| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第9-19页 |
| 1.1 转基因动物简介 | 第9-14页 |
| 1.1.1 转基因动物研究历史 | 第9页 |
| 1.1.2 转基因动物的制备方法 | 第9-14页 |
| 1.1.3 转基因动物的应用 | 第14页 |
| 1.2 转基因动物的现状 | 第14-16页 |
| 1.2.1 转基因技术亟待解决的问题 | 第15页 |
| 1.2.2 展望 | 第15-16页 |
| 1.3 人α-乳清蛋白的研究进展 | 第16页 |
| 1.4 外源基因整合位点的分析 | 第16-17页 |
| 1.4.1 TAIL-PCR 法 | 第16-17页 |
| 1.4.2 反向 PCR 法 | 第17页 |
| 1.4.3 染色体步移（Chromosome waiking） | 第17页 |
| 1.4.4 ST-PCR 法 | 第17页 |
| 1.5 本研究的内容和意义 | 第17-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.1 实验样本 | 第19页 |
| 2.1.2 生化药品及试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 DNA 分析软件 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-26页 |
| 2.2.1 基因组 DNA 的提取 | 第19-20页 |
| 2.2.2. TAIL-PCR 对 3′侧翼序列的扩增 | 第20-21页 |
| 2.2.3 PCR 产物纯化及回收 | 第21-22页 |
| 2.2.4 与 pEASY-T1 载体进行连接 | 第22页 |
| 2.2.5 转化 | 第22页 |
| 2.2.6 重组质粒检测及测序 | 第22-23页 |
| 2.2.7 外源基因 3’侧翼序列的验证 | 第23-24页 |
| 2.2.8 外源基因 5’侧翼序列的扩增及序列分析 | 第24-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-37页 |
| 3.1 外源基因 3′侧翼片段扩增结果 | 第26-29页 |
| 3.1.1 样本 081223 的 3′侧翼序列扩增结果 | 第26页 |
| 3.1.2 样本 172 的 3′侧翼序列扩增结果 | 第26-27页 |
| 3.1.3 样本 189 的 3′侧翼序列扩增结果 | 第27页 |
| 3.1.4 样本隆娃的 3′侧翼序列扩增结果 | 第27-28页 |
| 3.1.5 样本 K060923 的 3′侧翼序列扩增结果 | 第28-29页 |
| 3.2 外源基因 3′侧翼序列测定和结果分析 | 第29页 |
| 3.3 外源基因整合位点的结构示意图 | 第29-31页 |
| 3.4 外源基因 3’侧翼序列的验证 | 第31-32页 |
| 3.4.1 对未知序列 UN1 和 UN2 的验证 | 第31-32页 |
| 3.4.2 对外源片段和未知序列的连接验证 | 第32页 |
| 3.5 利用旁侧 PCR (Junction PCR)对外源基因 5′端侧翼序列的特异性扩增及分析 | 第32-35页 |
| 3.5.1 样本 081223 的 5′端侧翼序列的扩增及分析 | 第33页 |
| 3.5.2 样本 172 的 5′端侧翼序列的扩增及分析 | 第33-34页 |
| 3.5.3 样本 189 的 5′端侧翼序列的扩增及分析 | 第34-35页 |
| 3.6 外源基因的整合位点的确定 | 第35页 |
| 3.7 外源基因整合位点的结构示意图 | 第35-37页 |
| 4 讨论 | 第37-39页 |
| 5 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-48页 |
| 在读期间发展学术论文 | 第48-50页 |
| 简历 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
