摘要 | 第2-4页 |
abstract | 第4-5页 |
引言 | 第8-9页 |
材料和方法 | 第9-15页 |
1. 材料 | 第9-10页 |
1.1. 实验细胞来源 | 第9页 |
1.2 实验试剂 | 第9-10页 |
1.3 实验仪器 | 第10页 |
2. 实验方法 | 第10-15页 |
2.1 人骨性关节炎关节软骨细胞的分离与培养 | 第10页 |
2.2 软骨细胞鉴定 | 第10-11页 |
2.3 构建体外培养的OA软骨细胞的异常牵张应力细胞模型 | 第11页 |
2.4 OA患者体外培养的软骨细胞周期性机械牵张应力细胞模型下目的基因(FAM38A)及FAM38A相关表达蛋白Piezo1蛋白的检测 | 第11-13页 |
2.4.1. Piezo1蛋白和ERK5、ERK1/2 在软骨细胞的表达定位检测 | 第11-12页 |
2.4.2. Piezo1、ERK1/2、caspase-3、凋亡相关基因 Bcl-2, BAD 和 Bax 的基因相对表达量检测 | 第12-13页 |
2.5 Western-blot 蛋白定量检测 | 第13页 |
2.6 细胞浆钙离子水平检测 | 第13页 |
2.7 细胞凋亡分析 | 第13-14页 |
2.8 统计学分析 | 第14-15页 |
结果 | 第15-29页 |
1.软骨细胞的组织学镜下改变 | 第15-18页 |
2. OA软骨细胞的鉴定采用Ⅱ型胶原和多聚蛋白聚糖免疫组化染色 | 第18页 |
3.免疫荧光目的蛋白检测。 | 第18-19页 |
4. Piezo1, ERK5,ERK1/2,BAD,Bcl-2, Bax和Caspase-3 的mRNA的相对表达水平。 | 第19-22页 |
5. Western-blot的Piezo1蛋白检测结果 | 第22-24页 |
6.加力细胞内的钙离子水平检测 | 第24-26页 |
7. 体外Flexcell机械牵张应力软骨细胞模型中软骨细胞的细胞凋亡检测结果 | 第26-29页 |
讨论 | 第29-33页 |
结论 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-36页 |
综述 | 第36-46页 |
综述参考文献 | 第42-46页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |