缩略语表 | 第6-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
前言 | 第14-16页 |
文献回顾 | 第16-31页 |
1. 银屑病概况 | 第16页 |
2. T细胞活化介导银屑病发病 | 第16-18页 |
3. 调节性T细胞 | 第18-24页 |
4. Foxo1对调节性T细胞发育及功能的调控作用 | 第24-28页 |
5. 调节性T细胞参与银屑病发病 | 第28-31页 |
1 材料 | 第31-40页 |
1.1 主要试剂 | 第31-33页 |
1.2 主要耗材 | 第33-34页 |
1.3 主要仪器 | 第34-36页 |
1.4 主要试剂配制方法 | 第36-40页 |
2 方法 | 第40-53页 |
2.1 临床样本 | 第40页 |
2.2 实验动物来源、鉴定及诱导基因敲除方法 | 第40-41页 |
2.3 外周血单个核细胞(PBMC)分离 | 第41页 |
2.4 细胞培养和复苏 | 第41-42页 |
2.5 小鼠脾脏单细胞悬液制备 | 第42页 |
2.6 银屑病小鼠模型建立 | 第42页 |
2.7 流式细胞分析 | 第42-43页 |
2.8 流式细胞分选 | 第43页 |
2.9 调节性T细胞抑制功能 | 第43-44页 |
2.10 调节性T细胞增殖功能 | 第44页 |
2.11 慢病毒转染调节性T细胞模型 | 第44-45页 |
2.12 血清刺激调节性T细胞模型 | 第45页 |
2.13 RNA提取和cDNA反转录 | 第45-46页 |
2.14 扩增PCR及琼脂糖凝胶电泳 | 第46页 |
2.15 实时荧光定量PCR | 第46-48页 |
2.16 蛋白提取及Western Blot | 第48-49页 |
2.17 石蜡切片和HE切片染色 | 第49-50页 |
2.18 冰冻切片制备 | 第50页 |
2.19 免疫荧光 | 第50-51页 |
2.20 染色质共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,CHIP) | 第51-52页 |
2.21 统计方法 | 第52-53页 |
3 结果 | 第53-70页 |
3.1 银屑病患者调节性T细胞数量比例无明显异常 | 第53-54页 |
3.2 银屑病患者调节性T细胞增殖能力低下 | 第54-55页 |
3.3 银屑病患者调节性T细胞免疫抑制功能减弱 | 第55-56页 |
3.4 银屑病患者调节性T细胞异常表达Th1细胞相关细胞因子 | 第56-59页 |
3.5 银屑病患者调节性T细胞AKT - Foxo1通路过度激活 | 第59-62页 |
3.6 银屑病患者血清促进调节性T细胞AKT - Foxo1通路激活 | 第62-63页 |
3.7 Foxo1通过T-bet - IFN-γ 通路影响调节性T细胞功能 | 第63-65页 |
3.8 调节性T细胞回输能够缓解IMQ诱导小鼠银屑病样表型 | 第65-68页 |
3.9 Foxo1缺陷的Treg细胞不能有效缓解小鼠银屑病样表型 | 第68-70页 |
4 讨论 | 第70-78页 |
小结 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-90页 |
附录 | 第90-92页 |
个人简历和研究成果 | 第92-94页 |
致谢 | 第94页 |