中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩写词表 | 第8-17页 |
第1章 绪论 | 第17-35页 |
1.1 隐花色素的介绍 | 第17-18页 |
1.1.1 植物光受体 | 第17页 |
1.1.2 隐花色素的历史背景 | 第17-18页 |
1.2 隐花色素的结构与功能 | 第18-24页 |
1.2.1 PHR 结构域 | 第19-20页 |
1.2.2 CCE 结构域 | 第20-21页 |
1.2.3 隐花色素的功能 | 第21-24页 |
1.3 隐花色素的光激活与光生物化学 | 第24-25页 |
1.3.1 光激活的机制 | 第24页 |
1.3.2 蓝光依赖的隐花色素的磷酸化 | 第24-25页 |
1.3.3 蓝光依赖的 CRY2 蛋白降解 | 第25页 |
1.4 隐花色素的相互作用蛋白及隐花色素的信号转导途径 | 第25-30页 |
1.4.1 隐花色素的互作蛋白 | 第26-28页 |
1.4.2 隐花色素的信号转导途径 | 第28-30页 |
1.5 隐花色素光小体形成的研究进展 | 第30-33页 |
1.6 立体依据 | 第33-35页 |
第2章 BIC1、BIC2 与植物蓝光受体 CRY2 的相互作用 | 第35-53页 |
2.1 实验材料 | 第35-40页 |
2.1.1 植物材料 | 第35页 |
2.1.2 实验菌株 | 第35页 |
2.1.3 载体 | 第35-36页 |
2.1.4 主要仪器 | 第36页 |
2.1.5 主要试剂及培养基配制 | 第36-40页 |
2.2 实验方法 | 第40-48页 |
2.2.1 拟南芥培养 | 第40页 |
2.2.2 拟南芥总 RNA 的提取及 cDNA 的合成 | 第40-42页 |
2.2.3 PCR 引物设计及扩增 | 第42-43页 |
2.2.4 PCR 产物回收纯化 | 第43-44页 |
2.2.5 目的片段连接表达载体 | 第44页 |
2.2.6 大肠杆菌(E.coil)感受态的制备 | 第44页 |
2.2.7 大肠杆菌转化 | 第44-45页 |
2.2.8 菌液 PCR 鉴定及重组质粒的提取 | 第45-46页 |
2.2.9 酵母转化 | 第46-47页 |
2.2.10 Western Blot | 第47页 |
2.2.11 免疫共沉淀(Co-IP) | 第47-48页 |
2.3 结果与分析 | 第48-52页 |
2.3.1 拟南芥总 RNA 提取的质量检测 | 第48页 |
2.3.2 载体构建结果分析 | 第48-49页 |
2.3.3 BIC1、BIC2 在酵母中与 CRY2 的相互作用 | 第49-50页 |
2.3.4 转基因拟南芥阳性植株的 Western 鉴定结果 | 第50-51页 |
2.3.5 BIC1、BIC2 在植物体内与 CRY2 的相互作用 | 第51-52页 |
2.4 讨论 | 第52页 |
2.5 小结 | 第52-53页 |
第3章 CRY2 在植物体内形成蓝光依赖的同源二聚体且 BIC1、BIC2抑制 CRY2 蓝光依赖的二聚化 | 第53-65页 |
3.1 实验材料 | 第53-56页 |
3.1.1 植物材料 | 第53页 |
3.1.2 实验菌株 | 第53页 |
3.1.3 载体 | 第53-54页 |
3.1.4 主要仪器 | 第54页 |
3.1.5 主要试剂及培养基配制 | 第54-56页 |
3.2 实验方法 | 第56-59页 |
3.2.1 拟南芥培养 | 第56页 |
3.2.2 拟南芥总 RNA 的提取及 cDNA 的合成 | 第56页 |
3.2.3 PCR 引物设计及扩增 | 第56页 |
3.2.4 PCR 产物回收纯化 | 第56页 |
3.2.5 目的片段连接表达载体 | 第56-57页 |
3.2.6 大肠杆菌(E.coil)感受态的制备 | 第57页 |
3.2.7 大肠杆菌转化 | 第57页 |
3.2.8 菌液 PCR 鉴定及重组质粒的提取 | 第57页 |
3.2.9 Western Blot | 第57-58页 |
3.2.10 原生质体的提取和转化 | 第58-59页 |
3.3 结果与分析 | 第59-63页 |
3.3.1 拟南芥总 RNA 提取的质量检测 | 第59页 |
3.3.2 载体构建结果分析 | 第59-60页 |
3.3.3 转基因拟南芥阳性植株的 Western 鉴定结果 | 第60页 |
3.3.4 原生质体提取及转化效率检测 | 第60页 |
3.3.5 CRY2 在植物体内形成同源二聚体且 CRY2 同源二聚体的形成具有蓝光依赖性 | 第60-62页 |
3.3.6 BIC1、BIC2 能够抑制植物体内 CRY2 蓝光依赖的同源二聚体的形成 | 第62-63页 |
3.4 讨论 | 第63-64页 |
3.5 小结 | 第64-65页 |
第4章 BIC1、BIC2 影响植物体内 CRY2 蓝光依赖的光小体形成4.1 实验材料 | 第65-72页 |
4.1 实验材料 | 第65-66页 |
4.1.1 植物材料 | 第65页 |
4.1.2 实验菌株 | 第65页 |
4.1.3 载体 | 第65页 |
4.1.4 主要仪器 | 第65页 |
4.1.5 主要试剂及培养基配制 | 第65-66页 |
4.2 实验方法 | 第66-67页 |
4.2.1 拟南芥培养 | 第66页 |
4.2.2 拟南芥总 RNA 的提取及 cDNA 的合成 | 第66页 |
4.2.3 PCR 引物设计及扩增 | 第66页 |
4.2.4 PCR 产物回收纯化 | 第66页 |
4.2.5 目的片段连接表达载体 | 第66页 |
4.2.6 大肠杆菌(E.coil)感受态的制备 | 第66页 |
4.2.7 大肠杆菌转化 | 第66页 |
4.2.8 菌液 PCR 鉴定及重组质粒的提取 | 第66-67页 |
4.2.9 Western Blot | 第67页 |
4.2.10 原生质体的提取和转化 | 第67页 |
4.3 结果与分析 | 第67-70页 |
4.3.1 拟南芥总 RNA 提取的质量检测 | 第67页 |
4.3.2 载体构建结果分析 | 第67-68页 |
4.3.3 转基因拟南芥阳性植株的 Western 鉴定结果 | 第68页 |
4.3.4 原生质体提取及转化效率检测 | 第68页 |
4.3.5 植物体内 CRY2 光小体的形成及变化趋势 | 第68-69页 |
4.3.6 BIC1、BIC2 抑制植物体内 CRY2 蓝光依赖的光小体形成 | 第69-70页 |
4.4 讨论 | 第70-71页 |
4.5 小结 | 第71-72页 |
第5章 BIC1、BIC2 影响植物蓝光受体 CRY2 与其互作蛋白 CIB1 的相互作用 | 第72-78页 |
5.1 实验材料 | 第72页 |
5.1.1 植物材料 | 第72页 |
5.1.2 实验菌株 | 第72页 |
5.1.3 载体 | 第72页 |
5.1.4 主要仪器 | 第72页 |
5.1.5 主要试剂及培养基配制 | 第72页 |
5.2 实验方法 | 第72-74页 |
5.2.1 拟南芥培养 | 第72页 |
5.2.2 拟南芥总 RNA 的提取及 cDNA 的合成 | 第72页 |
5.2.3 PCR 引物设计及扩增 | 第72-73页 |
5.2.4 PCR 产物回收纯化 | 第73页 |
5.2.5 目的片段连接表达载体 | 第73页 |
5.2.6 大肠杆菌(E.coil)感受态的制备 | 第73页 |
5.2.7 大肠杆菌转化 | 第73页 |
5.2.8 菌液 PCR 鉴定及重组质粒的提取 | 第73页 |
5.2.9 Western Blot | 第73页 |
5.2.10 原生质体的提取和转化 | 第73-74页 |
5.3 结果与分析 | 第74-77页 |
5.3.1 拟南芥总 RNA 提取的质量检测 | 第74页 |
5.3.2 载体构建结果分析 | 第74页 |
5.3.3 转基因拟南芥阳性植株的 Western 鉴定结果 | 第74页 |
5.3.4 原生质体提取及转化效率检测 | 第74页 |
5.3.5 BIC1、BIC2 抑制植物体内 CRY2 与其互作蛋白 CIB1 的相互作用 | 第74-77页 |
5.4 讨论 | 第77页 |
5.5 小结 | 第77-78页 |
第6章 结论与展望 | 第78-80页 |
6.1 实验结论 | 第78页 |
6.2 展望 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-93页 |
作者简介 | 第93-94页 |
致谢 | 第94页 |