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利用原生质体研究拟南芥隐花色素CRY2的二聚化机制及其抑制子(BICs)的功能

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
英文缩写词表第8-17页
第1章 绪论第17-35页
    1.1 隐花色素的介绍第17-18页
        1.1.1 植物光受体第17页
        1.1.2 隐花色素的历史背景第17-18页
    1.2 隐花色素的结构与功能第18-24页
        1.2.1 PHR 结构域第19-20页
        1.2.2 CCE 结构域第20-21页
        1.2.3 隐花色素的功能第21-24页
    1.3 隐花色素的光激活与光生物化学第24-25页
        1.3.1 光激活的机制第24页
        1.3.2 蓝光依赖的隐花色素的磷酸化第24-25页
        1.3.3 蓝光依赖的 CRY2 蛋白降解第25页
    1.4 隐花色素的相互作用蛋白及隐花色素的信号转导途径第25-30页
        1.4.1 隐花色素的互作蛋白第26-28页
        1.4.2 隐花色素的信号转导途径第28-30页
    1.5 隐花色素光小体形成的研究进展第30-33页
    1.6 立体依据第33-35页
第2章 BIC1、BIC2 与植物蓝光受体 CRY2 的相互作用第35-53页
    2.1 实验材料第35-40页
        2.1.1 植物材料第35页
        2.1.2 实验菌株第35页
        2.1.3 载体第35-36页
        2.1.4 主要仪器第36页
        2.1.5 主要试剂及培养基配制第36-40页
    2.2 实验方法第40-48页
        2.2.1 拟南芥培养第40页
        2.2.2 拟南芥总 RNA 的提取及 cDNA 的合成第40-42页
        2.2.3 PCR 引物设计及扩增第42-43页
        2.2.4 PCR 产物回收纯化第43-44页
        2.2.5 目的片段连接表达载体第44页
        2.2.6 大肠杆菌(E.coil)感受态的制备第44页
        2.2.7 大肠杆菌转化第44-45页
        2.2.8 菌液 PCR 鉴定及重组质粒的提取第45-46页
        2.2.9 酵母转化第46-47页
        2.2.10 Western Blot第47页
        2.2.11 免疫共沉淀(Co-IP)第47-48页
    2.3 结果与分析第48-52页
        2.3.1 拟南芥总 RNA 提取的质量检测第48页
        2.3.2 载体构建结果分析第48-49页
        2.3.3 BIC1、BIC2 在酵母中与 CRY2 的相互作用第49-50页
        2.3.4 转基因拟南芥阳性植株的 Western 鉴定结果第50-51页
        2.3.5 BIC1、BIC2 在植物体内与 CRY2 的相互作用第51-52页
    2.4 讨论第52页
    2.5 小结第52-53页
第3章 CRY2 在植物体内形成蓝光依赖的同源二聚体且 BIC1、BIC2抑制 CRY2 蓝光依赖的二聚化第53-65页
    3.1 实验材料第53-56页
        3.1.1 植物材料第53页
        3.1.2 实验菌株第53页
        3.1.3 载体第53-54页
        3.1.4 主要仪器第54页
        3.1.5 主要试剂及培养基配制第54-56页
    3.2 实验方法第56-59页
        3.2.1 拟南芥培养第56页
        3.2.2 拟南芥总 RNA 的提取及 cDNA 的合成第56页
        3.2.3 PCR 引物设计及扩增第56页
        3.2.4 PCR 产物回收纯化第56页
        3.2.5 目的片段连接表达载体第56-57页
        3.2.6 大肠杆菌(E.coil)感受态的制备第57页
        3.2.7 大肠杆菌转化第57页
        3.2.8 菌液 PCR 鉴定及重组质粒的提取第57页
        3.2.9 Western Blot第57-58页
        3.2.10 原生质体的提取和转化第58-59页
    3.3 结果与分析第59-63页
        3.3.1 拟南芥总 RNA 提取的质量检测第59页
        3.3.2 载体构建结果分析第59-60页
        3.3.3 转基因拟南芥阳性植株的 Western 鉴定结果第60页
        3.3.4 原生质体提取及转化效率检测第60页
        3.3.5 CRY2 在植物体内形成同源二聚体且 CRY2 同源二聚体的形成具有蓝光依赖性第60-62页
        3.3.6 BIC1、BIC2 能够抑制植物体内 CRY2 蓝光依赖的同源二聚体的形成第62-63页
    3.4 讨论第63-64页
    3.5 小结第64-65页
第4章 BIC1、BIC2 影响植物体内 CRY2 蓝光依赖的光小体形成4.1 实验材料第65-72页
    4.1 实验材料第65-66页
        4.1.1 植物材料第65页
        4.1.2 实验菌株第65页
        4.1.3 载体第65页
        4.1.4 主要仪器第65页
        4.1.5 主要试剂及培养基配制第65-66页
    4.2 实验方法第66-67页
        4.2.1 拟南芥培养第66页
        4.2.2 拟南芥总 RNA 的提取及 cDNA 的合成第66页
        4.2.3 PCR 引物设计及扩增第66页
        4.2.4 PCR 产物回收纯化第66页
        4.2.5 目的片段连接表达载体第66页
        4.2.6 大肠杆菌(E.coil)感受态的制备第66页
        4.2.7 大肠杆菌转化第66页
        4.2.8 菌液 PCR 鉴定及重组质粒的提取第66-67页
        4.2.9 Western Blot第67页
        4.2.10 原生质体的提取和转化第67页
    4.3 结果与分析第67-70页
        4.3.1 拟南芥总 RNA 提取的质量检测第67页
        4.3.2 载体构建结果分析第67-68页
        4.3.3 转基因拟南芥阳性植株的 Western 鉴定结果第68页
        4.3.4 原生质体提取及转化效率检测第68页
        4.3.5 植物体内 CRY2 光小体的形成及变化趋势第68-69页
        4.3.6 BIC1、BIC2 抑制植物体内 CRY2 蓝光依赖的光小体形成第69-70页
    4.4 讨论第70-71页
    4.5 小结第71-72页
第5章 BIC1、BIC2 影响植物蓝光受体 CRY2 与其互作蛋白 CIB1 的相互作用第72-78页
    5.1 实验材料第72页
        5.1.1 植物材料第72页
        5.1.2 实验菌株第72页
        5.1.3 载体第72页
        5.1.4 主要仪器第72页
        5.1.5 主要试剂及培养基配制第72页
    5.2 实验方法第72-74页
        5.2.1 拟南芥培养第72页
        5.2.2 拟南芥总 RNA 的提取及 cDNA 的合成第72页
        5.2.3 PCR 引物设计及扩增第72-73页
        5.2.4 PCR 产物回收纯化第73页
        5.2.5 目的片段连接表达载体第73页
        5.2.6 大肠杆菌(E.coil)感受态的制备第73页
        5.2.7 大肠杆菌转化第73页
        5.2.8 菌液 PCR 鉴定及重组质粒的提取第73页
        5.2.9 Western Blot第73页
        5.2.10 原生质体的提取和转化第73-74页
    5.3 结果与分析第74-77页
        5.3.1 拟南芥总 RNA 提取的质量检测第74页
        5.3.2 载体构建结果分析第74页
        5.3.3 转基因拟南芥阳性植株的 Western 鉴定结果第74页
        5.3.4 原生质体提取及转化效率检测第74页
        5.3.5 BIC1、BIC2 抑制植物体内 CRY2 与其互作蛋白 CIB1 的相互作用第74-77页
    5.4 讨论第77页
    5.5 小结第77-78页
第6章 结论与展望第78-80页
    6.1 实验结论第78页
    6.2 展望第78-80页
参考文献第80-93页
作者简介第93-94页
致谢第94页

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