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小菜蛾幼虫泛素化蛋白质组LC MS/MS的比较与分析

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第一章 文献综述第9-23页
    1.1 小菜蛾抗药性的形成与发展第9-10页
    1.2 小菜蛾抗药性机理研究进展第10-13页
        1.2.1 小菜蛾体内解毒酶的研究概况第11-12页
        1.2.2 小菜蛾抗药性分子机制研究概况第12-13页
    1.3 蛋白质组学技术及其新进展第13-16页
        1.3.1 蛋白质组学的主要分类第13-14页
        1.3.2 蛋白质组学主要技术第14-16页
    1.4 蛋白质组学在昆虫蛋白研究中的应用第16-18页
        1.4.1 蛋白质组学在昆虫生理生化方面的应用第16-17页
        1.4.2 蛋白质组学在昆虫免疫方面的应用第17页
        1.4.3 蛋白质组学在昆虫抗药性的应用第17-18页
    1.5 泛素化蛋白酶体途径研究概况第18-20页
        1.5.1 泛素-蛋白酶体途径的组成成分第18-20页
        1.5.2 泛素-蛋白酶体途径有关的生理功能第20页
    1.6 昆虫泛素相关基因的研究进展第20-22页
        1.6.1 模式昆虫泛素相关基因的研究概况第21页
        1.6.2 非模式昆虫泛素相关基因的研究概况第21-22页
        1.6.3 昆虫病毒泛素基因的研究概况第22页
    1.7 本研究的目的和意义第22-23页
第二章 小菜蛾幼虫泛素化蛋白质组的LC MS/MS分析第23-40页
    2.1 材料第23页
        2.1.1 样品采集第23页
    2.2 试剂和仪器第23-24页
        2.2.1 主要试剂第23页
        2.2.2 仪器第23-24页
    2.3 实验方法与操作第24-28页
        2.3.1 总蛋白的提取第24页
        2.3.2 GENERAR Bradford法蛋白定量试剂盒第24-25页
        2.3.3 泛素化蛋白质的富集第25页
        2.3.4 泛素化蛋白质定量第25-26页
        2.3.5 泛素化蛋白的一维SDS-PAGE分离和染色第26页
        2.3.6 酶解第26-27页
            2.3.6.1 脱色第26页
            2.3.6.2 脱色还原与烷基化第26页
            2.3.6.3 酶解第26-27页
            2.3.6.4 萃取第27页
        2.3.7 基于5600 Triple TOF的LC-ESI-MS/MS分析第27页
        2.3.8 数据分析第27-28页
    2.4 实验结果第28-36页
        2.4.1 富集到的泛素化蛋白SDS-PAGE分离第28-29页
        2.4.2 小菜蛾总蛋白的鉴定第29页
        2.4.3 小菜蛾泛素化鉴定结果统计第29-30页
        2.4.4 小菜蛾蛋白相对定量结果第30页
        2.4.5 小菜蛾泛素化蛋白定量结果第30-31页
        2.4.6 不同样本蛋白重复性序列分析第31-32页
        2.4.7 小菜蛾溴氰菊酯抗性品系(DR)泛素化蛋白结果第32-33页
        2.4.8 小菜蛾敏感品系泛素化蛋白鉴定结果第33-34页
        2.4.9 小菜蛾敏感抗性的上调蛋白和下调蛋白第34-36页
    2.5 讨论第36-40页
        2.5.1 泛素化差异蛋白样品的筛选第36页
        2.5.2 显著上调蛋白第36-38页
        2.5.3 显著下调蛋白第38-40页
第三章 小菜蛾幼虫泛素化蛋白质组的功能分析第40-50页
    3.1 材料第40页
    3.2 方法第40-42页
        3.2.1 泛素化蛋白质提取第40页
        3.2.2 泛素化蛋白质定量第40页
        3.2.3 免疫印迹分析第40-42页
            3.2.3.1 SDS-PAGE第40-42页
        3.2.4 泛素化蛋白功能分析第42页
    3.3 结果第42-48页
        3.3.1 小菜蛾全蛋白的泛素化水平对比第42-43页
        3.3.2 小菜蛾两种品系泛素化蛋白western blotting第43页
        3.3.3 小菜蛾幼虫抗性品系泛素化蛋白质组功能注释第43-45页
        3.3.4 小菜蛾幼虫敏感品系泛素化蛋白质功能注释第45-47页
        3.3.5 小菜蛾泛素蛋白的COG注释第47-48页
    3.4 讨论第48-50页
第四章 总结与展望第50-52页
    4.1 总结第50页
    4.2 进一步研究设想第50-52页
参考文献第52-61页
发表论文情况第61-62页
致谢第62页

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