| 缩略语表 | 第8-12页 |
| 中文摘要 | 第12-16页 |
| Abstract | 第16-20页 |
| 前言 | 第21-23页 |
| 文献回顾 | 第23-74页 |
| 第一部分 肺癌与受体型酪氨酸激酶 | 第23-44页 |
| 1. 表皮生长因子受体 | 第24-30页 |
| 1.1 ErbB 受体家族和非小细胞肺癌的细胞 | 第25-26页 |
| 1.2 ErbB3 活化 PI3K/Akt 信号通路 | 第26-27页 |
| 1.3 HER2 的扩增与细胞对 EGFR TKI应答相关 | 第27-28页 |
| 1.4 EGFR、HER2、ErbB 间的信号联系 | 第28-30页 |
| 2.其它受体型酪氨酸激酶与肿瘤分子靶向治疗 | 第30-37页 |
| 2.1. MET | 第30-32页 |
| 2.2 FGFR 与肿瘤 | 第32-34页 |
| 2.3. IGF-IR | 第34-36页 |
| 2.4 新靶向治疗药物的前景 | 第36-37页 |
| 3.肺癌靶向治疗耐药机制及肺癌靶向治疗新策略 | 第37-44页 |
| 3.1 肺癌耐药简介 | 第37-38页 |
| 3.2 继发性突变 | 第38-42页 |
| 3.3. 治疗耐药方法 | 第42-44页 |
| 第二部分 泛素和泛素介导的蛋白质的降解 | 第44-67页 |
| 1. 蛋白质降解途径的概述 | 第44-45页 |
| 2. 泛素—蛋白酶体途径 | 第45-59页 |
| 2.1 泛素的结构 | 第46-50页 |
| 2.2 泛素激活酶 | 第50页 |
| 2.3 泛素结合酶 | 第50页 |
| 2.4 泛素连接酶（E3） | 第50-51页 |
| 2.5 蛋白酶体 | 第51-52页 |
| 2.6 泛素化底物选择 | 第52-56页 |
| 2.7 SUMO：探讨最亲近的类泛素 | 第56-57页 |
| 2.8 泛素化位点研究现状 | 第57-58页 |
| 2.9 支架提供的特异性 | 第58页 |
| 2.10 底物选择模型 | 第58-59页 |
| 3. 泛素-蛋白酶体途径与肿瘤的关系 | 第59-67页 |
| 3.1 概述 | 第59-61页 |
| 3.2 Protacs 对肿瘤促进蛋白的靶向降解 | 第61-67页 |
| 第三部分 泛素化与肺癌骨转移 | 第67-74页 |
| 1、肺癌骨转移机制概述 | 第67-68页 |
| 2. 成骨性骨转移 | 第68页 |
| 3. 破骨性转移 | 第68-70页 |
| 4. 破骨细胞分化/活化及其调控的分子机制研究 | 第70-71页 |
| 5. 目前针对破骨细胞及RANKL-RANK-OPG系统的治疗现状 | 第71-72页 |
| 6. 泛素化介导的蛋白降解策略的应用研究 | 第72-74页 |
| 实验一 | 第74-93页 |
| 1. 实验材料 | 第74-75页 |
| 1.1 细胞系 | 第74页 |
| 1.2 菌种与质粒 | 第74页 |
| 1.3 主要试剂 | 第74-75页 |
| 1.4 主要仪器 | 第75页 |
| 2. 实验方法 | 第75-85页 |
| 2.1 引物设计 | 第75-77页 |
| 2.2 SPC-A1 和 RAW264.7 细胞 RNA 提取和反转录 | 第77-78页 |
| 2.3 重组载体的构建 | 第78-85页 |
| 3. 实验结果 | 第85-90页 |
| 3.1 目的基因的扩增 | 第85页 |
| 3.2 SH2、TRIP、PTB 与 U-box、RING 的重组 PCR 反应 | 第85-87页 |
| 3.3 重组泛素连接酶与真核表达质粒的连接 | 第87-90页 |
| 3.4 重组泛素连接酶的表达 | 第90页 |
| 4. 讨论 | 第90-93页 |
| 实验二 重组泛素连接酶促进 EGFR 的降解和下调 | 第93-104页 |
| 1. 实验材料 | 第93-94页 |
| 1.1 细胞系 | 第93页 |
| 1.2 主要试剂 | 第93-94页 |
| 1.3 主要仪器 | 第94页 |
| 2. 实验方法 | 第94-98页 |
| 2.1 肿瘤细胞筛查 | 第94-95页 |
| 2.2 重组泛素连接酶转染肿瘤细胞 | 第95-96页 |
| 2.3 重组泛素连接酶与 EGFR 质粒共转染 HEK-293T 细胞 | 第96页 |
| 2.4 蛋白提取与免疫印迹 | 第96-97页 |
| 2.5 EGFR 的实时定量 PCR | 第97-98页 |
| 3. 实验结果 | 第98-102页 |
| 3.1 细胞系筛选 | 第98-100页 |
| 3.2 EGFR 的免疫印迹 | 第100-101页 |
| 3.3 EGFR 的实时定量 PCR | 第101-102页 |
| 4. 讨论 | 第102-104页 |
| 实验三 重组泛素连接酶对肺癌细胞恶性表型的影响 | 第104-113页 |
| 1.实验材料 | 第104-105页 |
| 1.1 细胞系 | 第104页 |
| 1.2 主要试剂 | 第104-105页 |
| 1.3 主要仪器 | 第105页 |
| 2. 实验方法 | 第105-107页 |
| 2.1 MTT 比色实验测定细胞增殖 | 第105页 |
| 2.2 平板克隆形成实验 | 第105-106页 |
| 2.3 Transwell 实验 | 第106页 |
| 2.4 流式检测细胞凋亡情况 | 第106-107页 |
| 2.5 流式检测细胞周期变化 | 第107页 |
| 3. 实验结果 | 第107-112页 |
| 3.1 MTT 比色实验 | 第107-108页 |
| 3.2 克隆形成实验 | 第108-109页 |
| 3.3 Transwell 实验 | 第109-110页 |
| 3.4 流式检测细胞凋亡情况 | 第110-111页 |
| 3.5 流式检测细胞周期变化 | 第111-112页 |
| 4. 讨论 | 第112-113页 |
| 实验四 重组泛素连接酶降解 TRAF 家族蛋白机制初步研究 | 第113-120页 |
| 1. 实验材料 | 第113-114页 |
| 1.1 细胞系 | 第113页 |
| 1.2 主要试剂 | 第113-114页 |
| 1.3 主要仪器 | 第114页 |
| 2. 实验方法 | 第114-116页 |
| 2.1 重组泛素连接酶与 TRAF2、6 质粒共转染 HEK-293T 细胞 | 第114-115页 |
| 2.2 蛋白提取与免疫印迹 | 第115页 |
| 2.3 检测蛋白间相互作用 | 第115-116页 |
| 3. 实验结果 | 第116-119页 |
| 3.1 TRAF2 和 TRAF6 的免疫印迹 | 第116页 |
| 3.2 重组泛素连接酶与 TRAF6 的相互结合 | 第116-119页 |
| 4. 讨论 | 第119-120页 |
| 小结 | 第120-121页 |
| 参考文献 | 第121-134页 |
| 个人简历和研究成果 | 第134-136页 |
| 致谢 | 第136页 |
