| 前言 | 第8-22页 |
| 一、 NF-E2的结构 | 第9-10页 |
| 二、 NF-E2的合成及其调控 | 第10-12页 |
| 三、 NF-E2的功能 | 第12-19页 |
| 1 、 NF-E2在红系分化中的作用 | 第12-17页 |
| 2 、 NF-E2在巨核系分化中的作用 | 第17-19页 |
| 四、 NF-E2在疾病发展中的作用 | 第19-22页 |
| 实验流程 | 第22-27页 |
| 材料方法 | 第27页 |
| 材料 | 第27-33页 |
| 方法 | 第33-45页 |
| 一、 组织、细胞基因组DNA的提取 | 第33-34页 |
| 二、 RNA的提取 | 第34页 |
| 三、 细胞蛋白的提取 | 第34页 |
| 四、 IP裂解蛋白的获得 | 第34-35页 |
| 五、 质粒的小量制备 | 第35页 |
| 六、 质粒的大量制备 | 第35-36页 |
| 七、 重组表达质粒的构建 | 第36-38页 |
| 八、 表达质粒载体转染真核细胞 | 第38-39页 |
| 九、 同位素标记探针的制备 | 第39页 |
| 十、 Southern Blot | 第39-40页 |
| 十一、 Northern Blot | 第40-41页 |
| 十二、 带有放射信号的Northern Blot及Southern Blot的膜的strip | 第41页 |
| 十三、 Western Blot | 第41页 |
| 十四、 Western Blot检测后膜的strip | 第41页 |
| 十五、 免疫沉淀检测蛋白相互结合 | 第41-42页 |
| 十六、 免疫组化 | 第42-43页 |
| 十七、 基因芯片检测基因表达 | 第43-45页 |
| 结果 | 第45-78页 |
| 第一部分 NF-E2抗肿瘤作用的研究 | 第45-60页 |
| 一、 转染p45NF-IE对红白血病细胞系CB3、HB22.2生长及细胞周期相关蛋白的影响 | 第46-55页 |
| 1 、 转基因后CB3及HB22.2细胞株中p45NF-E2及珠蛋白基因表达的检测 | 第46-48页 |
| 2 、 转染外源p45NF-E2后CB3、HB22.2细胞生长曲线的检测 | 第48-49页 |
| 3 、 转染外源p45NF-E2后CB3、HB22.2细胞内细胞周期相关蛋白的 | 第49-54页 |
| 4 、 转染p45NF-E2后CB3及HB22.2细胞内AKT活性及Mapk变化 | 第54-55页 |
| 二、 HB60-5细胞经诱导分化后p45NF-E2及细胞周期相关蛋白的变化 | 第55-57页 |
| 1 、 HB60-5经诱导分化后p45NF-E2及珠蛋白基因表达的检测 | 第55-56页 |
| 2 、 HB60-5细胞经诱导分化后细胞周期相关蛋白的变化 | 第56-57页 |
| 三、 转染p45NF-E2后猴肾脏细胞COS1细胞周期相关蛋白的变化 | 第57-60页 |
| 1 、 转染外源p45NF-E2基因后COS1细胞中p45NF-E2及α珠蛋白的检测 | 第57-58页 |
| 2 、 转染外源p45NF-E2基因后COS1细胞内细胞周围相关蛋白的变化 | 第58-60页 |
| 第二部分 cDNA基因芯片检测NF-E2调节的基因变化 | 第60-72页 |
| 一、 应用基因芯片技术检测体内受到NF-E2调节的基 | 第61-66页 |
| 1 、 p45NF-E2+/+及p45NF-E2-/-小鼠胚胎基因表型及肝脏中血红蛋白的检测 | 第61-63页 |
| 2 、 基因芯片检测p45NF-E2+/+与p45NF-E2-/-小鼠胚胎肝脏基因表达的不同 | 第63-65页 |
| 3 、 基因芯片检测结果的验证 | 第65-66页 |
| 二、 应用基因芯片技术检测体外受到NF-E2调节的基因 | 第66-72页 |
| 1 、 基因芯片检测转染外源p45NF-E2前后CB3细胞内基因表达的变化 | 第66-68页 |
| 2 、 基因芯片检测转染外源p45NF-E2前后HB22.2细胞内基因表达的变 | 第68-72页 |
| 第三部分 红白血病细胞系中EDRF基因调节的研究 | 第72-78页 |
| 一、 EDRF在红白血病细胞系中表达情况的检测 | 第73-76页 |
| 1 、 EDRF在胚胎肝细胞中及红白血病细胞系中表达的比较 | 第73-74页 |
| 2 、 EDRF在多种红白血病细胞系中的表达情况及其基因表型 | 第74-76页 |
| 二、 诱导分化HB60-5细胞及转染Fli-1、GATA1的HB60-5细胞中EDRF表达情 | 第76-78页 |
| 1 、 HB60-5经诱导分化后细胞内EDRF以及Fli-1、GATA-1表达检测 | 第76-77页 |
| 2 、 转染GATA-1及Fli-1后HB60-5细胞内EDRF的改变 | 第77-78页 |
| 讨论 | 第78-95页 |
| 结论 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-102页 |
| 攻博期间发表的论文和成果 | 第102-103页 |
| 中文摘要 | 第103-106页 |
| 英文摘要 | 第106页 |
