| 中文摘要 | 第9-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 英文缩略词 | 第16-18页 |
| 前言 | 第18-20页 |
| 第一部分 Ferrostatin-1 对谷氨酸损伤HT-22 细胞的作用研究 | 第20-31页 |
| 1 实验材料和仪器 | 第20-21页 |
| 1.1 细胞株 | 第20页 |
| 1.2 药物 | 第20页 |
| 1.3 主要试剂 | 第20页 |
| 1.4 主要试剂配制 | 第20-21页 |
| 1.5 主要仪器 | 第21页 |
| 2 实验方法 | 第21-25页 |
| 2.1 细胞复苏 | 第21-22页 |
| 2.2 细胞传代和培养 | 第22页 |
| 2.3 细胞冻存 | 第22页 |
| 2.4 细胞计数 | 第22页 |
| 2.5 谷氨酸药液和Ferrostatin-1 药液的配制 | 第22-23页 |
| 2.6 谷氨酸造模浓度的筛选 | 第23页 |
| 2.7 实验分组及药物处理 | 第23页 |
| 2.8 Ferrostatin-1 对谷氨酸损伤HT-22 细胞的药物敏感性试验 | 第23-24页 |
| 2.9 Ferrostatin-1 对谷氨酸损伤HT-22 细胞形态的影响 | 第24页 |
| 2.10 Ferrostatin-1 对谷氨酸损伤HT-22 细胞膜通透性的影响 | 第24-25页 |
| 2.11 统计学方法 | 第25页 |
| 3 实验结果 | 第25-29页 |
| 3.1 建立谷氨酸损伤HT-22 细胞模型 | 第25-26页 |
| 3.2 Ferrostatin-1 对谷氨酸损伤HT-22 细胞存活率的影响 | 第26-27页 |
| 3.2.1 不同剂量Ferrostatin-1 对HT-22 细胞的影响 | 第26-27页 |
| 3.2.2 Ferrostatin-1 对谷氨酸损伤的HT-22 细胞存活率的影响 | 第27页 |
| 3.3 Ferrostatin-1 对谷氨酸损伤HT-22 细胞形态的影响 | 第27-28页 |
| 3.4 Ferrostatin-1 对谷氨酸损伤HT-22 细胞的LDH漏出的影响 | 第28-29页 |
| 4 讨论 | 第29-30页 |
| 4.1 Ferrostatin-1 对谷氨酸损伤的HT-22 细胞存活率的影响 | 第29页 |
| 4.2 Ferrostatin-1 对谷氨酸诱导HT-22 细胞LDH漏出的影响 | 第29-30页 |
| 5 小结 | 第30-31页 |
| 第二部分 谷氨酸诱导HT-22 细胞死亡与Ferroptosis的关系研究 | 第31-52页 |
| 1 实验材料和仪器 | 第31-34页 |
| 1.1 细胞株 | 第31页 |
| 1.2 药物 | 第31页 |
| 1.3 主要试剂 | 第31页 |
| 1.4 主要试剂配制 | 第31-33页 |
| 1.5 主要仪器 | 第33-34页 |
| 2 实验方法 | 第34-41页 |
| 2.1 细胞复苏 | 第34页 |
| 2.2 细胞传代和冻存 | 第34页 |
| 2.3 MTT法 | 第34-35页 |
| 2.4 流式细胞术检测MDC水平 | 第35页 |
| 2.5 荧光显微镜下观察DAPI染色 | 第35页 |
| 2.6 透射电子显微镜检测法 | 第35-36页 |
| 2.7 Western blot实验 | 第36-38页 |
| 2.7.1 提取蛋白样品 | 第36页 |
| 2.7.2 蛋白含量的测定 | 第36-37页 |
| 2.7.3 SDS－PAGE凝胶电泳 | 第37-38页 |
| 2.8 RT-qPCR实验检测细胞mRNA | 第38-41页 |
| 2.8.1 细胞RNA的提取 | 第38-39页 |
| 2.8.2 RNA纯度和浓度的鉴定 | 第39页 |
| 2.8.3 RNA逆转录成cDNA | 第39页 |
| 2.8.4 目的基因扩增 | 第39-40页 |
| 2.8.5 RT-qPCR分析方法 | 第40-41页 |
| 2.9 统计学方法 | 第41页 |
| 3 实验结果 | 第41-49页 |
| 3.1 MTT法检测不同细胞死亡抑制剂对谷氨酸诱导的HT-22 细胞存活率的影响 | 第41-42页 |
| 3.2 荧光显微镜观察DAPI染色结果 | 第42-43页 |
| 3.3 流式细胞仪检测Ferrostatin-1 对谷氨酸损伤HT-22 细胞内MDC水平的影响 | 第43-44页 |
| 3.4 透射电子显微镜观察谷氨酸诱导HT-22 细胞超微结构的变化 | 第44页 |
| 3.5 Western Blot检测FP1蛋白水平 | 第44-45页 |
| 3.6 Western Blot和RT-qPCR实验检测Ptgs2蛋白和基因水平 | 第45-49页 |
| 4 讨论 | 第49-50页 |
| 5 小结 | 第50-52页 |
| 第三部分 Ferrostatin-1 保护HT-22 细胞抵抗谷氨酸诱导的Ferroptosis的分子机制研究 | 第52-75页 |
| 1 实验材料和仪器 | 第52-55页 |
| 1.1 细胞株 | 第52页 |
| 1.2 药物 | 第52页 |
| 1.3 主要试剂 | 第52-53页 |
| 1.4 主要试剂配制 | 第53-54页 |
| 1.5 主要仪器 | 第54-55页 |
| 2 实验方法 | 第55-62页 |
| 2.1 细胞复苏 | 第55页 |
| 2.2 细胞传代和培养 | 第55页 |
| 2.3 实验分组及药物处理 | 第55页 |
| 2.4 流式细胞术 | 第55-56页 |
| 2.4.1 细胞线粒体膜电位（△Ψm） | 第55页 |
| 2.4.2 细胞活性氧（ROS）的变化 | 第55-56页 |
| 2.5 超氧化物歧化酶（SOD）检测 | 第56页 |
| 2.5.1 SOD试剂盒的组成与配制 | 第56页 |
| 2.5.2 检测方法 | 第56页 |
| 2.6 硫代巴比妥酸法检测丙二醛（MDA） | 第56-57页 |
| 2.6.1 试剂盒组成与试剂配制 | 第56-57页 |
| 2.6.2 检测方法 | 第57页 |
| 2.7 谷胱甘肽（GSH）水平检测 | 第57页 |
| 2.8 谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）活性检测 | 第57-58页 |
| 2.9 Western Blot实验 | 第58-60页 |
| 2.9.1 蛋白样品的收集 | 第58页 |
| 2.9.2 蛋白含量的测定 | 第58-59页 |
| 2.9.3 SDS－PAGE凝胶电泳 | 第59-60页 |
| 2.10 RT-qPCR实验检测细胞mRNA | 第60-62页 |
| 2.10.1 细胞RNA的提取 | 第60页 |
| 2.10.2 RNA纯度和浓度的鉴定 | 第60页 |
| 2.10.3 RNA逆转录成cDNA | 第60-61页 |
| 2.10.4 RT-qPCR扩增目的基因 | 第61-62页 |
| 2.10.4 RT-qPCR分析方法 | 第62页 |
| 2.11 统计学方法 | 第62页 |
| 3 结果 | 第62-72页 |
| 3.1 线粒体膜电位（△Ψm）的检测结果 | 第62-63页 |
| 3.2 胞质活性氧（ROS）和脂质活性氧（ROS）的检测结果 | 第63-66页 |
| 3.3 丙二醛（MDA）的检测结果 | 第66页 |
| 3.4 超氧化物歧化酶（SOD）的检测结果 | 第66-67页 |
| 3.5 谷胱甘肽（GSH）和谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）的检测结果 | 第67-68页 |
| 3.6 Western Blot实验 | 第68-70页 |
| 3.7 RT-qPCR实验 | 第70-72页 |
| 4 讨论 | 第72-74页 |
| 4.1 氧化应激与神经退行性疾病 | 第72页 |
| 4.2 GSH/GPX与Ferroptosis | 第72-73页 |
| 4.3 Nrf2/HO-1/GPX4途径与Ferroptosis | 第73-74页 |
| 5 小结 | 第74-75页 |
| 总结 | 第75-78页 |
| 技术路线图 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-83页 |
| 综述 | 第83-90页 |
| 参考文献 | 第87-90页 |
| 附录 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91页 |
