| 中文摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9页 |
| 1 前言 | 第10-22页 |
| 1.1 甘蔗花叶病 | 第10-12页 |
| 1.1.1 甘蔗花叶病的危害 | 第10-11页 |
| 1.1.2 高粱花叶病毒 | 第11页 |
| 1.1.3 甘蔗花叶病的传播及防治 | 第11-12页 |
| 1.2 马铃薯Y病毒属病毒的研究背景和现状 | 第12-15页 |
| 1.2.1 马铃薯Y病毒的结构 | 第12-13页 |
| 1.2.2 马铃薯Y病毒属病毒的功能 | 第13-14页 |
| 1.2.3 马铃薯Y病毒病的传播 | 第14-15页 |
| 1.3 植物抗花叶病病毒基因工程研究 | 第15-17页 |
| 1.4 HC-Pro基因的研究进展 | 第17-20页 |
| 1.4.1 HC-Pro的来源 | 第17页 |
| 1.4.2 HC-Pro的结构及蚜传机制 | 第17-20页 |
| 1.5 本项目研究的意义、研究方法与技术路线 | 第20-22页 |
| 1.5.1 研究意义 | 第20-21页 |
| 1.5.2 研究内容与技术路线 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-33页 |
| 2.1 供试材料 | 第22页 |
| 2.1.1 甘蔗材料 | 第22页 |
| 2.1.2 试剂和工具酶 | 第22页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第22页 |
| 2.2 分子生物学研究方法 | 第22-26页 |
| 2.2.1 引物 | 第22-23页 |
| 2.2.2 质粒pZMLR14少量提取及纯化 | 第23页 |
| 2.2.3 HC-Pro基因片段PCR扩增及回收 | 第23-24页 |
| 2.2.4 重组载体构建 | 第24-26页 |
| 2.3 基因枪(PDS-1000He)轰击转化甘蔗 | 第26-28页 |
| 2.4 转HC-Pro基因植株的分子鉴定 | 第28-33页 |
| 2.4.1 氯酚红显色法鉴定pmi基因 | 第28页 |
| 2.4.2 转HC-Pro基因植株PCR分析鉴定 | 第28-29页 |
| 2.4.3 PCR检测阳性植株叶片总RNA RT-PCR分析鉴定 | 第29-32页 |
| 2.4.4 RT-PCR检测阳性植株基因组DNA的点杂交分析鉴定 | 第32-33页 |
| 3 结果和分析 | 第33-45页 |
| 3.1 HC-Pro蛋白的生物信息学分析 | 第33-36页 |
| 3.2 含SrMV-HcPro基因的植物表达载体构建策略 | 第36-38页 |
| 3.3 转基因植株的分子验证 | 第38-43页 |
| 3.4 转基因植株的遗传转化率 | 第43-44页 |
| 3.5 转基因植株的发病情况调查 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| 4.1 基因枪介导的共转化效率 | 第45-46页 |
| 4.2 pmi/甘露糖筛选体系的选择 | 第46-47页 |
| 4.3 HC-Pro基因的致病作用 | 第47-48页 |
| 5 小结 | 第48-50页 |
| 5.1 主要结论 | 第48-49页 |
| 5.2 本研究的主要创新点 | 第49页 |
| 5.3 进一步的研究工作计划及展望 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-58页 |
| 附录 | 第58-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
