| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩写符号和术语表 | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-46页 |
| 1.1 脂肪酶 | 第14-28页 |
| 1.1.1 脂肪酶简介 | 第14-15页 |
| 1.1.2 脂肪酶的一般结构特点 | 第15-17页 |
| 1.1.3 脂肪酶催化机理 | 第17-19页 |
| 1.1.4 脂肪酶对手性分子的立体识别 | 第19-22页 |
| 1.1.5 化学修饰 | 第22-26页 |
| 1.1.6 分子动力学模拟 | 第26-28页 |
| 1.2 胰岛素 | 第28-33页 |
| 1.2.1 胰岛素发展现状 | 第28-30页 |
| 1.2.2 胰岛素的理化性质和用途 | 第30-33页 |
| 1.3 半胱氨酸及其功能简介 | 第33-35页 |
| 1.3.1 半胱氨酸 | 第33页 |
| 1.3.2 半胱氨酸功能 | 第33-34页 |
| 1.3.3 二硫键 | 第34-35页 |
| 1.4 质谱技术解析 | 第35-43页 |
| 1.4.1 质谱技术简介 | 第35-36页 |
| 1.4.2 质谱仪及其工作原理 | 第36-40页 |
| 1.4.3 串联质谱技术简介 | 第40-41页 |
| 1.4.4 生物大分子质谱分析 | 第41-43页 |
| 1.5 本课题研究思路与研究内容 | 第43-46页 |
| 1.5.1 存在问题 | 第43-44页 |
| 1.5.2 研究思路 | 第44-45页 |
| 1.5.3 研究内容 | 第45-46页 |
| 第二章 化学修饰对洋葱假单胞菌脂肪酶性能的影响 | 第46-80页 |
| 2.1 前言 | 第46-47页 |
| 2.2 材料与方法 | 第47-62页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第47-48页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第48页 |
| 2.2.3 试剂配制 | 第48-49页 |
| 2.2.4 实验方法 | 第49-62页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第62-78页 |
| 2.3.1 SDS-PAGE结果 | 第62页 |
| 2.3.2 PcL化学修饰 | 第62-63页 |
| 2.3.3 PcL修饰前后MALDI-TOF-MS分析 | 第63-69页 |
| 2.3.4 化学修饰对PcL催化活力(p-NPP)的影响 | 第69-72页 |
| 2.3.5 化学修饰改善PcL手性仲醇对映体选择性 | 第72-74页 |
| 2.3.6 分子模拟研究 | 第74-75页 |
| 2.3.7 修饰后PcL手性仲醇对映体选择性改善机理讨论 | 第75-78页 |
| 2.4 本章小结 | 第78-80页 |
| 第三章 胰岛素和顺二氯二氨基铂相互作用质谱研究 | 第80-107页 |
| 3.1 前言 | 第80页 |
| 3.2 材料与方法 | 第80-81页 |
| 3.2.1 主要试剂 | 第80-81页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第81页 |
| 3.3 实验部分 | 第81-83页 |
| 3.3.1 材料和试剂 | 第81页 |
| 3.3.2 胰岛素、人类血管紧张素Ⅰ和顺二氯二氨基铂体外反应 | 第81-82页 |
| 3.3.3 MALDI-TOF/TOF-MS实验 | 第82页 |
| 3.3.4 ESI-IT/TOF-MS分析 | 第82-83页 |
| 3.4 结果和讨论 | 第83-106页 |
| 3.4.1 pH的影响 | 第83-84页 |
| 3.4.2 摩尔比的影响 | 第84-86页 |
| 3.4.3 反应时间的影响 | 第86-89页 |
| 3.4.4 蛋白质构象的影响 | 第89-91页 |
| 3.4.5 胰岛素和顺二氯二氨基铂反应物及结合位点鉴定 | 第91-106页 |
| 3.5 本章小结 | 第106-107页 |
| 第四章 MALDI基质-含巯基生物样品反应的质谱研究 | 第107-122页 |
| 4.1 前言 | 第107-108页 |
| 4.2 材料与方法 | 第108-110页 |
| 4.2.1 主要试剂 | 第108页 |
| 4.2.2 主要仪器 | 第108-110页 |
| 4.3. 结果与讨论 | 第110-121页 |
| 4.3.1 MALDI-TOF质谱分析 | 第110-114页 |
| 4.3.2 ESI-MS分析 | 第114-117页 |
| 4.3.3 加成反应机理解析 | 第117-118页 |
| 4.3.4 加成产物碎裂机理解析 | 第118-121页 |
| 4.4 本章小结 | 第121-122页 |
| 第五章 结论与展望 | 第122-124页 |
| 5.1 结论 | 第122-123页 |
| 5.2 展望 | 第123-124页 |
| 参考文献 | 第124-138页 |
| 附录B 洋葱假单胞菌脂肪酶序列 | 第138-139页 |
| 作者简历 | 第139-140页 |
| 博士期间主要科研成果 | 第140页 |
