摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
1 绪论 | 第9-18页 |
1.1 被子植物开花的研究 | 第9页 |
1.2 MADS-box基因与花的发育 | 第9-14页 |
1.2.1 MADS-box基因简介 | 第9-10页 |
1.2.2 花发育“ABC”模型及其发展 | 第10-11页 |
1.2.3 花发育“四因子”模型 | 第11-12页 |
1.2.4 A类MADS-box基因在花器官决定中的作用 | 第12-13页 |
1.2.5 SVP-like基因研究进展 | 第13-14页 |
1.3 大蒜简介 | 第14-15页 |
1.4 研究目的和意义 | 第15-16页 |
1.5 研究方法与技术路线 | 第16-18页 |
1.5.1 研究方法 | 第16-17页 |
1.5.2 技术路线 | 第17-18页 |
2 大蒜AsFUL基因的克隆 | 第18-31页 |
2.1 试验材料 | 第18页 |
2.2 试验试剂 | 第18-19页 |
2.2.1 RNA提取试剂 | 第18页 |
2.2.2 RACE法克隆所用试剂 | 第18-19页 |
2.3 试验方法 | 第19-25页 |
2.3.1 大蒜花蕾总RNA的提取 | 第19页 |
2.3.2 RACE反应引物的设计 | 第19-20页 |
2.3.3 大蒜AsFUL基因3'-RACE片段的扩增 | 第20-21页 |
2.3.4 大蒜AsFUL基因5'-RACE片段的扩增 | 第21-25页 |
2.4 结果与分析 | 第25-29页 |
2.4.1 大蒜花蕾总RNA提取结果 | 第25-26页 |
2.4.2 AsFUL基因3'-RACE PCR扩增结果 | 第26页 |
2.4.3 AsFUL基因3'-RACE阳性克隆菌液PCR检测结果 | 第26-27页 |
2.4.4 AsFUL基因3'-RACE测序结果 | 第27页 |
2.4.5 AsFUL基因5'-RACE扩增结果 | 第27-28页 |
2.4.6 AsFUL基因5'-RACE测序结果 | 第28页 |
2.4.7 AsFUL基因全长cDNA序列拼接及验证 | 第28-29页 |
2.5 讨论 | 第29-30页 |
2.6 本章小结 | 第30-31页 |
3 大蒜AsFUL基因的序列特征与系统进化分析 | 第31-41页 |
3.1 大蒜AsFUL基因的序列特征分析 | 第31-34页 |
3.1.1 AsFUL基因的序列分析与结构预测 | 第31页 |
3.1.2 AsFUL基因的序列分析与结构预测结果 | 第31-34页 |
3.2 大蒜AsFUL基因的同源性分析和系统进化分析 | 第34-39页 |
3.2.1 AsFUL基因的氨基酸序列同源性分析 | 第35页 |
3.2.2 AsFUL基因的氨基酸序列同源性分析结果 | 第35-37页 |
3.2.3 AsFUL基因的系统进化分析 | 第37-38页 |
3.2.4 AsFUL基因的系统进化分析结果 | 第38-39页 |
3.3 讨论 | 第39-40页 |
3.4 本章小结 | 第40-41页 |
4 大蒜AsFUL、AsSVP基因的表达分析 | 第41-48页 |
4.1 试验材料 | 第41页 |
4.2 实验试剂和仪器 | 第41页 |
4.3 实验方法 4.3.1 半定量RT-PCR分析基因表达特性 | 第41-44页 |
4.3.1 半定量RT-PCR分析基因表达特性 | 第41-43页 |
4.3.2 实时定量PCR分析基因表达特性 | 第43-44页 |
4.4 试验结果与分析 | 第44-46页 |
4.4.1 大蒜AsFUL、AsSVP基因半定量PCR结果与分析 | 第44-45页 |
4.4.2 大蒜AsFUL、AsSVP基因实时定量PCR结果与分析 | 第45-46页 |
4.5 讨论 | 第46-47页 |
4.6 本章小结 | 第47-48页 |
5 大蒜AsFUL与AsSVP基因的功能验证 | 第48-70页 |
5.1 试验材料 | 第48页 |
5.2 试验试剂 | 第48-50页 |
5.3 试验方法 | 第50-58页 |
5.3.1 大蒜AsSFUL和AsSVP基因超表达载体的构建 | 第50-54页 |
5.3.2 农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第54-55页 |
5.3.3 转基因植株的分子鉴定 | 第55-58页 |
5.4 试验结果与分析 | 第58-67页 |
5.4.1 目的基因的两次PCR结果 | 第58-59页 |
5.4.2 BP反应菌液PCR结果 | 第59页 |
5.4.3 LR反应菌液PCR结果 | 第59-60页 |
5.4.4 农杆菌菌液PCR结果 | 第60页 |
5.4.5 转基因植株的抗生素筛选结果 | 第60-61页 |
5.4.6 转基因植株的PCR检测结果 | 第61-62页 |
5.4.7 转基因植株的RT-PCR检测结果 | 第62页 |
5.4.8 转基因植株表型变化的观察结果 | 第62-67页 |
5.5 讨论 | 第67-69页 |
5.6 本章小结 | 第69-70页 |
结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-79页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第79-80页 |
致谢 | 第80-81页 |