摘要 | 第5-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第12-18页 |
1.1 胃癌的简介 | 第12-13页 |
1.1.1 胃癌与幽门螺杆菌 | 第12-13页 |
1.1.2 胃癌与遗传性、家族聚集性 | 第13页 |
1.1.3 胃癌与饮食、不良的生活习惯 | 第13页 |
1.2 EMT与肿瘤 | 第13-15页 |
1.2.1 EMT的概念 | 第13-14页 |
1.2.2 EMT的发生机制 | 第14-15页 |
1.2.3 EMT与肿瘤侵袭和转移 | 第15页 |
1.3 MIG-6与肿瘤 | 第15-18页 |
1.3.1 MIG-6在组织中的表达情况 | 第15-16页 |
1.3.2 MIG-6的调控机制 | 第16页 |
1.3.3 MIG-6与疾病 | 第16-18页 |
第二章 实验研究的目的、方法、实验设计方案和意义 | 第18-22页 |
2.1 实验研究目的 | 第18页 |
2.2 实验研究方法 | 第18-19页 |
2.3 实验设计方案 | 第19-21页 |
2.4 研究意义 | 第21-22页 |
第三章 MIG-6在人胃癌组织中的表达检测及数据库分析 | 第22-33页 |
3.1 材料和试剂 | 第22-24页 |
3.1.1 病例来源及标本采集 | 第22页 |
3.1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
3.1.3 主要溶液配制 | 第23页 |
3.1.4 主要仪器、耗材 | 第23-24页 |
3.2 方法 | 第24-27页 |
3.2.1 组织中总RNA提取 | 第24页 |
3.2.2 RNA逆转录 | 第24-25页 |
3.2.3 荧光定量PCR | 第25-26页 |
3.2.4 免疫组织化学 | 第26-27页 |
3.2.5 统计分析 | 第27页 |
3.3 结果 | 第27-31页 |
3.3.1 MIG-6在人胃癌组织中的表达 | 第27-28页 |
3.3.2 MIG-6 mRNA在胃癌组织以及癌旁组织中的表达情况 | 第28-29页 |
3.3.3 ONCOMINE数据库分析MIG-6 mRNA在临床组织标本的表达情况 | 第29-30页 |
3.3.4 MIG-6的表达情况与胃癌患者预后的关系 | 第30-31页 |
3.4 讨论 | 第31-33页 |
第四章 RNAi抑制MIG-6表达后对胃癌细胞迁移和增殖的影响 | 第33-47页 |
4.1 材料与仪器 | 第33-36页 |
4.1.1 细胞 | 第33页 |
4.1.2 主要试剂 | 第33-34页 |
4.1.3 主要溶液配制 | 第34-35页 |
4.1.4 主要仪器、耗材 | 第35-36页 |
4.2 方法 | 第36-39页 |
4.2.1 细胞培养 | 第36页 |
4.2.2 Western blot | 第36-37页 |
4.2.3 MIG-6 siRNA瞬时转染 | 第37-38页 |
4.2.4 Transwell迁移实验 | 第38-39页 |
4.2.5 平板克隆形成实验 | 第39页 |
4.2.6 CCK-8细胞增殖实验 | 第39页 |
4.2.7 统计分析 | 第39页 |
4.3 结果 | 第39-44页 |
4.3.1 MIG-6在细胞水平的表达情况 | 第39-40页 |
4.3.2 MIG-6干扰效果验证 | 第40-41页 |
4.3.3 MIG-6干扰抑制SGC-7901细胞的增殖 | 第41-42页 |
4.3.4 MIG-6干扰抑制SGC-7901细胞的迁移能力 | 第42-43页 |
4.3.5 MIG-6干扰抑制EMT的发生 | 第43-44页 |
4.4 讨论 | 第44-47页 |
第五章 体外上调MIG-6表达后对胃癌细胞迁移和增殖的影响 | 第47-59页 |
5.1 材料与仪器 | 第47-48页 |
5.1.1 主要试剂 | 第47页 |
5.1.2 主要溶液配制 | 第47-48页 |
5.1.3 主要仪器 | 第48页 |
5.2 方法 | 第48-53页 |
5.2.1 细胞培养实验步骤同第四章4.2.1 | 第48页 |
5.2.2 细胞中总RNA提取操作步骤同第三章组织RNA的提取3.2.1 | 第48页 |
5.2.3 RNA逆转录实验步骤同第三章3.2.2 | 第48页 |
5.2.4 构建MIG-6过表达质粒 | 第48-53页 |
5.2.4.2 目的片段胶回收 | 第49-50页 |
5.2.4.3 T-A 连接 | 第50页 |
5.2.4.4 感受态细胞制备 | 第50-53页 |
5.2.5 过表达质粒pcDNA-MIG-6瞬时转染 | 第53页 |
5.2.6 Western blot实验步骤同第四章4.2.2 | 第53页 |
5.2.7 Transwell迁移实验实验步骤同第四章4.2.4 | 第53页 |
5.2.8 平板克隆形成实验实验步骤同第四章4.2.5 | 第53页 |
5.2.9 CCK-8细胞增殖实验实验步骤同第四章4.2.6 | 第53页 |
5.2.10 统计分析 | 第53页 |
5.3 结果 | 第53-57页 |
5.3.1 MIG-6过表达效果验证 | 第53-54页 |
5.3.2 MIG-6过表达促进BGC-823细胞的增殖 | 第54-55页 |
5.3.3 MIG-6过表达促进BGC-823细胞的迁移能力 | 第55-56页 |
5.3.4 MIG-6过表达促进EMT的发生 | 第56-57页 |
5.4 讨论 | 第57-59页 |
结论与展望 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-67页 |
致谢 | 第67页 |