| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 前言 | 第12-26页 |
| 1 芜菁花叶病毒（TuMV）概况 | 第12页 |
| 1.1 芜菁花叶病毒生物学特性 | 第12页 |
| 1.2 芜菁花叶病毒分子生物学特性 | 第12页 |
| 2 Potyviruses编码蛋白研究进展 | 第12-16页 |
| 2.1 辅助成分蛋白酶（HC-Pro） | 第13-14页 |
| 2.2 P3蛋白（P3） | 第14-15页 |
| 2.3 病毒基因组连接蛋白（VPg） | 第15页 |
| 2.4 核内含体a蛋白（NIa-Pro） | 第15-16页 |
| 3 SWEET蛋白研究概况 | 第16-20页 |
| 3.1 SWEET的概述 | 第16-17页 |
| 3.2 SWEET蛋白的功能 | 第17-20页 |
| 4 植物病毒与寄主互作的分子机制及其研究方法 | 第20-23页 |
| 4.1 植物病毒与寄主互作的分子机制 | 第20-21页 |
| 4.2 植物病毒与寄主蛋白间互作的研究方法 | 第21-23页 |
| 5 实时荧光定量PCR的研究进展及其在植物中的应用 | 第23-25页 |
| 5.1 实时荧光定量PCR技术的原理 | 第23页 |
| 5.2 实时荧光定量PCR技术的检测方法 | 第23-24页 |
| 5.3 实时荧光定量PCR技术在植物中的应用 | 第24-25页 |
| 6 本研究的目的与意义 | 第25-26页 |
| 第2章 酵母双杂交验证TuMV编码蛋白与拟南芥AtSWEET1蛋白互作 | 第26-40页 |
| 1 材料 | 第26-28页 |
| 1.1 病毒样品 | 第26页 |
| 1.2 菌株和载体 | 第26页 |
| 1.3 生化及分子生物学试剂 | 第26页 |
| 1.4 主要试剂及配置 | 第26-28页 |
| 1.5 主要实验仪器 | 第28页 |
| 2 方法 | 第28-35页 |
| 2.1 酵母双杂交诱饵载体的构建 | 第28-34页 |
| 2.2 诱饵载体毒性及自激活的检测 | 第34-35页 |
| 2.3 共转化法验证蛋白间的互作 | 第35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-39页 |
| 3.1 酵母双杂交诱饵载体的构建 | 第35-36页 |
| 3.2 重组质粒的PCR与双酶切验证 | 第36-37页 |
| 3.3 诱饵载体毒性及自激活的检测结果 | 第37-38页 |
| 3.4 共转化法验证TuMV编码蛋白与AtSWEET1蛋白间的相互作用 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-40页 |
| 第3章 双分子荧光互补验证TuMV编码蛋白与拟南芥AtSWEET1蛋白互作 | 第40-50页 |
| 1 材料 | 第40-41页 |
| 1.1 病毒样品 | 第40页 |
| 1.2 菌株和载体 | 第40页 |
| 1.3 生化及分子生物学试剂 | 第40页 |
| 1.4 主要试剂及配置 | 第40-41页 |
| 1.5 主要实验仪器 | 第41页 |
| 2 方法 | 第41-46页 |
| 2.1 BiFC重组载体的构建 | 第41-44页 |
| 2.2 农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第44页 |
| 2.3 农杆菌侵染洋葱表皮细胞及双分子荧光互补观察 | 第44-45页 |
| 2.4 农杆菌浸润烟草及双分子荧光互补观察 | 第45-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-49页 |
| 3.1 重组质粒的PCR验证 | 第46页 |
| 3.2 BiFC验证NIa-Pro、HC-Pro、VPg与AtSWEET1在洋葱表皮互作 | 第46-47页 |
| 3.3 BiFC验证NIa-Pro、HC-Pro、VPg与AtSWEET1在烟草表皮互作 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-50页 |
| 第4章 免疫共沉淀验证TuMV编码蛋白与拟南芥AtSWEET1蛋白互作 | 第50-58页 |
| 1 材料 | 第50-51页 |
| 1.1 病毒样品 | 第50页 |
| 1.2 菌株和载体 | 第50页 |
| 1.3 生化及分子生物学试剂 | 第50页 |
| 1.4 主要试剂及配置 | 第50-51页 |
| 1.5 主要实验仪器 | 第51页 |
| 2 方法 | 第51-55页 |
| 2.1 Co-IP重组载体的构建 | 第51-54页 |
| 2.2 农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第54页 |
| 2.3 免疫共沉淀（Co-IP） | 第54-55页 |
| 3 结果 | 第55-57页 |
| 3.1 重组质粒的PCR验证 | 第55-56页 |
| 3.2 免疫共沉淀（Co-IP） | 第56-57页 |
| 4 讨论 | 第57-58页 |
| 第5章 TuMV编码蛋白间的互作 | 第58-67页 |
| 1 材料 | 第58页 |
| 1.1 病毒样品 | 第58页 |
| 1.2 菌株和载体 | 第58页 |
| 1.3 生化及分子生物学试剂 | 第58页 |
| 1.4 主要试剂及配置 | 第58页 |
| 1.5 主要实验仪器 | 第58页 |
| 2 方法 | 第58-63页 |
| 2.1 HC-Pro、VPg和NIa-Pro基因酵母双杂交猎物载体的构建 | 第58-62页 |
| 2.2 共转化验证HC-Pro、VPg和NIa-Pro蛋白同TuMV编码11 个蛋白互作 | 第62页 |
| 2.3 共转化法验证蛋白间的互作 | 第62-63页 |
| 3 结果与分析 | 第63-65页 |
| 3.1 酵母双杂交诱饵载体的构建 | 第63-64页 |
| 3.2 诱饵载体毒性及自激活的检测结果 | 第64-65页 |
| 3.3 共转化法验证TuMV编码蛋白自身及蛋白间的相互作用 | 第65页 |
| 4 讨论 | 第65-67页 |
| 第6章 拟南芥受TuMV侵染后At SWEET蛋白家族表达分析 | 第67-75页 |
| 1 材料 | 第67-68页 |
| 1.1 菌株和载体 | 第67页 |
| 1.2 生化及分子生物学试剂 | 第67页 |
| 1.3 主要试剂及配置 | 第67-68页 |
| 1.4 主要实验仪器 | 第68页 |
| 2 方法 | 第68-72页 |
| 2.1 浸润法接种拟南芥 | 第68页 |
| 2.2 Real-Time PCR | 第68-72页 |
| 3 结果与分析 | 第72-73页 |
| 3.1 检验病毒样品 | 第72页 |
| 3.2 AtSWEET基因家族表达量分析 | 第72-73页 |
| 4 讨论 | 第73-75页 |
| 结论 | 第75-76页 |
| 讨论 | 第76-78页 |
| 本研究存在的问题和展望 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-86页 |
| 作者简介 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
