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Piezo1蛋白通过MAPK信号通路介导软骨细胞凋亡的机制研究

摘要第2-4页
abstract第4-5页
引言第8-9页
材料和方法第9-15页
    1. 材料第9-10页
        1.1. 实验细胞来源第9页
        1.2 实验试剂第9-10页
        1.3 实验仪器第10页
    2. 实验方法第10-15页
        2.1 人骨性关节炎关节软骨细胞的分离与培养第10页
        2.2 软骨细胞鉴定第10-11页
        2.3 构建体外培养的OA软骨细胞的异常牵张应力细胞模型第11页
        2.4 OA患者体外培养的软骨细胞周期性机械牵张应力细胞模型下目的基因(FAM38A)及FAM38A相关表达蛋白Piezo1蛋白的检测第11-13页
            2.4.1. Piezo1蛋白和ERK5、ERK1/2 在软骨细胞的表达定位检测第11-12页
            2.4.2. Piezo1、ERK1/2、caspase-3、凋亡相关基因 Bcl-2, BAD 和 Bax 的基因相对表达量检测第12-13页
        2.5 Western-blot 蛋白定量检测第13页
        2.6 细胞浆钙离子水平检测第13页
        2.7 细胞凋亡分析第13-14页
        2.8 统计学分析第14-15页
结果第15-29页
    1.软骨细胞的组织学镜下改变第15-18页
    2. OA软骨细胞的鉴定采用Ⅱ型胶原和多聚蛋白聚糖免疫组化染色第18页
    3.免疫荧光目的蛋白检测。第18-19页
    4. Piezo1, ERK5,ERK1/2,BAD,Bcl-2, Bax和Caspase-3 的mRNA的相对表达水平。第19-22页
    5. Western-blot的Piezo1蛋白检测结果第22-24页
    6.加力细胞内的钙离子水平检测第24-26页
    7. 体外Flexcell机械牵张应力软骨细胞模型中软骨细胞的细胞凋亡检测结果第26-29页
讨论第29-33页
结论第33-34页
参考文献第34-36页
综述第36-46页
    综述参考文献第42-46页
攻读学位期间的研究成果第46-47页
致谢第47-48页

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