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螺旋藻种质与形态重建的分子遗传学研究

致谢第5-6页
中文摘要第6-9页
英文摘要第9页
本研究的创新性第13-17页
第一章 文献综述第17-36页
    1 螺旋藻及其形态学与遗传学的研究进展第17-25页
        1.1 概述第17-18页
        1.2 螺旋藻形态学研究进展第18-20页
        1.3 螺旋藻遗传学及基因工程研究进展第20-25页
            1.3.1 诱变研究第20-22页
            1.3.2 基因克隆和序列分析第22-23页
            1.3.3 内源质粒研究第23-24页
            1.3.4 原生质体制备第24-25页
    2 蓝藻转座子的研究进展第25-30页
        2.1 概述第25-28页
        2.2 蓝藻转座子的研究进展第28-30页
    3 分子遗传学研究有关的方法技术第30-34页
        3.1 标记基因第30-31页
        3.2 DNA分子标记第31-34页
            3.2.1 RFLP标记第32页
            3.2.2 RAPD标记第32-33页
            3.2.3 TRS标记第33页
            3.2.4 AFLP标记第33-34页
            3.2.5 SNPs标记第34页
    4 选题背景及意义第34-36页
第二章 螺旋藻种质形态及RAPD分子标记的研究第36-55页
    1 材料与方法第36-41页
        1.1 材料第36-37页
        1.2 试剂第37页
        1.3 培养条件第37页
        1.4 形态的观察与统计方法第37页
        1.5 DNA提取材料的预处理第37页
        1.6 DNA的提取第37-40页
        1.7 DNA质量检测第40页
        1.8 PCR扩增及反应物的检测第40-41页
        1.9 数据分析方法第41页
    2 结果与讨论第41-54页
        2.1 螺旋藻的形态学研究第41-43页
        2.2 螺旋藻的RAPD分子标记研究第43-54页
            2.2.1 高质量螺旋藻基因组DNA的制备第43-47页
            2.2.2 RAPD分子标记对螺旋藻的分类学研究第47-54页
    3 小结第54-55页
第三章 螺旋藻抗性标记的研究第55-67页
    1 材料与方法第55-56页
        1.1 藻种第55页
        1.2 抗生素的配制第55页
        1.3 培养条件第55-56页
        1.4 生物量的测定第56页
        1.5 相对抑制率及半抑制浓度的计算第56页
    2 结果与讨论第56-66页
        2.1 5种抗生素对10株钝顶螺旋藻生长的影响第56-61页
            2.1.1 氯霉素对10株钝顶螺旋藻生长的影响第56-57页
            2.1.2 青霉素对10株钝顶螺旋藻生长的影响第57-58页
            2.1.3 卡那霉素对10株钝顶螺旋藻生长的影响第58页
            2.1.4 洁霉素对10株钝顶螺旋藻生长的影响第58-60页
            2.1.5 链霉素对10株钝顶螺旋藻生长的影响第60-61页
        2.2 10株钝顶螺旋藻对5种抗生素的抗性研究第61-65页
        2.3 螺旋藻的抗性标记差异与种质形态变异的关系分析第65-66页
    3 小结第66-67页
第四章 养殖环境下变直螺旋藻回复正常形态的发现及形态变异相关蛋白的研究第67-79页
    1 材料与方法第67-70页
        1.1 藻种第67页
        1.2 蛋白质电泳所用生化试剂第67-68页
        1.3 方法第68-70页
            1.3.1 不同形态藻丝体的毛细管显微分离法第68页
            1.3.2 培养条件及形态的观察与统计方法第68页
            1.3.3 生长速率及完整细胞吸收光谱的测定第68页
            1.3.4 蛋白质提取第68-69页
            1.3.5 凝胶制备第69-70页
            1.3.6 点样及电泳第70页
            1.3.7 染色和脱色第70页
    2 结果与讨论第70-78页
        2.1 养殖环境下变直藻丝体回复正常形态的发现及生物学特性比较第70-72页
        2.2 Sp-M、Sp-M(L)与Sp-M(L-H)藻丝体的蛋白电泳分析第72-78页
            2.2.1 蛋白质梯度电泳方法的建立第72-75页
            2.2.2 蛋白质提取方法的建立第75-76页
            2.2.3 Sp-M、Sp-M(L)、Sp-M(L-H)的形态相关蛋白分析第76-78页
    3 小结第78-79页
第五章 转座子调控螺旋藻形态重建的分子遗传学研究第79-101页
    1 材料与方法第79-84页
        1.1 藻种第79页
        1.2 试剂第79页
        1.3 方法第79-84页
            1.3.1 DNA提取、浓度及纯度检测、琼脂糖凝胶电泳第79页
            1.3.2 限制性内切酶酶切第79-80页
            1.3.3 UnevenPCR引物设计合成第80页
            1.3.4 UnevenPCR方法的建立第80-83页
                1.3.4.1 半套式引物有效性的验证第81页
                1.3.4.2 随机引物退火温度梯度扩增第81页
                1.3.4.3 随机引物浓度梯度扩增第81页
                1.3.4.4 半套式引物退火温度梯度扩增第81页
                1.3.4.5 半套式引物浓度梯度扩增第81-82页
                1.3.4.6 半套式引物组合的有效性及随机引物筛选试验第82-83页
            1.3.5 PCR产物回收纯化第83页
            1.3.6 连接第83页
            1.3.7 转化与筛选及质粒DNA的分离及纯化第83页
            1.3.8 检测第83页
            1.3.9 序列测定及分析第83页
            1.3.10 转座子在基因组上的定位第83-84页
    2 结果与讨论第84-99页
        2.1 unevenPCR方法的建立第84-90页
            2.1.1 引物的有效性分析第84页
            2.1.2 退火温度对随机引物及半套式引物扩增结果的影响第84-86页
            2.1.3 浓度对随机引物及半套式引物扩增结果的影响第86-88页
            2.1.4 半套式引物组合对unevenPCR的影响及随机引物筛选第88-90页
        2.2 UnevenPCR产物的克隆及序列分析第90-94页
        2.3 Sp-M(L)及Sp-M(L-H)的unevenPCR扩增及序列分析第94-99页
    3 小结第99-101页
主要参考文献第101-111页

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