| 英文缩略词表 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-14页 |
| 第一章 PPME1和LCMT1高表达HEK293细胞株的构建 | 第15-43页 |
| 前言 | 第15-16页 |
| 1 材料 | 第16-21页 |
| 1.1 细胞、质粒载体、菌株 | 第16-17页 |
| 1.2 主要试剂 | 第17-18页 |
| 1.3 试剂配制 | 第18-20页 |
| 1.4 主要仪器 | 第20-21页 |
| 2 方法 | 第21-31页 |
| 2.1 细胞培养 | 第21页 |
| 2.2 质粒构建 | 第21-27页 |
| 2.3 转染及G418筛选 | 第27-28页 |
| 2.4 Q-PCR检测mRNA表达情况 | 第28-29页 |
| 2.5 细胞总蛋白提取及其定量 | 第29页 |
| 2.6 Western Blot检测相关蛋白表达情况 | 第29-30页 |
| 2.7 细胞周期检测分析 | 第30-31页 |
| 2.8 融合蛋白核质分布分析 | 第31页 |
| 2.9 统计学方法 | 第31页 |
| 3 结果 | 第31-41页 |
| 3.1 质粒构建结果 | 第31-35页 |
| 3.2 成功构建带荧光标志的细胞株PPME1-GFP-293和LCMT1-GFP-293 | 第35-38页 |
| 3.3 成功构建稳定高表达的细胞株PPME1-293和LCMT1-293 | 第38-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 第二章 LCMT1高表达在细胞氧化应激中的作用及其机制 | 第43-58页 |
| 前言 | 第43-44页 |
| 1 材料 | 第44-45页 |
| 1.1 细胞 | 第44页 |
| 1.2 主要试剂 | 第44-45页 |
| 1.3 试剂配制 | 第45页 |
| 1.4 主要仪器 | 第45页 |
| 2 方法 | 第45-47页 |
| 2.1 细胞培养 | 第45页 |
| 2.2 细胞处理及分组 | 第45页 |
| 2.3 细胞形态观察 | 第45-46页 |
| 2.4 刃天青法检测细胞活性 | 第46页 |
| 2.5 Western Blot检测分析 | 第46页 |
| 2.6 流式细胞法检测细胞线粒体膜电位 | 第46-47页 |
| 2.7 统计学方法 | 第47页 |
| 3 结果 | 第47-55页 |
| 3.1 H_2O_2刺激引起细胞损伤 | 第47-49页 |
| 3.2 H_2O_2诱导PP2Ac蛋白发生去甲基化作用 | 第49页 |
| 3.3 AMZ-30阻滞H_2O_2引起的PP2Ac去甲基化但不影响细胞活性 | 第49-50页 |
| 3.4 LCMT1高表达阻滞H_2O_2引起的PP2Ac去甲基化并保护细胞 | 第50-51页 |
| 3.5 H_2O_2抑制mTORC1信号通路的磷酸化作用 | 第51-52页 |
| 3.6 LCMT1高表达保护mTORC1信号通路的磷酸化作用 | 第52页 |
| 3.7 LCMT1高表达保护细胞线粒体膜电位 | 第52-55页 |
| 4 讨论 | 第55-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 综述 | 第63-75页 |
| 参考文献 | 第71-75页 |
| 附录1 (重组质粒测序结果峰图) | 第75-83页 |
| 1 PPME1-pcDNA3.0 | 第75-77页 |
| 2 PPME1-pEGFP-N1 | 第77-79页 |
| 3 LCMT1-pcDNA3.0 | 第79-81页 |
| 4 LCMT1-pEGFP-N1 | 第81-83页 |
| 附录2 | 第83-84页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第83页 |
| 个人简历 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 附件 | 第85页 |
