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拟南芥叶绿素荧光衰减基因定位克隆与功能初探

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
缩写词(Abbreviation)第8-12页
1 前言第12-24页
    1.1 植物的衰老第12-19页
        1.1.1 植物衰老的概述第12页
        1.1.2 植物叶片的衰老第12-13页
        1.1.3 影响衰老的植物激素第13-15页
        1.1.4 影响衰老的其他内源因素第15-16页
        1.1.5 影响衰老的非生物因素第16页
        1.1.6 衰老叶片中的细胞程序性死亡第16-17页
        1.1.7 衰老叶片细胞内部生理生化的改变第17-18页
        1.1.8 衰老叶片中叶绿素的降解第18-19页
    1.2 光合作用第19-20页
        1.2.1 光反应第19-20页
        1.2.2 暗反应第20页
    1.3 叶绿素荧光第20-24页
        1.3.1 叶绿素荧光的产生第20-21页
        1.3.2 叶绿荧光诱导曲线第21-22页
        1.3.3 叶绿荧光参数的意义第22-24页
2 立题依据第24-26页
3 材料与方法第26-40页
    3.1 常用仪器第26页
    3.2 实验材料、菌株、载体第26-27页
    3.3 实验药品、试剂第27页
    3.4 培养基及溶液的配制第27-29页
        3.4.1 常用培养基的配制第27-28页
        3.4.2 溶液的配制第28-29页
        3.4.3 常用抗生素的配置第29页
    3.5 实验方法第29-40页
        3.5.1 拟南芥的培养第29-30页
        3.5.2 暗处理第30页
        3.5.3 拟南芥杂交第30-31页
        3.5.4 定位克隆第31-33页
        3.5.5 拟南芥DNA的提取第33页
        3.5.6 拟南芥RNA的提取第33-34页
        3.5.7 反转录制备拟南芥cDNA第34页
        3.5.8 目的基因的回收和纯化第34-35页
        3.5.9 构建载体所用引物第35页
        3.5.10 载体构建第35-37页
        3.5.11 大肠杆菌DH5α 感受态的制备第37页
        3.5.12 大肠杆菌感受态的热击转化第37页
        3.5.13 重组菌落与质粒的鉴定第37-38页
        3.5.14 叶绿素含量的测定第38页
        3.5.15 MDA含量的测定第38页
        3.5.16 瞬转拟南芥原生质体第38-40页
4 结果与分析第40-56页
    4.1 突变体的获得第40页
    4.2 突变体的遗传分析第40-42页
        4.2.1 突变基因显隐性的确定第40-41页
        4.2.2 突变表型的分离比第41-42页
    4.3 突变体E61的定位克隆第42-44页
        4.3.1 用于定位克隆的F2代分离群体的构建第42页
        4.3.2 基因定位结果第42-43页
        4.3.4 猜基因结果第43-44页
    4.4 突变体E61的回补结果第44-46页
        4.4.1 突变体E61回补载体E61::pCAMBIA1300-COM的构建第44-45页
        4.4.2 突变体E61回补转基因植株的获得及筛选第45页
        4.4.3 突变体E61回补植株的表型分析第45-46页
    4.5 突变基因AT1G73470的超表达结果第46-47页
    4.6 突变基因AT1G73470的组织定位结果第47-48页
        4.6.1 组织定位载体E61::pCAMBIA1391的构建第47页
        4.6.2 GUS染色结果第47-48页
    4.7 突变基因AT1G73470的亚细胞定位第48-50页
        4.7.1 E61::pHBT-GFP-NOS载体的构建和瞬转第48-49页
        4.7.2 目的基因的瞬转与线粒体共染色第49-50页
    4.8 ABA处理下的萌发率差异第50页
    4.9 突变体E61的发育表型第50-51页
    4.10 叶绿素含量的测定第51-52页
    4.11 可溶性糖的测定第52-53页
    4.12 MDA含量的测定第53页
    4.13 暗处理第53-56页
5 讨论第56-58页
结论第58-60页
参考文献第60-65页
致谢第65-66页

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