互补菌株的构建 | 第63-65页 |
| 1.8 胞外纤维素酶的检测 | 第65页 |
| 1.9 淀粉酶的检测 | 第65页 |
| 1.10 蛋白水解酶的检测 | 第65页 |
| 1.11 内切甘露聚糖酶检测 | 第65页 |
| 1.12 病原菌接种 | 第65页 |
| 1.13 培养基中细菌生长能力的测定 | 第65页 |
| 1.14 总RNA的提取及qRT-PCR扩增 | 第65页 |
| 1.15 Xag EPS含量检测 | 第65-66页 |
| 1.16 生物膜的检测 | 第66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-79页 |
| 2.1 clp是Xag在大豆上具全毒性和生长繁殖所必需的 | 第66-68页 |
| 2.2 clp是Xag HR所必需的 | 第68-69页 |
| 2.3 clp是Xag获取碳水化合物所必需的 | 第69-71页 |
| 2.4 碳水化合物对clp基因的转录表达具有显著负调控作用 | 第71页 |
| 2.5 clp影响Xag胞外多糖(EPS)的产生 | 第71-74页 |
| 2.6 clp对Xag生物膜的形成具有正负调控作用 | 第74-75页 |
| 2.7 clp正调控Xag的游动性 | 第75-76页 |
| 2.8 clp是Xag胞外酶活性所必需的 | 第76-78页 |
| 2.8.1 clp对大豆斑疹病菌蛋白水解酶的活性具有正负调控作用 | 第77页 |
| 2.8.2 clp正调控大豆斑疹病菌α-淀粉酶的活性 | 第77页 |
| 2.8.3 clp正调控大豆斑疹病菌纤维素酶的活性 | 第77页 |
| 2.8.4 clp正调控大豆斑疹病菌内切-β-甘露聚糖酶的活性 | 第77-78页 |
| 2.9 clp与DSF信号系统和HrpX/HrpG级联调控 | 第78-79页 |
| 2.9.1 clp受DSF信号系统正调控显著 | 第78页 |
| 2.9.2 clp受HrpX/HrpG级联正调控显著 | 第78-79页 |
| 3 讨论与分析 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第90-92页 |
