| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略语表 | 第6-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-15页 |
| 1.1 重金属污染现状 | 第9-10页 |
| 1.2 建立动物实验模型的意义、方法和用途 | 第10-11页 |
| 1.3 DNA甲基化 | 第11-13页 |
| 1.4 本实验研究目的和意义 | 第13-15页 |
| 第二章 SD大鼠亚慢性镉中毒试验模型的构建 | 第15-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第16页 |
| 2.2 主要仪器 | 第16-17页 |
| 2.3 主要试剂 | 第17页 |
| 2.4 试验方法 | 第17-23页 |
| 2.4.1 实验动物分组 | 第17页 |
| 2.4.2 镉对大鼠生长发育的影响 | 第17页 |
| 2.4.3 组织中镉蓄积含量的测定 | 第17-18页 |
| 2.4.4 组织切片的制作 | 第18页 |
| 2.4.5 核蛋白抽提及测定 | 第18-19页 |
| 2.4.6 过氧化氢酶（CAT）活力测定 | 第19-20页 |
| 2.4.7 谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）活力测定 | 第20-21页 |
| 2.4.8 脂质氧化终产物丙二醛（MDA）活力测定 | 第21-22页 |
| 2.4.9 超氧化物歧化酶（SOD）活力测定 | 第22-23页 |
| 2.5 数据处理 | 第23页 |
| 2.6 实验结果 | 第23-29页 |
| 2.6.1 镉对大鼠生长的影响 | 第23-24页 |
| 2.6.2 镉在肝脏和性腺组织中的蓄积量 | 第24-25页 |
| 2.6.3 镉对大鼠肝脏和性腺组织的影响 | 第25-26页 |
| 2.6.4 酶活力SOD、MDA、GSH-Px及CAT | 第26-29页 |
| 2.7 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 镉对大鼠性腺Caspase-9和Bcl-2基因甲基化影响 | 第31-57页 |
| 3.1 材料 | 第32-33页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第32页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第32页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第32-33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-38页 |
| 3.2.1 Real-Time PCR分析镉刺激后Bcl-2、Caspase-3、Bax、cycs、Aif、Caspase-9 基因的表达 | 第33-35页 |
| 3.2.2 Caspase-9和BCl-2基因启动子区甲基化状态检测 | 第35页 |
| 3.2.3 DNA提取 | 第35页 |
| 3.2.4 NaHSO3处理待检测DNA样品 | 第35-36页 |
| 3.2.5 甲基化特异性PCR法（MSP）检测caspase-9基因启动子区甲基化状态 | 第36-37页 |
| 3.2.6 巢式甲基化特异性PCR法（MSP）检测bcl-2基因启动子区甲基化状态 | 第37-38页 |
| 3.3 模型甲基化发生率统计 | 第38页 |
| 3.4 MassArray甲基化检测 | 第38-44页 |
| 3.4.1 组织DNA抽提 | 第39页 |
| 3.4.2 NaHSO3处理待检测DNA样品 | 第39-40页 |
| 3.4.3 目的基因Caspase-9和BCl-2引物方案设计 | 第40-42页 |
| 3.4.4 目的基因caspase-9和BCl-2潜在CpG岛预测 | 第42-43页 |
| 3.4.5 Sequenom MassArray系统甲基化检测 | 第43-44页 |
| 3.5 数据处理 | 第44页 |
| 3.6 实验结果 | 第44-54页 |
| 3.6.1 Bcl-2、Caspase-3、Bax、cycs、Aif、Caspase-9基因的组织分布 | 第44-50页 |
| 3.6.2 DNA质量检测 | 第50-51页 |
| 3.6.3 甲基化特异性PCR（MSP） | 第51-52页 |
| 3.6.4 大鼠镉中毒模型甲基化发生率 | 第52-53页 |
| 3.6.5 MassArray甲基化检测结果 | 第53-54页 |
| 3.7 讨论 | 第54-57页 |
| 第四章 结论与展望 | 第57-58页 |
| 4.1 结论 | 第57页 |
| 4.2 展望 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第67页 |
