摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
第一章 前言 | 第12-21页 |
·艾滋病概述 | 第12-15页 |
·HIV-1 病毒粒子结构 | 第13-14页 |
·HIV 基因组结构及功能 | 第14-15页 |
·TRIM5α 研究进展概述 | 第15-18页 |
·TRIM5α结构域的作用 | 第16-17页 |
·TRIM5α作用方式 | 第17页 |
·阻止病毒正常脱壳 | 第17页 |
·TRIM5α的泛素连接酶活性 | 第17-18页 |
·TRIMCyp | 第18页 |
·APOBEC3G 研究进展概述 | 第18-20页 |
·APOBEC3G 的发现 | 第18-19页 |
·APOBEC3G 的结构与功能 | 第19页 |
·Vif 蛋白抗APOBEC3G 的策略 | 第19-20页 |
·本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-31页 |
·实验材料 | 第21-23页 |
·实验所用菌种 | 第21页 |
·实验所用细胞及毛发 | 第21-22页 |
·主要试剂与试剂盒 | 第22-23页 |
·本论文中所使用的仪器 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-31页 |
·质粒DNA 的小量制备 | 第23页 |
·质粒的中量提取与大量提取 | 第23-24页 |
·脂质体法质粒DNA 转染 | 第24页 |
·逆转录酶活性检测 | 第24页 |
·间接免疫荧光检测 | 第24-25页 |
·恒河猴PBMC 的分离 | 第25页 |
·HIV-1 p24 标准定量检测检测(酶联免疫法) | 第25页 |
·毛发DNA 提取 | 第25-26页 |
·血液DNA 的小量提取 | 第26页 |
·血液RNA 的小量提取 | 第26-27页 |
·cDNA 的合成 | 第27页 |
·目的基因的扩增 | 第27-28页 |
·DNA 片段的纯化回收 | 第28页 |
·重组质粒APOBEC3G-human 和APOBEC3G-crab 的构建 | 第28-29页 |
·点突变质粒mAPOBEC3G-human 和mAPOBEC3G-crab 的构建 | 第29页 |
·病毒粒子的浓缩 | 第29页 |
·重组蛋白westren blotting 检测 | 第29-31页 |
第三章 结果 | 第31-43页 |
·SIVmac239 病毒拯救及鉴定 | 第31-34页 |
·SIVmac239 转染293T 反转录酶(RT)活性检测 | 第31页 |
·SIVmac239 转染上清接种TZM-bl 后间接免疫荧光检测 | 第31-32页 |
·SIVmac239 转染上清接种CEMX174 后细胞病变观察 | 第32页 |
·SIVmac239 转染上清接种CEMX174 后电镜观察 | 第32-33页 |
·SIVmac239 在CEMX174 细胞中复制动力学 | 第33页 |
·SIVmac239 在恒河猴PBMC 中复制动力学 | 第33-34页 |
·SHIV89.6P 病毒拯救及鉴定 | 第34-37页 |
·SHIV89.6P 转染293T 反转录酶(RT)活性检测 | 第34-35页 |
·SHIV89.6P 转染上清接种CEMX174 后细胞病变观察 | 第35页 |
·SHIV89.6P 转染上清接种CEMX174 后电镜观察 | 第35-36页 |
·SHIV89.6P 在CEMX174 细胞中复制动力学 | 第36页 |
·SHIV89.6P 在恒河猴PBMC 中复制动力学 | 第36-37页 |
·应用毛发 PCR 法检测猕猴属 TRIMCyp 突变个体 | 第37-39页 |
·平顶猴TRIMCyp 突变个体检测结果 | 第37页 |
·恒河猴TRIMCyp 突变个体检测结果 | 第37-38页 |
·食蟹猴TRIMCyp 突变检测结果 | 第38-39页 |
·人、食蟹猴APOBEC3G 基因克隆以及功能检测 | 第39-43页 |
·人APOBEC3G 基因克隆与鉴定 | 第39-40页 |
·食蟹猴APOBEC3G 基因克隆与鉴定 | 第40页 |
·人、食蟹猴APOBEC3G 基因128 位进行点突变 | 第40-41页 |
·人、食蟹猴APOBEC3G 基因以及点突变后表达鉴定 | 第41-42页 |
·人、食蟹猴APOBEC3G 基因以及点突变后功能验证 | 第42-43页 |
第四章 讨论 | 第43-45页 |
·参考毒株的选择 | 第43页 |
·病毒的拯救 | 第43-44页 |
·毛发 PCR 法对 TRIMCyp 突变猴的检测 | 第44页 |
·关于APOBEC3G 功能性试验 | 第44-45页 |
第五章 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
作者简历 | 第55页 |