中文摘要 | 第5-6页 |
英文摘要 | 第6-7页 |
主要符号和缩略词语表 | 第10-11页 |
第一部分 结核分枝杆菌mazEF基因的探究 | 第11-44页 |
前言 | 第11-14页 |
材料 | 第14-15页 |
1.1 菌株和质粒 | 第14页 |
1.2 主要试剂 | 第14页 |
1.3 实验用品 | 第14页 |
1.4 主要仪器设备 | 第14-15页 |
方法 | 第15-21页 |
2.1 结核分枝杆菌毒素-抗毒素系统mazEF3、6、9 质粒的构建 | 第15-18页 |
2.1.1 H37RV的培养 | 第15页 |
2.1.2 结核分枝杆菌DNA的提取 | 第15-16页 |
2.1.3 引物设计 | 第16页 |
2.1.4 目的片段的获取 | 第16-17页 |
2.1.5 目的片段的双酶切 | 第17页 |
2.1.6 载体的双酶切 | 第17页 |
2.1.7 目的片段与载体的连接 | 第17页 |
2.1.8 转化、克隆与筛选 | 第17-18页 |
2.2 北京/非北京基因型结核分枝杆菌、H37RV过表达菌株及缺失突变株的构建 | 第18-19页 |
2.2.1 结核分枝杆菌感受态的制备 | 第18页 |
2.2.2 质粒的提取 | 第18页 |
2.2.3 缺失突变株及过表达菌株的构建 | 第18-19页 |
2.3 构建菌株的检测 | 第19-21页 |
2.3.1 固体培养基上形态学观察 | 第19页 |
2.3.2 H37RV过表达菌株和亲本株在 7H9液体培养基中菌浓度的检测 | 第19页 |
2.3.3 北京基因型与非北京基因型不同培养条件下生存能力的观测 | 第19-20页 |
2.3.4 实时荧光定量检测H37RV不同电转电压下的表达量 | 第20-21页 |
结果 | 第21-41页 |
3.1 结核分枝杆菌毒素-抗毒素系统mazEF3、6、9 过表达质粒的构建 | 第21-30页 |
3.1.1 目的片段的获取 | 第21-22页 |
3.1.2 pMV361原始载体质粒图 | 第22-30页 |
3.2 构建的缺失突变株及过表达菌株的检测 | 第30-41页 |
3.2.1 固体培养基上H37RV过表达菌株菌落的形态观察 | 第30-31页 |
3.2.2 观察过表达菌株和亲本株在H37RV中的生长情况 | 第31-32页 |
3.2.3 观察不同菌株在不同培养条件下的生存能力 | 第32-38页 |
3.2.4 实时荧光定量检测mazEF3过表达菌株H37RV不同电转电压下的表达量 | 第38-41页 |
讨论 | 第41-43页 |
结论 | 第43-44页 |
第二部分 结核病生物标志物的探究 | 第44-61页 |
前言 | 第44-46页 |
材料 | 第46-47页 |
1.1 对象 | 第46页 |
1.2 主要仪器及试剂 | 第46-47页 |
方法 | 第47-49页 |
2.1 QFT诊断试剂盒检测受试者结核分枝杆菌感染状态 | 第47页 |
2.2 血总RNA的提取 | 第47页 |
2.3 逆转录反应 | 第47-48页 |
2.4 荧光定量PCR检测 | 第48页 |
2.5 统计分析 | 第48-49页 |
结果 | 第49-58页 |
3.1 受试者结核分枝杆菌感染情况 | 第49-50页 |
3.2 组间7种细胞因子mRNA表达水平分析 | 第50-52页 |
3.3 三组人群的7种目标因子的表达量 | 第52-53页 |
3.4 健康组和潜伏感染组qRT-PCR结果ROC比较 | 第53-54页 |
3.5 活动性肺结核组和潜伏感染组qRT-PCR结果ROC比较 | 第54-56页 |
3.6 活动性结核组和健康组qRT-PCR结果ROC比较 | 第56-57页 |
3.7 结核潜伏感染者的跟踪随访 | 第57-58页 |
讨论 | 第58-60页 |
结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-66页 |
文献综述(1) | 第66-70页 |
参考文献 | 第67-70页 |
文献综述(2) | 第70-73页 |
参考文献 | 第71-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
作者简介 | 第74-75页 |
导师评阅表 | 第75页 |