| 中文摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1.1 稻瘟菌概述 | 第13-16页 |
| 1.1.1 稻瘟病与稻瘟菌 | 第13页 |
| 1.1.2 稻瘟病的侵染过程 | 第13-15页 |
| 1.1.3 稻瘟病的防治 | 第15页 |
| 1.1.4 稻瘟菌致病功能基因的研究方法 | 第15-16页 |
| 1.2 tRNA 剪接内切酶的研究进展 | 第16-20页 |
| 1.2.1 tRNA 基因的结构与功能 | 第16-18页 |
| 1.2.2 成熟 tRNA 的剪接机制 | 第18-20页 |
| 1.2.3 真核生物 tRNA 剪接酶 | 第20页 |
| 1.3 农杆菌介导的真菌转化（ATMT） | 第20-22页 |
| 1.3.1 根癌农杆菌和 Ti 质粒 | 第20-21页 |
| 1.3.2 农杆菌转化技术的机理与特点 | 第21-22页 |
| 1.4 本研究的目的意义 | 第22-23页 |
| 第二章 材料和方法 | 第23-50页 |
| 2.1 材料 | 第23-29页 |
| 2.1.1 实验所用菌株 | 第23页 |
| 2.1.2 实验所用载体 | 第23页 |
| 2.1.3 实验所用仪器 | 第23页 |
| 2.1.4 实验所用培养基 | 第23-28页 |
| 2.1.4.1 细菌培养所需培养基 | 第23-24页 |
| 2.1.4.2 稻瘟菌培养所需培养基 | 第24-25页 |
| 2.1.4.3 农杆菌介导的转化所需培养基基 | 第25-27页 |
| 2.1.4.4 原生质体转化所需培养基 | 第27-28页 |
| 2.1.5 实验所需引物 | 第28-29页 |
| 2.2 方法 | 第29-50页 |
| 2.2.1 目的基因序列的获得 | 第29页 |
| 2.2.2 核酸的提取方法 | 第29-33页 |
| 2.2.2.1 稻瘟菌基因组 DNA 的提取 | 第29-31页 |
| 2.2.2.2 稻瘟菌总 RNA 提取和 cDNA 合成 | 第31-32页 |
| 2.2.2.3 质粒 DNA 的提取 | 第32-33页 |
| 2.2.3 分子生物学基础实验 | 第33-37页 |
| 2.2.3.1 PCR 反应 | 第33-36页 |
| 2.2.3.2 PCR 产物的检测与纯化 | 第36页 |
| 2.2.3.3 连接反应 | 第36页 |
| 2.2.3.4 酶切反应 | 第36-37页 |
| 2.2.4 感受态细胞的制备与转化 | 第37-40页 |
| 2.2.4.1 大肠杆菌 DH5α的制备与转化 | 第37-39页 |
| 2.2.4.2 农杆菌 AGL-1 的制备与转化 | 第39-40页 |
| 2.2.5 农杆菌介导的遗传转化 | 第40-42页 |
| 2.2.5.1 农杆菌 AGL-1 的预培养 | 第40页 |
| 2.2.5.2 分生孢子的培养 | 第40-41页 |
| 2.2.5.3 分生孢子与农杆菌的共培养 | 第41页 |
| 2.2.5.4 转化子的筛选 | 第41页 |
| 2.2.5.5 单孢纯化 | 第41-42页 |
| 2.2.6 原生质体的制备及转化 | 第42-44页 |
| 2.2.6.1 原生质体的制备 | 第42-43页 |
| 2.2.6.2 原生质体的转化 | 第43-44页 |
| 2.2.7 载体的构建 | 第44-47页 |
| 2.2.7.1 MoTSEN54 基因敲除载体的构建 | 第44-46页 |
| 2.2.7.2 MoTSEN54 基因互补载体的构建 | 第46-47页 |
| 2.2.8 生物学性状分析 | 第47-50页 |
| 2.2.8.1 产孢量的观察实验 | 第47页 |
| 2.2.8.2 附着胞的观察实验 | 第47页 |
| 2.2.8.3 洋葱表皮的侵染实验 | 第47-48页 |
| 2.2.8.4 过氧化氢的敏感性实验 | 第48页 |
| 2.2.8.5 细胞壁完整性分析 | 第48-49页 |
| 2.2.8.6 渗透压敏感性分析 | 第49页 |
| 2.2.8.7 大麦的接菌实验 | 第49-50页 |
| 第三章 结果与分析 | 第50-67页 |
| 3.1 MoTSEN54 基因的获得与分析 | 第50-52页 |
| 3.2 MoTSEN54 基因的敲除 | 第52-54页 |
| 3.3 MoTSEN54 基因的互补 | 第54-56页 |
| 3.4 MoTSEN54 基因的敲除 qRT-PCR 的验证 | 第56-57页 |
| 3.5 生物学性状分析 | 第57-62页 |
| 3.5.1 各菌株的色素观察 | 第57-58页 |
| 3.5.2 各菌株的孢子形态观察 | 第58-61页 |
| 3.5.3 各菌株附着胞形成能力的观察 | 第61-62页 |
| 3.5.4 各菌株侵染洋葱的观察 | 第62页 |
| 3.6 MoTSEN54 基因的敏感性分析 | 第62-65页 |
| 3.6.1 MoTSEN54 基因对 H2O2的敏感性 | 第62-64页 |
| 3.6.2 MoTSEN54 基因对刚果红的敏感性 | 第64-65页 |
| 3.6.3 MoTSEN54 基因对氯化钠的敏感性 | 第65页 |
| 3.7 MoTSEN54 基因的致病性观察 | 第65-67页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 作者简介 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
