摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
目录 | 第11-14页 |
英文縮略词表 | 第14-18页 |
引言 | 第18-22页 |
1 OCILRP2及其配体NKRPlf | 第18-19页 |
2 树突状细胞与Toll样受体 | 第19-20页 |
3 TLR信号通路的调节 | 第20-22页 |
第一部分 OCILRP2-Fc的表达纯化及多克隆抗体的制备 | 第22-34页 |
1 材料方法 | 第22-30页 |
1.1 材料试剂 | 第22页 |
1.2 实验方法 | 第22-30页 |
1.2.1 pIg-CD5-OCILRP2质粒的提取 | 第22-23页 |
1.2.2 pIg-CD5-OCILRP2真核表达载体转染CHO细胞及稳定表达细胞株的筛选 | 第23-24页 |
1.2.3 双抗体夹心ELISA检测细胞培养上清中OCILRP2-Fc的表达 | 第24-25页 |
1.2.4 OCILRP2-Fc蛋白的表达与纯化 | 第25页 |
1.2.5 OCILRP2-Fc融合蛋白的鉴定 | 第25-26页 |
1.2.6 OCILRP2多克隆抗体的制备 | 第26-27页 |
1.2.7 OCILRP2多克隆抗体的纯化及鉴定 | 第27-30页 |
2 结果 | 第30-33页 |
2.1 pIg-CD5-OCILRP2质粒 | 第30页 |
2.2 建立了CHO稳定表达细胞株 | 第30-31页 |
2.3 获得了高纯度的OCILRP2-Fc蛋白 | 第31页 |
2.4 制备了能特异性结合OCILRP2的多克隆抗体 | 第31-33页 |
3 小结 | 第33-34页 |
第二部分 OCILRP2-Fc抑制树突状细胞的发育分化和功能 | 第34-49页 |
1 材料方法 | 第34-42页 |
1.1 材料试剂 | 第34页 |
1.2 实验方法 | 第34-42页 |
1.2.1 小鼠骨髓来源的树突状细胞的培养与诱导成熟 | 第34-35页 |
1.2.2 LPS结合实验分析LPS与OCILRP2的结合 | 第35页 |
1.2.3 分析OCILRP2在不成熟DC及成熟DC的表达 | 第35-37页 |
1.2.4 分析OCILRP2-Fc对DC发育分化及功能的影响 | 第37-39页 |
1.2.5 分析OCILRP2-Fc影响DC发育分化及功能的机制 | 第39-42页 |
2 结果 | 第42-48页 |
2.1 LPS不能结合OCILRP2-Fc | 第42页 |
2.2 TLR4活化信号上调OCILRP2在DC的表达 | 第42-43页 |
2.3 OCILRP2-Fc抑制DC的发育及成熟 | 第43-44页 |
2.4 OCILRP2-Fc对成熟DC细胞表面标志分子的表达没有影响 | 第44页 |
2.5 OCILRP2-Fc抑制DC的功能 | 第44-46页 |
2.5.1 OCILRP2-Fc抑制DC的抗原吞噬能力 | 第44-46页 |
2.5.2 OCILRP2-Fc抑制DC刺激CD4+T淋巴细胞的增殖能力 | 第46页 |
2.5.3 OCILRP2-Fc抑制LPS刺激的DC细胞因子分泌 | 第46页 |
2.6 OCILRP2-Fc抑制LPS诱导的DC发育及功能性分化的机制 | 第46-48页 |
2.6.1 OCILRP2-Fc通过阻断配体与OCILRP2结合发挥抑制作用 | 第46页 |
2.6.2 OCILRP2-Fc不能增加抑制性细胞因子IL-10的分泌 | 第46-47页 |
2.6.3 OCILRP2-Fc通过影响NF-κB活化发挥对DC的抑制作用 | 第47-48页 |
3 小结 | 第48-49页 |
第三部分 OCILRP2抗体对感染小鼠炎症反应的影响 | 第49-53页 |
1 材料方法 | 第49-51页 |
1.1 材料试剂 | 第49页 |
1.2 实验方法 | 第49-51页 |
1.2.1 小鼠LPS感染动物模型的制备 | 第49页 |
1.2.2 小鼠脏器组织HE染色 | 第49-51页 |
2 结果 | 第51-52页 |
2.1 OCILRP2抗体减轻LPS诱导的小鼠炎症反应 | 第51页 |
2.2 OCILRP2抗体提高感染性休克小鼠的存活率 | 第51-52页 |
3 小结 | 第52-53页 |
讨论 | 第53-58页 |
结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
综述 | 第65-81页 |
参考文献 | 第73-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
附录:主要试剂的配制 | 第82-91页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文及研究成果 | 第91页 |