摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
引言 | 第11-18页 |
0.1 DHCR24 | 第11-12页 |
0.2 内质网应激与及内质网应激与β胰岛细胞功能的关系 | 第12-13页 |
0.3 氧化应激及氧化应激与内质网应激的关系 | 第13页 |
0.4 腺病毒简介 | 第13-15页 |
0.5 衣霉素 | 第15页 |
0.6 SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第15-16页 |
0.7 TUNEL的原理及应用 | 第16-17页 |
0.8 小鼠胰岛β细胞(MIN6) | 第17页 |
0.9 研究背景意义 | 第17-18页 |
第1章 DHCR24抗内质网应激引起的细胞凋亡的研究 | 第18-28页 |
1.1 实验材料 | 第18页 |
1.2 试剂盒 | 第18页 |
1.3 实验使用仪器 | 第18-19页 |
1.4 实验方法 | 第19-23页 |
1.4.1 MIN6细胞体外传代培养及保种 | 第19-20页 |
1.4.2 对MIN6细胞进行腺病毒转染 | 第20页 |
1.4.3 anti-rabbit active caspase 3免疫荧光染色 | 第20-21页 |
1.4.4 TUNEL方法检测细胞凋亡 | 第21页 |
1.4.5 对细胞进行siRNA转染 | 第21-22页 |
1.4.6 总RNA的提取,RT-PCR | 第22-23页 |
1.5 结果与讨论 | 第23-27页 |
1.5.1 DHCR24保护MIN6免于内质网应激产生的细胞凋亡研究 | 第23-26页 |
1.5.2 运用RNA干扰技术通过下调DHCR24表达研究DHCR24的胰岛细胞保护作用 | 第26-27页 |
1.6 结论 | 第27-28页 |
第2章 DHCR24抗内质网应激引起的胰岛β细胞凋亡的机制研究 | 第28-35页 |
2.1 实验材料 | 第28页 |
2.2 抗体 | 第28-29页 |
2.3 实验使用仪器 | 第29页 |
2.4 实验方法 | 第29-31页 |
2.4.1 制作蛋白标准曲线及测量待测样品浓度 | 第29页 |
2.4.2 Western blot | 第29-31页 |
2.5 结果与讨论 | 第31-34页 |
2.6 结论 | 第34-35页 |
第3章 DHCR24通过清除细胞内的活性氧来实行抗内质网应激引发的细胞凋亡的功能 | 第35-40页 |
3.1 实验材料 | 第35页 |
3.2 实验使用仪器 | 第35页 |
3.3 试剂盒 | 第35-36页 |
3.4 实验方法 | 第36页 |
3.4.1 DCFHDA测定细胞内ROS | 第36页 |
3.4.2 胆固醇含量测定 | 第36页 |
3.5 结果与讨论 | 第36-38页 |
3.5.1 DHCR24催化合成胆固醇功能与其抗内质网应激产生的细胞凋亡的相关性研究 | 第36-37页 |
3.5.2 DHCR24具有的清除活性氧的功能与其抗内质网应激产生的细胞凋亡的相关性研究 | 第37-38页 |
3.6 结论 | 第38-40页 |
第4章 结果与展望 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
攻读学位期间发表的学术论文及参加科研情况 | 第45页 |