| 致谢 | 第4-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| SUMMARY | 第8-9页 |
| 第1章 引言 | 第12-40页 |
| 1.1 S-腺苷-L-甲硫氨酸 | 第12-16页 |
| 1.1.1 SAM的生理功能 | 第12-16页 |
| 1.2 S-腺苷-L-甲硫氨酸合成酶 | 第16-24页 |
| 1.2.1 哺乳动物MAT | 第17-18页 |
| 1.2.2 酵母MAT | 第18页 |
| 1.2.3 大肠杆菌MAT | 第18-21页 |
| 1.2.4 结核分枝杆菌MAT | 第21-22页 |
| 1.2.5 其它来源MAT | 第22页 |
| 1.2.6 大肠杆菌MAT蛋白与甲硫氨酸生物合成的调控 | 第22-24页 |
| 1.3 蛋白质的乙酰化修饰 | 第24-37页 |
| 1.3.1 N~α-乙酰化修饰 | 第26-27页 |
| 1.3.2 N~ε-乙酰化修饰 | 第27-35页 |
| 1.3.3 Sir2蛋白/大肠杆菌CobB蛋白 | 第35-37页 |
| 1.4 本研究的内容、目标及意义 | 第37-40页 |
| 第2章 大肠杆菌MAT的体外乙酰化与去乙酰化研究 | 第40-71页 |
| 2.1 材料与方法 | 第41-53页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第41-46页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第46-53页 |
| 2.2 结果与分析 | 第53-68页 |
| 2.2.1 大肠杆菌metK基因表达载体的构建 | 第53-54页 |
| 2.2.2 大肠杆菌MAT蛋白与CobB蛋白的表达与纯化 | 第54-57页 |
| 2.2.3 MAT蛋白的自乙酰化分析 | 第57-59页 |
| 2.2.4 大肠杆菌CobB蛋白催化MAT蛋白的去乙酰化分析 | 第59-60页 |
| 2.2.5 MAT蛋白乙酰化及去乙酰化的质谱分析 | 第60-68页 |
| 2.3 讨论 | 第68-71页 |
| 第3章 乙酰化赖氨酸残基突变对大肠杆菌MAT酶活性的影响 | 第71-94页 |
| 3.1 材料与方法 | 第71-81页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第71-75页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第75-81页 |
| 3.2 结果与分析 | 第81-90页 |
| 3.2.1 大肠杆菌metK突变体基因表达载体的构建 | 第81-83页 |
| 3.2.2 大肠杆菌metK突变体重组质粒的筛选与验证 | 第83-84页 |
| 3.2.3 大肠杆菌MAT突变体蛋白的可溶性分析 | 第84-89页 |
| 3.2.4 大肠杆菌MAT突变体蛋白酶活性分析 | 第89-90页 |
| 3.3 讨论 | 第90-94页 |
| 第4章 大肠杆菌MAT乙酰化水平对体外酶活性的影响 | 第94-102页 |
| 4.1 材料与方法 | 第94-97页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第94-96页 |
| 4.1.2 实验方法 | 第96-97页 |
| 4.2 结果与分析 | 第97-99页 |
| 4.2.1 乙酰化对MAT酶活性的影响 | 第97-98页 |
| 4.2.2 去乙酰化对MAT酶活性的影响 | 第98-99页 |
| 4.3 讨论 | 第99-102页 |
| 第5章 大肠杆菌CobB蛋白调节MAT蛋白体内活性的研究 | 第102-112页 |
| 5.1 材料与方法 | 第102-107页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第102-104页 |
| 5.1.2 实验方法 | 第104-107页 |
| 5.2 结果与分析 | 第107-110页 |
| 5.2.1 E. coli W3110野生型和cobB基因敲除株中MAT蛋白表达量分析 | 第107-108页 |
| 5.2.2 大肠杆菌体内SAM总量的测定 | 第108-110页 |
| 5.2.3 E. coli W3110野生型和E. coli W3110 cobB基因敲除株基因组DNA中5-mC甲基化水平分析 | 第110页 |
| 5.3 讨论 | 第110-112页 |
| 第6章 大肠杆菌MAT蛋白磷酸化修饰研究 | 第112-121页 |
| 6.1 材料与方法 | 第112-115页 |
| 6.1.1 实验材料 | 第112-113页 |
| 6.1.2 实验方法 | 第113-115页 |
| 6.2 结果与分析 | 第115-119页 |
| 6.2.1 MAT蛋白的自磷酸化分析 | 第115-116页 |
| 6.2.2 碱性磷酸酶催化MAT蛋白的去磷酸化分析 | 第116页 |
| 6.2.3 MAT蛋白磷酸化修饰的质谱分析 | 第116-119页 |
| 6.3 讨论 | 第119-121页 |
| 第7章 结论与讨论 | 第121-122页 |
| 参考文献 | 第122-142页 |
| 附录 | 第142-143页 |
| 附录1 缩略词表 | 第142-143页 |
| 作者简历 | 第143页 |
