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结核分枝杆菌mazEF基因及结核病生物标志物的探究

中文摘要第5-6页
英文摘要第6-7页
主要符号和缩略词语表第10-11页
第一部分 结核分枝杆菌mazEF基因的探究第11-44页
    前言第11-14页
    材料第14-15页
        1.1 菌株和质粒第14页
        1.2 主要试剂第14页
        1.3 实验用品第14页
        1.4 主要仪器设备第14-15页
    方法第15-21页
        2.1 结核分枝杆菌毒素-抗毒素系统mazEF3、6、9 质粒的构建第15-18页
            2.1.1 H37RV的培养第15页
            2.1.2 结核分枝杆菌DNA的提取第15-16页
            2.1.3 引物设计第16页
            2.1.4 目的片段的获取第16-17页
            2.1.5 目的片段的双酶切第17页
            2.1.6 载体的双酶切第17页
            2.1.7 目的片段与载体的连接第17页
            2.1.8 转化、克隆与筛选第17-18页
        2.2 北京/非北京基因型结核分枝杆菌、H37RV过表达菌株及缺失突变株的构建第18-19页
            2.2.1 结核分枝杆菌感受态的制备第18页
            2.2.2 质粒的提取第18页
            2.2.3 缺失突变株及过表达菌株的构建第18-19页
        2.3 构建菌株的检测第19-21页
            2.3.1 固体培养基上形态学观察第19页
            2.3.2 H37RV过表达菌株和亲本株在 7H9液体培养基中菌浓度的检测第19页
            2.3.3 北京基因型与非北京基因型不同培养条件下生存能力的观测第19-20页
            2.3.4 实时荧光定量检测H37RV不同电转电压下的表达量第20-21页
    结果第21-41页
        3.1 结核分枝杆菌毒素-抗毒素系统mazEF3、6、9 过表达质粒的构建第21-30页
            3.1.1 目的片段的获取第21-22页
            3.1.2 pMV361原始载体质粒图第22-30页
        3.2 构建的缺失突变株及过表达菌株的检测第30-41页
            3.2.1 固体培养基上H37RV过表达菌株菌落的形态观察第30-31页
            3.2.2 观察过表达菌株和亲本株在H37RV中的生长情况第31-32页
            3.2.3 观察不同菌株在不同培养条件下的生存能力第32-38页
            3.2.4 实时荧光定量检测mazEF3过表达菌株H37RV不同电转电压下的表达量第38-41页
    讨论第41-43页
    结论第43-44页
第二部分 结核病生物标志物的探究第44-61页
    前言第44-46页
    材料第46-47页
        1.1 对象第46页
        1.2 主要仪器及试剂第46-47页
    方法第47-49页
        2.1 QFT诊断试剂盒检测受试者结核分枝杆菌感染状态第47页
        2.2 血总RNA的提取第47页
        2.3 逆转录反应第47-48页
        2.4 荧光定量PCR检测第48页
        2.5 统计分析第48-49页
    结果第49-58页
        3.1 受试者结核分枝杆菌感染情况第49-50页
        3.2 组间7种细胞因子mRNA表达水平分析第50-52页
        3.3 三组人群的7种目标因子的表达量第52-53页
        3.4 健康组和潜伏感染组qRT-PCR结果ROC比较第53-54页
        3.5 活动性肺结核组和潜伏感染组qRT-PCR结果ROC比较第54-56页
        3.6 活动性结核组和健康组qRT-PCR结果ROC比较第56-57页
        3.7 结核潜伏感染者的跟踪随访第57-58页
    讨论第58-60页
    结论第60-61页
参考文献第61-66页
文献综述(1)第66-70页
    参考文献第67-70页
文献综述(2)第70-73页
    参考文献第71-73页
致谢第73-74页
作者简介第74-75页
导师评阅表第75页

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