摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 引言 | 第10-18页 |
1 鰤诺卡氏菌概况 | 第10-13页 |
1.1 生物学特性 | 第10-11页 |
1.2 鰤诺卡氏菌的致病性 | 第11页 |
1.3 鰤诺卡氏菌的诊断检测技术进展 | 第11-12页 |
1.4 鰤诺卡氏菌病防治研究进展 | 第12-13页 |
2 鰤诺卡氏菌致病因子 | 第13-14页 |
3 致病性放线菌毒力因子的结构与功能 | 第14-16页 |
3.1 MCE蛋白家族概况 | 第14-15页 |
3.2 Ag85复合物 | 第15页 |
3.3 PE/PPE 家族蛋白 | 第15-16页 |
3.4 Cho D | 第16页 |
3.5 磷脂酶C | 第16页 |
4 研究目的及意义 | 第16-18页 |
第二章 鰤诺卡氏菌侵染卵形鲳鲹后各组织菌载量动态变化 | 第18-27页 |
2.1 材料与方法 | 第18-23页 |
2.1.1 材料 | 第18-19页 |
2.1.2 方法 | 第19-23页 |
2.2 结果 | 第23-25页 |
2.2.1 标准曲线 | 第23-24页 |
2.2.2 鰤诺卡氏菌侵染卵形鲳鲹后鱼体各组织菌载量的动态变化 | 第24页 |
2.2.3 检测死亡高峰期鰤诺卡氏菌对卵形鲳鲹的组织嗜性 | 第24-25页 |
2.3 讨论 | 第25-27页 |
第三章 鰤诺卡氏菌mce1A基因的克隆 | 第27-47页 |
3.1 材料与方法 | 第27-32页 |
3.1.1 材料 | 第27-28页 |
3.1.2 方法 | 第28-32页 |
3.2 结果 | 第32-44页 |
3.2.1 MCE蛋白家族验证实验 | 第32-34页 |
3.2.2 PCR扩增结果 | 第34页 |
3.2.3 mce1A基因全序列 | 第34-36页 |
3.2.4 信号肽分析结果 | 第36-37页 |
3.2.5 跨膜分析结果 | 第37页 |
3.2.6 mce1A氨基酸序列分析 | 第37-40页 |
3.2.7 mce1A氨基酸序列的同源性分析 | 第40-41页 |
3.2.8 构建系统进化树 | 第41-44页 |
3.3 讨论 | 第44-47页 |
第四章 鰤诺卡氏菌mce1A基因原核表达 | 第47-59页 |
4.1 材料与方法 | 第47-54页 |
4.1.1 材料 | 第47页 |
4.1.2 方法 | 第47-54页 |
4.2 结果 | 第54-58页 |
4.2.1 PCR结果 | 第54页 |
4.2.2 质粒的双酶切 | 第54-55页 |
4.2.3 重组蛋白的诱导表达 | 第55页 |
4.2.4 重组蛋白原核表达条件的优化 | 第55-56页 |
4.2.5 重组蛋白的Western Blot检测 | 第56-57页 |
4.2.6 重组蛋白的可溶性检测 | 第57页 |
4.2.7 融合蛋白的纯化 | 第57-58页 |
4.3 讨论 | 第58-59页 |
第五章 鰤诺卡氏菌MCE1A亚单位疫苗免疫保护力研究 | 第59-63页 |
5.1 材料与方法 | 第59-60页 |
5.1.1 材料 | 第59页 |
5.1.2 方法 | 第59-60页 |
5.2 结果 | 第60-61页 |
5.2.1 免疫接种成活率 | 第60-61页 |
5.2.2 MCE1A蛋白免疫 30d后的免疫保护效果 | 第61页 |
5.3 讨论 | 第61-63页 |
第六章 鰤诺卡氏菌索状因子亚单位疫苗免疫保护力研究 | 第63-67页 |
6.1 材料与方法 | 第63-64页 |
6.1.1 材料 | 第63页 |
6.1.2 方法 | 第63-64页 |
6.2 结果 | 第64-66页 |
6.2.1 索状因子免疫接种成活率 | 第64页 |
6.2.2 索状因子免疫 15d后的免疫保护力 | 第64-65页 |
6.2.3 索状因子免疫 30d后的免疫保护力 | 第65-66页 |
6.3 讨论 | 第66-67页 |
全文总结 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-75页 |
附录 | 第75-76页 |
致谢 | 第76页 |