摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 文献综述 | 第9-23页 |
1.1 小菜蛾抗药性的形成与发展 | 第9-10页 |
1.2 小菜蛾抗药性机理研究进展 | 第10-13页 |
1.2.1 小菜蛾体内解毒酶的研究概况 | 第11-12页 |
1.2.2 小菜蛾抗药性分子机制研究概况 | 第12-13页 |
1.3 蛋白质组学技术及其新进展 | 第13-16页 |
1.3.1 蛋白质组学的主要分类 | 第13-14页 |
1.3.2 蛋白质组学主要技术 | 第14-16页 |
1.4 蛋白质组学在昆虫蛋白研究中的应用 | 第16-18页 |
1.4.1 蛋白质组学在昆虫生理生化方面的应用 | 第16-17页 |
1.4.2 蛋白质组学在昆虫免疫方面的应用 | 第17页 |
1.4.3 蛋白质组学在昆虫抗药性的应用 | 第17-18页 |
1.5 泛素化蛋白酶体途径研究概况 | 第18-20页 |
1.5.1 泛素-蛋白酶体途径的组成成分 | 第18-20页 |
1.5.2 泛素-蛋白酶体途径有关的生理功能 | 第20页 |
1.6 昆虫泛素相关基因的研究进展 | 第20-22页 |
1.6.1 模式昆虫泛素相关基因的研究概况 | 第21页 |
1.6.2 非模式昆虫泛素相关基因的研究概况 | 第21-22页 |
1.6.3 昆虫病毒泛素基因的研究概况 | 第22页 |
1.7 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
第二章 小菜蛾幼虫泛素化蛋白质组的LC MS/MS分析 | 第23-40页 |
2.1 材料 | 第23页 |
2.1.1 样品采集 | 第23页 |
2.2 试剂和仪器 | 第23-24页 |
2.2.1 主要试剂 | 第23页 |
2.2.2 仪器 | 第23-24页 |
2.3 实验方法与操作 | 第24-28页 |
2.3.1 总蛋白的提取 | 第24页 |
2.3.2 GENERAR Bradford法蛋白定量试剂盒 | 第24-25页 |
2.3.3 泛素化蛋白质的富集 | 第25页 |
2.3.4 泛素化蛋白质定量 | 第25-26页 |
2.3.5 泛素化蛋白的一维SDS-PAGE分离和染色 | 第26页 |
2.3.6 酶解 | 第26-27页 |
2.3.6.1 脱色 | 第26页 |
2.3.6.2 脱色还原与烷基化 | 第26页 |
2.3.6.3 酶解 | 第26-27页 |
2.3.6.4 萃取 | 第27页 |
2.3.7 基于5600 Triple TOF的LC-ESI-MS/MS分析 | 第27页 |
2.3.8 数据分析 | 第27-28页 |
2.4 实验结果 | 第28-36页 |
2.4.1 富集到的泛素化蛋白SDS-PAGE分离 | 第28-29页 |
2.4.2 小菜蛾总蛋白的鉴定 | 第29页 |
2.4.3 小菜蛾泛素化鉴定结果统计 | 第29-30页 |
2.4.4 小菜蛾蛋白相对定量结果 | 第30页 |
2.4.5 小菜蛾泛素化蛋白定量结果 | 第30-31页 |
2.4.6 不同样本蛋白重复性序列分析 | 第31-32页 |
2.4.7 小菜蛾溴氰菊酯抗性品系(DR)泛素化蛋白结果 | 第32-33页 |
2.4.8 小菜蛾敏感品系泛素化蛋白鉴定结果 | 第33-34页 |
2.4.9 小菜蛾敏感抗性的上调蛋白和下调蛋白 | 第34-36页 |
2.5 讨论 | 第36-40页 |
2.5.1 泛素化差异蛋白样品的筛选 | 第36页 |
2.5.2 显著上调蛋白 | 第36-38页 |
2.5.3 显著下调蛋白 | 第38-40页 |
第三章 小菜蛾幼虫泛素化蛋白质组的功能分析 | 第40-50页 |
3.1 材料 | 第40页 |
3.2 方法 | 第40-42页 |
3.2.1 泛素化蛋白质提取 | 第40页 |
3.2.2 泛素化蛋白质定量 | 第40页 |
3.2.3 免疫印迹分析 | 第40-42页 |
3.2.3.1 SDS-PAGE | 第40-42页 |
3.2.4 泛素化蛋白功能分析 | 第42页 |
3.3 结果 | 第42-48页 |
3.3.1 小菜蛾全蛋白的泛素化水平对比 | 第42-43页 |
3.3.2 小菜蛾两种品系泛素化蛋白western blotting | 第43页 |
3.3.3 小菜蛾幼虫抗性品系泛素化蛋白质组功能注释 | 第43-45页 |
3.3.4 小菜蛾幼虫敏感品系泛素化蛋白质功能注释 | 第45-47页 |
3.3.5 小菜蛾泛素蛋白的COG注释 | 第47-48页 |
3.4 讨论 | 第48-50页 |
第四章 总结与展望 | 第50-52页 |
4.1 总结 | 第50页 |
4.2 进一步研究设想 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-61页 |
发表论文情况 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |